肺炎支原體CARDS毒素蛋白多表位拼接抗原的表達及鑒定
本文選題:肺炎支原體 切入點:CARDS毒素蛋白 出處:《中國人獸共患病學報》2017年07期
【摘要】:目的探討肺炎支原體CARDS毒素蛋白多表位拼接抗原的免疫反應(yīng)活性。方法對CARDS毒素蛋白的抗原表位進行分析,選取10個重要的表位進行拼接,反向翻譯后合成并克隆,插入pET28a表達載體構(gòu)建pET-CARDS表達質(zhì)粒并轉(zhuǎn)入受體菌。經(jīng)IPTG誘導表達的多表位拼接CARDS蛋白使用6×His單克隆抗體和人陽性血清進行了免疫印跡的檢測。結(jié)果 CARDS毒素蛋白的多表位拼接抗原表達載體構(gòu)建成功,誘導后表達大小為30KDa的重組蛋白,Western blot測定其能與6×His單克隆抗體和人陽性血清發(fā)生反應(yīng)。結(jié)論本研究選取的CARDS毒素蛋白抗原表位具有較強的免疫活性,可為Mp感染的診斷提供新的候選抗原。
[Abstract]:Objective to investigate the immunoreactivity of multiple epitope splicing antigen of mycoplasma pneumoniae CARDS toxin protein.Methods the antigenic epitopes of CARDS toxin protein were analyzed, 10 important epitopes were spliced, synthesized and cloned after reverse translation, then inserted into the pET28a expression vector to construct pET-CARDS expression plasmid and transferred to the receptor bacteria.The multiepitope spliced CARDS protein induced by IPTG was detected by Western blot using 6 脳 His monoclonal antibody and human positive serum.Results the multiepitope splicing antigen expression vector of CARDS toxin protein was successfully constructed. After induction, the recombinant protein expressed in the size of 30KDa could react with 6 脳 His monoclonal antibody and human positive serum by Western blot.Conclusion the antigenic epitopes of CARDS toxin protein selected in this study have strong immunological activity and can provide new candidate antigens for the diagnosis of MP infection.
【作者單位】: 沈陽農(nóng)業(yè)大學;沈陽藥科大學;中國醫(yī)科大學;
【基金】:遼寧省社會科學發(fā)展基金(No.20122225019)項目資助~~
【分類號】:R392
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,本文編號:1730719
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