本文選題：熒光共振能量轉(zhuǎn)移 + c��； 參考：《安徽醫(yī)科大學學報》2017年11期

【摘要】：大鼠成纖維樣滑膜細胞(FLS)轉(zhuǎn)染pc DNA3-ICUE3質(zhì)粒,用熒光共振能量轉(zhuǎn)移(FRET)法觀察前列腺素(PGE2)刺激下大鼠FLS環(huán)磷酸腺苷(c AMP)水平的實時變化,與放免法檢測進行比較。FRET檢測到FLS在PGE2刺激后1 min,c AMP升高14.93%,且不同批次實驗差異較小;放免法檢測到c AMP升高7.79%;FRET可檢測到PGE2受體拮抗劑對c AMP產(chǎn)生的抑制,可觀察到1 nmol/L PGE2促進c AMP產(chǎn)生,放免法檢測PGE2產(chǎn)生效應(yīng)最低濃度為0.1μmol/L。提示FRET法檢測靈敏、重復(fù)性高,為G蛋白偶聯(lián)受體信號通路研究的可靠技術(shù)手段。
[Abstract]:Rat fibroblast synovial cells (FLS) were transfected with pcDNA3-ICUE3 plasmid. The real-time changes of the level of cyclic adenosine monophosphate (c-AMP) were observed by fluorescence resonance energy transfer (fret) in rats stimulated by prostaglandin (PGE2). Compared with radioimmunoassay, FLS increased camp by 14.93% at 1 min after PGE2 stimulation, and showed little difference in different batches of experiments, and the inhibition of camp production by PGE2 receptor antagonist was detected by radioimmunoassay by 7.79% FRET. It was observed that 1 nmol / L PGE2 promoted the production of camp, and the lowest concentration of PGE2 production by radioimmunoassay was 0.1 渭 mol 路L ~ (-1) 路L ~ (-1) 路L ~ (-1) 路L ~ (-1). The results suggest that fret method is sensitive and reproducible, which is a reliable technique for the study of G protein coupled receptor signaling pathway.
【作者單位】： 安徽醫(yī)科大學臨床藥理研究所抗炎免疫藥物教育部重點實驗室安徽抗炎免疫藥物協(xié)同創(chuàng)新中心;
【基金】：國家自然科學基金(編號:81173075、81330081、81202541) 安徽省自然科學基金(編號:1208085QH146) 安徽醫(yī)科大學青年拔尖人才支持計劃(2013) 安徽醫(yī)科大學第三批中青年學術(shù)技術(shù)帶頭人
【分類號】：R3416

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本文編號：2074096