本文選題：骨髓神經(jīng)組織定向干細(xì)胞 + 移植�。� 參考：《重慶醫(yī)科大學(xué)》2012年碩士論文

【摘要】：目的：培養(yǎng)骨髓神經(jīng)組織定向干細(xì)胞(neural tissue committed stemcells, NTCSCs)，觀察NTCSCs經(jīng)靜脈移植后在腦缺血大鼠腦內(nèi)的分布和分化情況。 方法：采用DMEM/F12(1:1)無血清神經(jīng)干細(xì)胞條件培養(yǎng)基，從大鼠骨髓中分離、培養(yǎng)克隆生長的神經(jīng)組織定向干細(xì)胞(neural tissuecommitted stem cells, NTCSCs)，應(yīng)用免疫細(xì)胞化學(xué)對NTCSCs及其分化進行鑒定，利用RT-PCR檢測Nestin、CXCR4、CD31、β-Ⅲ-tubulin、GFAP mRNA表達(dá)。采用改良Zea—Longa線栓法制作大腦中動脈栓塞(MCAO)模型，造模成功24h后經(jīng)尾靜脈注射1mlDAPI標(biāo)記的NTCSCs。移植后第1、3、5、7d處死大鼠，制備腦組織冰凍切片，熒光顯微鏡下觀察NTCSCs在腦組織的分布，激光共聚焦顯微鏡下觀察NTCSCs的分化。 結(jié)果：分離培養(yǎng)獲得的NTCSCs在神經(jīng)干細(xì)胞培養(yǎng)條件下能形成神經(jīng)球，并表達(dá)神經(jīng)干細(xì)胞標(biāo)志巢蛋白Nestin及SDF-1受體CXCR4，能分化成β-Ⅲ-tubulin、GFAP陽性細(xì)胞；RT-PCR檢測結(jié)果顯示NTCSCs表達(dá)Nestin、CXCR4、CD31、β-Ⅲ-tubulin、GFAP mRNA；靜脈移植NTCSCs能夠進入大鼠腦內(nèi)，移植后3天觀察到DAPI標(biāo)記的NTCSCs主要分布在缺血損傷部位，，7天時有少量NTCSCs分化為GFAP陽性細(xì)胞 結(jié)論：分離培養(yǎng)的NTCSCs具有神經(jīng)干細(xì)胞特性，移植后NTCSCs能進入缺血腦組織，部分細(xì)胞表達(dá)GFAP。
[Abstract]:Aim: to culture neural tissue committed stem cells (NTCs) from bone marrow neural tissue and observe the distribution and differentiation of NTCSCs in the brain of ischemic rats after intravenous transplantation.Methods: neural tissuecommitted stem cells (NTCs) were isolated from rat bone marrow in a serum-free neural stem cell conditioned medium (DMEM / F12: 1: 1). NTCSCs and its differentiation were identified by immunocytochemistry.RT-PCR was used to detect the expression of CD31, 尾-鈪

本文編號：1737136