本文選題：微針 + 可溶性　； 參考：《免疫學(xué)雜志》2017年06期

【摘要】：目的初步研究負(fù)載流感全病毒滅活疫苗可溶性微針體外評價方法和經(jīng)皮免疫效果。方法將流感全病毒滅活疫苗溶液與微針基質(zhì)材料混勻干燥后復(fù)溶,體外血凝試驗(yàn)檢測疫苗血凝素活性,透射電鏡和動態(tài)光散射分析疫苗微針復(fù)溶后流感全病毒疫苗變化情況;選擇篩選的材料羧甲基纖維素和硫酸軟骨素作為主要基質(zhì)與疫苗混勻制備微針溶液,滴加到微針制作模具上,抽真空使疫苗基質(zhì)溶液填充針體,室溫干燥、脫模,貼于豬皮膚檢測微針硬度,將Cy7標(biāo)記流感疫苗可溶性微針貼于小鼠腹部后活體成像檢測流感疫苗皮內(nèi)存留時間,動物免疫試驗(yàn)第2次免疫后14 d檢測血抑效價。結(jié)果通過血凝試驗(yàn)篩選出硫酸軟骨素和羧甲基纖維素為主要基質(zhì),貼片疫苗血凝活性為96%和86%,顯著高于其它3種材料貼片疫苗活性;透射電鏡顯示PBS對照組中流感滅活病毒顆粒多呈單個散在分布,罕見聚團(tuán),2種貼片復(fù)溶后流感滅活病毒多呈聚團(tuán),罕見單個病毒顆粒;動態(tài)光散射分析顯示疫苗貼片復(fù)溶后病毒顆粒粒徑明顯增大,高于對照組中病毒粒徑;皮膚組織病理顯示2種疫苗微針均可刺穿豬皮膚;活體成像顯示疫苗微針刺穿小鼠皮膚并溶解于皮內(nèi),疫苗存留時間較肌肉長;Balb/c小鼠免疫后分離血清,血凝抑制試驗(yàn)顯示2種微針均產(chǎn)生血抑效價且硫酸軟骨素微針血抑效價高于羧甲基纖維素微針。結(jié)論可溶性疫苗微針可刺穿皮膚溶于皮內(nèi)產(chǎn)生免疫應(yīng)答,為微針疫苗的研究提供了思路。
[Abstract]:Objective to study the in vitro evaluation and percutaneous immunization of inactivated influenza virus vaccine with soluble microneedle. Methods Influenza virus inactivated vaccine solution was mixed with microneedle matrix and then redissolved. Hemagglutination test in vitro was used to detect hemagglutinin activity. Transmission electron microscopy and dynamic light scattering were used to analyze the changes of influenza virus vaccine after microneedle relysis. The selected materials, carboxymethyl cellulose and chondroitin sulfate, were used as the main matrix to prepare the microneedle solution, and the microneedle solution was added to the microneedle mould. The vaccine matrix solution was filled with the needle body, dried at room temperature, and demoulded. The microneedle hardness of swine skin was detected, the soluble microneedle of Cy7 labeled influenza vaccine was applied to mouse abdomen to detect the survival time of influenza vaccine skin, and the blood inhibitory value was detected 14 days after the second immunization of animal immunity test. Results Chondroitin sulfate and carboxymethyl cellulose were selected as the main matrix by hemagglutination test. The hemagglutination activity of patch vaccine was 96% and 86%, which was significantly higher than that of the other three materials. Transmission electron microscopy showed that influenza inactivated virus particles in PBS control group were mostly distributed in a single form. Dynamic light scattering (DLS) analysis showed that the particle size of the virus increased significantly after redissolution of the vaccine patch, which was higher than that of the control group, and the skin histopathology showed that two kinds of vaccine microneedles could puncture the pig skin. In vivo imaging showed that the vaccine punctured the skin and dissolved in the skin of the mice, and the vaccine remained longer than the muscle and separated the serum from Balb / c mice after immunization. The results of hemagglutination inhibition test showed that both microneedles produced blood inhibitory potency and the blood inhibitory effect of chondroitin sulfate microneedles was higher than that of carboxymethyl cellulose microneedles. Conclusion soluble vaccine microneedle can penetrate the skin and produce immune response in skin, which provides a way for the study of microneedle vaccine.
【作者單位】： 寧夏醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院病原生物學(xué)與免疫學(xué)教研室;軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院微生物流行病研究所病原微生物生物安全國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;中國科學(xué)院理化技術(shù)研究所;
【基金】：國家科技重大專項(xiàng)課題(2013ZX10004003001)
【分類號】：R392-33

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