本文選題：Raba　切入點(diǎn)：CpG　出處：《中國(guó)免疫學(xué)雜志》2016年02期

【摘要】：目的:采用穩(wěn)定表達(dá)Rab5a及其顯性負(fù)性突變體Rab5a N133I的巨噬細(xì)胞系RAW264.7,研究Rab5a及其突變體過(guò)表達(dá)后對(duì)Cp G誘導(dǎo)的炎性細(xì)胞因子和Ⅰ型干擾素的表達(dá)的影響。方法:通過(guò)脂質(zhì)體法將Rab5a及其突變體Rab5a N133I的真核表達(dá)載體轉(zhuǎn)染到RAW264.7細(xì)胞中,用G418選擇性培養(yǎng)基進(jìn)行篩選,建立穩(wěn)定表達(dá)Rab5a、Rab5a N133I的細(xì)胞系。通過(guò)RT-PCR、Real time-PCR和Western blot方法鑒定穩(wěn)定表達(dá)的細(xì)胞系。用Cp G刺激穩(wěn)定表達(dá)Rab5a、Rab5a N133I的細(xì)胞系8 h后檢測(cè)細(xì)胞因子TNF-α、IL-1β和IFN-β的表達(dá)量變化。結(jié)果:RAW264.7轉(zhuǎn)染Rab5a真核表達(dá)載體后Rab5a的表達(dá)量顯著高于對(duì)照質(zhì)粒轉(zhuǎn)染細(xì)胞(P0.05)。Rab5a過(guò)表達(dá)后,在Cp G刺激作用下RAW264.7分泌的TNF-α、IL-1β顯著升高(P0.01),IFN-β的分泌也顯著升高(P0.05),而Rab5a N133I過(guò)表達(dá)后上述細(xì)胞因子的分泌均有所恢復(fù)。結(jié)論:Rab5a促進(jìn)了Cp G誘導(dǎo)的巨噬細(xì)胞中炎性細(xì)胞因子和Ⅰ型干擾素的表達(dá),Rab5a可能是TLR9信號(hào)通路的正向調(diào)控蛋白。
[Abstract]:Aim: to investigate the effects of overexpression of Rab5a and its dominant negative mutant Rab5a N133I on the expression of inflammatory cytokines and interferon type I (IFN- 鈪，

本文編號(hào)：1715743