本文選題：熒光共振能量轉(zhuǎn)移 + c��； 參考：《安徽醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)》2017年11期

【摘要】：大鼠成纖維樣滑膜細(xì)胞(FLS)轉(zhuǎn)染pc DNA3-ICUE3質(zhì)粒,用熒光共振能量轉(zhuǎn)移(FRET)法觀察前列腺素(PGE2)刺激下大鼠FLS環(huán)磷酸腺苷(c AMP)水平的實(shí)時(shí)變化,與放免法檢測(cè)進(jìn)行比較。FRET檢測(cè)到FLS在PGE2刺激后1 min,c AMP升高14.93%,且不同批次實(shí)驗(yàn)差異較小;放免法檢測(cè)到c AMP升高7.79%;FRET可檢測(cè)到PGE2受體拮抗劑對(duì)c AMP產(chǎn)生的抑制,可觀察到1 nmol/L PGE2促進(jìn)c AMP產(chǎn)生,放免法檢測(cè)PGE2產(chǎn)生效應(yīng)最低濃度為0.1μmol/L。提示FRET法檢測(cè)靈敏、重復(fù)性高,為G蛋白偶聯(lián)受體信號(hào)通路研究的可靠技術(shù)手段。
[Abstract]:Rat fibroblast synovial cells (FLS) were transfected with pcDNA3-ICUE3 plasmid. The real-time changes of the level of cyclic adenosine monophosphate (c-AMP) were observed by fluorescence resonance energy transfer (fret) in rats stimulated by prostaglandin (PGE2). Compared with radioimmunoassay, FLS increased camp by 14.93% at 1 min after PGE2 stimulation, and showed little difference in different batches of experiments, and the inhibition of camp production by PGE2 receptor antagonist was detected by radioimmunoassay by 7.79% FRET. It was observed that 1 nmol / L PGE2 promoted the production of camp, and the lowest concentration of PGE2 production by radioimmunoassay was 0.1 渭 mol 路L ~ (-1) 路L ~ (-1) 路L ~ (-1) 路L ~ (-1). The results suggest that fret method is sensitive and reproducible, which is a reliable technique for the study of G protein coupled receptor signaling pathway.
【作者單位】： 安徽醫(yī)科大學(xué)臨床藥理研究所抗炎免疫藥物教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室安徽抗炎免疫藥物協(xié)同創(chuàng)新中心;
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金(編號(hào):81173075、81330081、81202541) 安徽省自然科學(xué)基金(編號(hào):1208085QH146) 安徽醫(yī)科大學(xué)青年拔尖人才支持計(jì)劃(2013) 安徽醫(yī)科大學(xué)第三批中青年學(xué)術(shù)技術(shù)帶頭人
【分類號(hào)】：R3416

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本文編號(hào)：2074096