【摘要】：第一部分納米銀離子對表皮葡萄球菌生物膜結(jié)構(gòu)的影響 目的:探討納米銀離子對表皮葡萄球菌(Staphylococcus epidermidis)生物膜(biofilm)結(jié)構(gòu)的影響。 方法:運(yùn)用搖床法,以納米銀離子含量不同的乙烯-醋酸乙烯酯( Ethylene-Vinyl acetate, EVA)塑料為細(xì)菌粘附載體,建立體外生物膜模型;將培養(yǎng)2d的標(biāo)本分別在掃描電子顯微鏡(Scanning Electron Microscopy,SEM)及用異硫氰酸標(biāo)記的刀豆蛋白A(FITC conjugated concanavalin A,FITC-conA)染色后熒光顯微鏡下觀察空白組與納米銀離子干預(yù)組中生物膜的形成情況;熒光探針SYTO9/PI標(biāo)記生物膜內(nèi)細(xì)菌、激光共聚焦顯微鏡(Confocal Laser Scanning Microscopy,CLSM)并結(jié)合生物膜圖形結(jié)構(gòu)分析軟件(Image Structure Analyze ,ISA)觀察納米銀離子作用后1d、2d組生物膜的結(jié)構(gòu)變化。 結(jié)果:2d組生物膜經(jīng)SEM及熒光顯微鏡檢測,納米銀離子干預(yù)組與空白對照組相比,細(xì)菌變稀疏,結(jié)構(gòu)明顯受到破壞,多糖產(chǎn)量減少。CLSM下觀察可見納米銀離子干預(yù)組生物膜菌落變稀疏,孔道變多;ISA軟件分析結(jié)果顯示, 2d時(shí)空白對照組與0.1%納米銀離子干預(yù)組生物膜厚度、平均擴(kuò)散距離(average diffusion distance ADD)和結(jié)構(gòu)熵(textual entropy TE),分別為17.55±2.08和10.80±1.68;3.56±0.54和1.85±0.06;5.29±0.57和2.72±0.39(p0.05);區(qū)域孔率(Areal porosity AP)為0.90±0.02和0.98±0.01(p0.05)。0.05%納米銀離子組其作用效應(yīng)沒有0.1%納米銀離子組明顯。1d組生物膜也有相同的趨勢。 結(jié)論:納米銀離子可破壞表皮葡萄球菌生物膜的結(jié)構(gòu),高濃度組較低濃度組效果明顯。 第二部分納米銀離子對表皮葡萄球菌生物膜形成過程的影響 目的:探討納米銀離子對表皮葡萄球菌(Staphylococcus epidermidis)生物膜(biofilm)形成過程的影響。 方法:運(yùn)用搖床法,以納米銀離子含量不同的乙烯-醋酸乙烯酯( Ethylene-Vinyl acetate, EVA)塑料為細(xì)菌粘附載體,建立體外生物膜模型;將各個(gè)時(shí)間點(diǎn)培養(yǎng)好的標(biāo)本放在掃描電子顯微鏡(Scanning ElectronMicroscopy,SEM)及用結(jié)晶紫染色后在倒置顯微鏡下觀察空白組與納米銀離子干預(yù)組中生物膜的形成情況,并結(jié)合NIS-Element BR軟件計(jì)算生物膜覆蓋率(biofilm coverage rate, BCR);熒光探針SYTO9/PI標(biāo)記生物膜內(nèi)細(xì)菌、激光共聚焦顯微鏡(Confocal Laser Scanning Microscopy,CLSM)結(jié)合生物膜圖形結(jié)構(gòu)分析軟件(Image Structure Analyze ,ISA)觀察納米銀離子作用后各時(shí)間點(diǎn)生物膜的結(jié)構(gòu)變化。 結(jié)果:2d組生物膜經(jīng)SEM檢測,納米銀離子干預(yù)組較空白對照組相比,生物膜的結(jié)構(gòu)明顯受到破壞,細(xì)菌變稀疏。BCR檢測,0.5d時(shí)納米銀離子干預(yù)組較空白對照組相比沒有差異,但在1d、2d時(shí)BCR有差異性(p0.05)。CLSM結(jié)合ISA軟件分析結(jié)果顯示, 2d時(shí)空白對照組與0.1%納米銀離子干預(yù)組生物膜厚度、平均擴(kuò)散距離(average diffusion distance ADD)和結(jié)構(gòu)熵(textual entropy TE),分別為17.55±2.08和11.33±0.98;3.12±0.30和1.93±0.13;5.79±和3.17±0.16(p0.05);區(qū)域孔率(Areal porosity AP)為0.90±0.01和0.98±0.01(p0.05)。但5d時(shí)兩組參數(shù)之間沒有差異。0.05%納米銀離子組也有相同的趨勢。 結(jié)論:納米銀離子對表皮葡萄球菌的形成有抑制作用,但隨著時(shí)間的推移,其抗菌作用逐漸減弱。高濃度組較低濃度組抗菌效果持續(xù)時(shí)間更長,效果更明顯。
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【學(xué)位授予單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2011
【分類號】：R378.11

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：2285993