天堂国产午夜亚洲专区-少妇人妻综合久久蜜臀-国产成人户外露出视频在线-国产91传媒一区二区三区

HIF-1α對DDAH1的調(diào)節(jié)及機制研究

發(fā)布時間:2018-06-10 11:13

  本文選題:DDAH1 + HIF-1α; 參考:《華中科技大學(xué)》2011年碩士論文


【摘要】:研究目的:觀察DDAH1在CoCl2干預(yù)下的表達變化,以及HIF-1α在DDAH1基因調(diào)控的作用機制。 方法與結(jié)果:選取200g左右雄性wistar大鼠若干,隨機分為2組分別為:CoCl2組大鼠腹腔注射CoCl2(30mg/kg)(n=8),NaCl組大鼠腹腔注射生理鹽水(n=8)。我們發(fā)現(xiàn)CoCl2模擬缺氧刺激可以增加DDAH1蛋白的表達。細胞實驗中我們發(fā)現(xiàn)用CoCl2干預(yù)的HUVEC、293T和HepG2中DDAH1的表達與HIF-1α有伴隨效應(yīng)。接下來的實驗中我們利用HIF-1αSiRNA沉默HIF-1α蛋白的表達,實驗的結(jié)果表明HIF-1α能夠調(diào)節(jié)DDAH1的表達。對DDAH1啟動子區(qū)的基因序列進行分析,我們發(fā)現(xiàn)有兩個HRE元件,因此我們構(gòu)建了DDAH1的啟動子區(qū)不同片段長度的熒光報告基因的質(zhì)粒,然后瞬時轉(zhuǎn)染到HepG2和HEK293T中,CoCl2(200μM)干預(yù)8小時后我們檢測熒光素酶活性,結(jié)果表明在DDAH1啟動子-370?-387有可能是HIF-1α調(diào)控DDAH1啟動子的活性區(qū)域。接著將上述質(zhì)粒的HRE元件突變,即DDAH1啟動子片段特定位點突變,轉(zhuǎn)染到細胞,我們發(fā)現(xiàn)在誘導(dǎo)HIF-1α高表達的情況下熒光素酶活性不增加。同時,ChIP實驗結(jié)果顯示,HIF-1α能夠特異性的結(jié)合到DDAH1的啟動子區(qū)。 結(jié)論:我們證明DDAH1是缺氧誘導(dǎo)基因,其轉(zhuǎn)錄是通過HIF-1α結(jié)合到大鼠DDAH1啟動子的-370?-387的HRE元件來調(diào)控DDAH1的表達。
[Abstract]:Objective: to observe the changes of DDAH1 expression in CoCl2 and the mechanism of HIF-1 偽 in DDAH1 gene regulation. Methods and results: several male wistar rats were selected. Two groups were randomly divided into two groups: the rats in the control group were injected with 30 mg / kg of CoCl2 and 30 mg / kg, respectively, and the rats in the NaCl group were injected intraperitoneally with normal saline. We found that the expression of DDAH1 protein was increased by simulated hypoxia stimulation by CoCl2. We found that the expression of DDAH1 in HUVEC-293T and HepG2 induced by CoCl2 was associated with HIF-1 偽. In the following experiment, we used HIF-1 偽 SiRNA to silence the expression of HIF-1 偽 protein. The results showed that HIF-1 偽 could regulate the expression of DDAH1. By analyzing the gene sequence of DDAH1 promoter region, we found that there are two HRE elements, so we constructed the plasmid of fluorescent reporter gene with different fragment length in the promoter region of DDAH1. The luciferase activity was detected after 8 hours of transient transfection into HepG2 and HEK293T. The results showed that the DDAH1 promoter -370-387 might be the active region of DDAH1 promoter regulated by HIF-1 偽. Then the HRE element mutation of the above plasmid, that is, the specific site mutation of DDAH1 promoter fragment, was transfected into the cells. We found that luciferase activity did not increase when HIF-1 偽 expression was induced. At the same time, the results of ChIP showed that HIF-1 偽 could specifically bind to the promoter region of DDAH1.Conclusion: we suggest that DDAH1 is anoxia-induced gene, and its transcription is regulated by HRE element of HIF-1 偽 binding to rat DDAH1 promoter -370-387.
【學(xué)位授予單位】:華中科技大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2011
【分類號】:R363

【相似文獻】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 馬凌,曹廣文;組織特異性轉(zhuǎn)錄調(diào)控序列及在腫瘤基因治療研究中的應(yīng)用[J];國外醫(yī)學(xué).免疫學(xué)分冊;1997年03期

2 郭亞兵,戴煒,盧橋生,侯金林,馮筱榕,駱抗先;重型乙型肝炎病毒C基因啟動子變異[J];中華傳染病雜志;1999年02期

3 齊永;高江平;李琦;洪寶發(fā);伍志強;趙亞力;;阿司匹林對基質(zhì)金屬蛋白酶9啟動子活性的影響[J];中國臨床藥理學(xué)與治療學(xué);2005年10期

4 王軍利;張惠中;白萬勝;劉麗;卞卡;成詩銀;;喉癌組織中TSLC1基因啟動子過甲基化及mRNA表達[J];第四軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報;2007年07期

5 武圣明,鄒竹英,周向軍,蔡龍榮,溫肇榮;人αB干擾素在Saccharomyce cerevisiae中的合成和分泌[J];第二軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報;1988年04期

6 張玉彬;吳梧桐;王e,

本文編號:2003014


資料下載
論文發(fā)表

本文鏈接:http://sikaile.net/xiyixuelunwen/2003014.html


Copyright(c)文論論文網(wǎng)All Rights Reserved | 網(wǎng)站地圖 |

版權(quán)申明:資料由用戶47aec***提供,本站僅收錄摘要或目錄,作者需要刪除請E-mail郵箱bigeng88@qq.com
日韩中文字幕狠狠人妻| 国产女性精品一区二区三区| 亚洲国产天堂av成人在线播放| 欧美自拍偷自拍亚洲精品| 国产一区二区三区丝袜不卡 | 亚洲精品偷拍一区二区三区| 日韩欧美国产精品自拍| 欧美一级特黄大片做受大屁股| 国产永久免费高清在线精品| 欧美精品亚洲精品一区| 国产在线不卡中文字幕| 国产av一区二区三区久久不卡| 日本熟女中文字幕一区| 精品偷拍一区二区三区| 日韩女优精品一区二区三区| 欧美精品亚洲精品日韩精品| 99久久精品午夜一区| 好骚国产99在线中文| 国产精品免费视频专区| 五月天丁香亚洲综合网| 中文字幕欧美视频二区| 国产不卡最新在线视频| 黑人巨大精品欧美一区二区区 | 99久久精品久久免费| 国产精品日本女优在线观看| 国产精品亚洲二区三区| 成人精品一区二区三区在线 | 在线免费视频你懂的观看| 婷婷色香五月综合激激情| 亚洲一区二区三区三区| 少妇丰满a一区二区三区| 麻豆一区二区三区精品视频| 99精品人妻少妇一区二区人人妻| 91精品视频免费播放| 国产欧美日韩精品自拍| 五月婷婷综合缴情六月| 欧美国产日产在线观看| 亚洲一区二区亚洲日本| 欧美黑人黄色一区二区| 国产亚洲欧美另类久久久| 好吊日在线观看免费视频|