【摘要】：研究背景高血壓、糖尿病、脂質(zhì)代謝紊亂和肥胖常常簇集出現(xiàn)而形成代謝綜合征，嚴(yán)重影響公眾的健康水平，微炎癥反應(yīng)在其中發(fā)揮了重要的作用。腎素-血管緊張素（RAS）系統(tǒng)除了血流動力學(xué)作用外，還促進(jìn)微炎癥反應(yīng)。阻斷RAS系統(tǒng)，對上述疾病具有一定的保護(hù)作用。RAS系統(tǒng)組分也存在于脂肪組織和脂肪細(xì)胞中，因此脂肪組織和脂肪細(xì)胞可能成為血管緊張素受體拮抗劑（ARBs）的作用靶點(diǎn)。 目的研究血管緊張素Ⅱ受體拮抗劑替米沙坦對脂多糖(LPS)刺激脂肪細(xì)胞分泌白細(xì)胞介素6（IL-6）、腫瘤壞死因子а（TNF-а）、脂聯(lián)素及三者mRNA表達(dá)的影響，并深入探討替米沙坦對脂肪細(xì)胞NF-κB通路和MAPK通路相關(guān)蛋白NF-κBp65、p-IκBα、IκBα、p-ERK1/2、ERK1/2、p-p38MAPK、p38MAPK、p-JNK和JNK表達(dá)的影響。 方法將培養(yǎng)成熟的脂肪細(xì)胞隨機(jī)分為6組：對照組，LPS（1μg/ml）組，LPS+替米沙坦0.01μg/ml,0.1μg/ml,1μg/ml和10μg/ml組。對照組加DMSO，LPS+替米沙坦組加入不同濃度替米沙坦，孵育2h后，LPS組和LPS+替米沙坦組再加入脂多糖（1μg/ml）孵育1h。細(xì)胞經(jīng)上述處理后，提取細(xì)胞上清和細(xì)胞總RNA，用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)和實時定量聚合酶聯(lián)反應(yīng)（Q-PCR）分別檢測各組TNF-а、IL-6和脂聯(lián)素的蛋白分泌水平及mRNA基因表達(dá)的差異。收集細(xì)胞，提取核蛋白和總蛋白，用Western免疫印跡法檢測各組核蛋白NF-κBp65、總蛋白p-IκBα、IκBα、p-ERK1/2、ERK1/2、p-p38MAPK、p38MAPK、p-JNK和JNK的表達(dá)，比較各組NF-κBp65核轉(zhuǎn)位以及其它蛋白磷酸化水平的差異。 結(jié)果與對照組相比，脂多糖刺激可使IL-6分泌升高2.7倍，mRNA表達(dá)升高4倍，替米沙坦干預(yù)后IL-6分泌及其mRNA表達(dá)均隨替米沙坦?jié)舛壬叱氏陆第厔�，其中最大劑量替米沙坦�?0μg/ml）干預(yù)后，IL-6分泌水平和mRNA表達(dá)分別下降約63%和67%。TNF-а分泌及其mRNA表達(dá)也隨替米沙坦?jié)舛壬叱氏陆�，與對照組相比，脂多糖刺激使TNF-а分泌升高約1.3倍，mRNA表達(dá)升高約3.5倍，最大劑量替米沙坦（10μg/ml）干預(yù)后，TNF-а分泌水平下降23%，mRNA表達(dá)下降86%。較之對照組，大劑量替米沙坦可使脂聯(lián)素的分泌及mRNA表達(dá)升高，而脂多糖對脂肪細(xì)胞脂聯(lián)素的分泌和mRNA表達(dá)沒有影響。脂多糖刺激后脂肪細(xì)胞胞漿內(nèi)IκBα磷酸化蛋白表達(dá)增強(qiáng)，NF-κBp65蛋白核轉(zhuǎn)位增加，胞核內(nèi)NF-κBp65蛋白表達(dá)增多，MAPK通路相關(guān)蛋白ERK1/2磷酸化和p38MAPK磷酸化水平也增強(qiáng)，而JNK蛋白磷酸化未檢測到。10μg/ml替米沙坦干預(yù)后，，NF-κBp65蛋白核轉(zhuǎn)位受抑制，核蛋白NF-κBp65表達(dá)減少，IκBα磷酸化表達(dá)也減少，MAPK通路蛋白ERK1/2磷酸化表達(dá)和p38MAPK磷酸化表達(dá)均減少。 結(jié)論替米沙坦能通過直接影響脂肪細(xì)胞炎性因子的分泌而發(fā)揮抗炎作用，其抗炎機(jī)制包括NF-κB通路中IκBα磷酸化和NF-κBp65核轉(zhuǎn)位以及MAPK通路中ERK1/2和p38MAPK的磷酸化。
[Abstract]:Background Hypertension, diabetes mellitus, lipid metabolism disorder and obesity are often clustered to form metabolic syndrome, which seriously affects the health of the public, in which micro-inflammation plays an important role. The renin-angiotensin (RAS) system promotes microinflammation in addition to hemodynamics. Blocking the RAS system has some protective effect on the above diseases. The components of RAS system also exist in adipose tissue and adipocyte, so adipose tissue and adipocytes may be the target of angiotensin receptor antagonist (ARBs). Objective to study the effects of telmisartan, an angiotensin 鈪

本文編號：2286108