本文選題：D蛋白　切入點：流感嗜血桿菌　出處：《免疫學雜志》2016年05期

【摘要】：目的評估D蛋白(protein D,PD)黏膜免疫對流感嗜血桿菌感染的保護效果,研究其免疫應(yīng)答機制,為發(fā)展新疫苗提供依據(jù)。方法運用分子克隆技術(shù)構(gòu)建PD蛋白表達質(zhì)粒;用含有或無霍亂毒素(cholera toxin,CT)的PD蛋白黏膜免疫C57BL/6小鼠,ELISA方法檢測血清Ig G、唾液Ig A及脾細胞的細胞因子分泌水平;建立定植和致死性感染模型,觀察細菌清除及小鼠生存情況;以裸鼠和μMT小鼠來研究細胞和體液免疫應(yīng)答在PD免疫保護效果中的作用。結(jié)果單獨PD蛋白黏膜免疫野生鼠能誘導高滴度的抗PD Ig G和s Ig A,血清中Ig G1、Ig G2a和Ig G2b亞型水平相當,脾細胞分泌IL-17A增加,小鼠鼻咽部流感嗜血桿菌清除增加,致死性感染生存率為82%;裸鼠和μMT小鼠免疫PD后對流感嗜血桿菌的清除效應(yīng)和致死性感染保護作用受損,PD抗血清被動免疫μMT小鼠后其抗感染能力恢復;PD+CT組抗體滴度及脾細胞分泌IL-4和IL-17A水平均高于PD組,細菌清除效應(yīng)與PD組相似,但無致死性感染保護能力。結(jié)論無佐劑PD蛋白黏膜免疫能有效誘導黏膜應(yīng)答,抵抗流感嗜血桿菌的定植與致死性感染,為黏膜疫苗的發(fā)展提供了可能的選擇。
[Abstract]:Objective to evaluate the protective effect of D protein D PDD on Haemophilus influenzae infection, and to study the mechanism of its immune response, and to provide evidence for the development of new vaccine.Methods the expression plasmid of PD protein was constructed by molecular cloning technique, and the levels of serum IgG, saliva IgA and cytokine secretion of spleen cells were detected by Elisa method in C57BL/6 mice immunized with or without cholera toxin cholera toxin.The colonization and lethal infection models were established to observe the clearance of bacteria and the survival of mice, and the role of cellular and humoral immune responses in the immune protection of PD was studied in nude mice and 渭 MT mice.Results the wild mice immunized with PD protein could induce high titer of anti-PD IgG and sIg A, the levels of IgG G2a and IgG2b in serum were the same, the secretion of IL-17A from spleen cells was increased, and the clearance of Haemophilus influenzae in nasopharynx was increased.The survival rate of fatal infection was 82.The scavenging effect of PD on Haemophilus influenzae in nude mice and 渭 MT mice and the protective effect of lethal infection were impaired. The anti-infective ability of mice immunized with PD antiserum was recovered after immunization with 渭 MT mice.The levels of IL-4 and IL-17A secreted by splenocytes were higher in PD group than in PD group.The bacterial scavenging effect was similar to that of PD group, but had no protective effect on fatal infection.Conclusion Mucosal immunity of adjuvant free PD protein can effectively induce mucosal response and resist the colonization and fatal infection of Haemophilus influenzae, which provides a possible choice for the development of mucosal vaccine.
【作者單位】： 重慶醫(yī)科大學附屬第一醫(yī)院輸血科;重慶醫(yī)科大學附屬永川醫(yī)院檢驗科;重慶醫(yī)科大學檢驗醫(yī)學院臨床檢驗診斷學教育部重點實驗室;重慶醫(yī)科大學附屬第一醫(yī)院檢驗科;重慶醫(yī)科大學附屬第一醫(yī)院輔助生殖中心;
【基金】：重慶市醫(yī)學科研計劃(20142004) 重慶市科技計劃(cstc2014jcyj A10042)
【分類號】：R392

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本文編號：1715795