IL-37b通過抑制樹突狀細(xì)胞相關(guān)的免疫應(yīng)答緩解感染性休克
本文選題:IL-b + 純化 ; 參考:《中國比較醫(yī)學(xué)雜志》2017年11期
【摘要】:目的表達(dá)IL-37b重組蛋白,研究其在調(diào)節(jié)機(jī)體免疫應(yīng)答方面的作用機(jī)制。方法構(gòu)建原核表達(dá)載體p ET28/IL-37b,誘導(dǎo)表達(dá)的IL-37b重組蛋白由Ni~(2+)-NTA凝膠進(jìn)行純化。將IL-37b作用于C57BL/6 J小鼠,注射LPS誘導(dǎo)感染性休克,檢測小鼠血清中IL-1β、IL-6、IFN-γ的表達(dá)水平。分離并培養(yǎng)小鼠樹突狀細(xì)胞,用IL-37b處理,經(jīng)LPS誘導(dǎo)活化,檢測細(xì)胞表面CD40、CD80、MHCII等標(biāo)志物分子表達(dá)情況,以及培養(yǎng)上清中IL-1β、IL-10、IL-12、TNF-α的表達(dá)水平。分離小鼠CD4~+T細(xì)胞,檢測IL-37b對LPS誘導(dǎo)的T細(xì)胞培養(yǎng)上清中IFN-γ、TNF-α、IL-10的抑制作用。結(jié)果IL-37b能夠降低感染性休克的小鼠血清中促炎性細(xì)胞因子的表達(dá);并抑制小鼠樹突狀細(xì)胞共刺激分子和促炎性細(xì)胞因子的表達(dá),以及CD4~+T細(xì)胞表達(dá)促炎性細(xì)胞因子。結(jié)論純化的IL-37b具備生物學(xué)活性,能夠通過抑制樹突狀細(xì)胞活化及相關(guān)的T細(xì)胞免疫應(yīng)答緩解機(jī)體感染性休克。
[Abstract]:Objective to express recombinant IL-37b protein and study its mechanism in regulating immune response.Methods the prokaryotic expression vector pET28 / IL-37b was constructed and the IL-37b recombinant protein was purified by Ni~(2-NTA gel.IL-37b was injected into C57BL/6 J mice to induce septic shock, and the expression level of IL-1 尾 -IL-6 IFN- 緯 in serum of mice was detected.Mouse dendritic cells were isolated and cultured, treated with IL-37b, and activated by LPS. The expression of CD40, CD80, MHCII and the expression of IL-1 尾 -IL-10 and IL-12 TNF- 偽 on the cell surface were detected.Mouse CD4T cells were isolated and the inhibitory effect of IL-37b on IFN- 緯 -TNF- 偽 IL-10 in the supernatant of T cell culture induced by LPS was detected.Results IL-37b could decrease the expression of pro-inflammatory cytokines in serum of mice with septic shock, inhibit the expression of costimulatory molecules and pro-inflammatory cytokines in dendritic cells, and the expression of pro-inflammatory cytokines in CD4T cells.Conclusion the purified IL-37b has biological activity and can relieve septic shock by inhibiting dendritic cell activation and T cell immune response.
【作者單位】: 中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動物研究所北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院比較醫(yī)學(xué)中心;定西市中醫(yī)院骨傷一科;
【基金】:中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院醫(yī)學(xué)與健康科技創(chuàng)新工程-重大協(xié)同創(chuàng)新項(xiàng)目-協(xié)同創(chuàng)新團(tuán)隊(duì)資助(編號:2016-I2M-3-019)
【分類號】:R392
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