本文選題：伯氏瘧原蟲　切入點(diǎn)：細(xì)胞免疫　出處：《蚌埠醫(yī)學(xué)院》2016年碩士論文

【摘要】：目的:建立不同鼠類宿主易感性的實(shí)驗(yàn)動物模型,觀察不同鼠類宿主易感性的差異,探討造成鼠類宿主易感性差異的機(jī)制。方法:(1)昆明小鼠、BALB/c小鼠、SD大鼠分為正常對照組和感染第1、3、5、7、9天組,感染組分別腹腔注射1×106個P.b(SD大鼠注射1×107個P.b),每組10只。(2)記錄不同鼠類宿主的原蟲血率、生存率以及脾臟濕重。(3)流式細(xì)胞術(shù)檢測正常對照組和感染組外周血CD4+、CD8+、NK、NKT細(xì)胞比例變化。(4)ELISA法檢測正常對照組和感染組外周血ARG、IFN-γ、IL-4含量的變化。(5)使用NO、NOS合酶檢測試劑盒檢測正常對照組和感染組外周血NO、NOS合酶含量的變化。(6)實(shí)時(shí)熒光定量PCR法檢測正常對照組和感染組外周血TLR4、TLR9相對表達(dá)的變化。結(jié)果:1.昆明小鼠組和BALB/c小鼠組在感染P.b后原蟲血率逐漸升高,最后全部死亡,而SD大鼠組在感染P.b第5天達(dá)到高峰,隨后原蟲血癥逐漸消失。3種鼠類宿主分別與其正常對照組比較,昆明小鼠感染第1、3、5、7、9天組脾臟重量顯著大于正常對照組(P0.01);BALB/c小鼠感染第1天組無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,感染第3、5、7、9天組脾臟重量顯著大于正常對照組(P0.01);SD大鼠感染第1天組無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,感染第3、5、7、9天組脾臟重量大于正常對照組(P0.05)。2.昆明小鼠外周血CD4+、CD8+T淋巴細(xì)胞比例與正常對照組比較,感染P.b第1、3、5天外周血CD4+T淋巴細(xì)胞比例升高(P0.05),感染第7天外周血CD4+T淋巴細(xì)胞比例降低(P0.05),感染第9天無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異;感染P.b第1、3、5外周血CD8+T淋巴細(xì)胞比例降低(P0.05),感染第7天CD8+T淋巴細(xì)胞比例升高(P0.05),感染第9天無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。BALB/c小鼠外周血CD4+、CD8+T淋巴細(xì)胞比例與正常對照組比較,感染P.b第1、3天CD4+T淋巴細(xì)胞比例升高(P0.05),感染第7天CD4+T淋巴細(xì)胞比例降低(P0.05),感染第5、9天外周血CD4+T淋巴細(xì)胞比例無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異;感染P.b第1、3天CD8+T淋巴細(xì)胞比例降低(P0.05),感染第7天CD8+T淋巴細(xì)胞比例升高(P0.05),感染第5、9天無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。SD大鼠外周血CD4+、CD8+T淋巴細(xì)胞比例與正常對照組比較,感染P.b第1天外周血CD4+T淋巴細(xì)胞比例升高(P0.05),感染P.b第3、5、7、9天外周血CD4+T淋巴細(xì)胞無統(tǒng)計(jì)學(xué)差,感染P.b第1天外周血CD8+T淋巴細(xì)胞比例降低(P0.05),感染P.b第3、5、7、9天外周血CD8+T淋巴細(xì)胞比例無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。3.昆明小鼠外周血NK、NKT細(xì)胞比例與正常對照組比較,感染P.b第1、3、5天外周血NK細(xì)胞比例升高(P0.05),第7天無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,第9天外周血NK細(xì)胞比例降低(P0.05);感染P.b第1、5天外周血NKT細(xì)胞比例無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,第3天外周血NKT細(xì)胞比例升高(P0.05),第7、9天外周血NKT細(xì)胞比例顯著降低(P0.01)。BALB/c小鼠外周血NK、NKT細(xì)胞比例與正常對照組比較,感染P.b第1、7天外周血NK細(xì)胞比例無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,第3、5天外周血NK細(xì)胞比例升高(P0.05),第9天外周血NK細(xì)胞比例顯著降低(P0.01);感染P.b第1天外周血NKT細(xì)胞比例無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,第3天外周血NKT細(xì)胞比例升高(P0.05),第5,7,9天外周血NKT細(xì)胞比例降低(P0.05).SD大鼠外周血NK、NKT細(xì)胞比例與正常對照組比較,感染P.b第1天外周血NK細(xì)胞比例升高(P0.05),第3天外周血NK細(xì)胞比例顯著升高(P0.01),第5、7天外周血NK細(xì)胞比例升高(P0.05),第9天外周血NK細(xì)胞比例無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異;感染第1天外周血NKT細(xì)胞比例升高(P0.05),第3、5、7、9天外周血NKT細(xì)胞比例均顯著升高(P0.01)。4.昆明小鼠組NO、NOS、Arginase值與正常對照組比較,感染P.b第1天血清NO值顯著升高(P0.01),第3、5天無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,第7、9天血清NO值降低(P0.05);感染P.b第1、3、5、7、9天血清NOS無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異;感染P.b第1天血清Arginase值降低(P0.05),第3、5、7、9天血清Arginase值無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。BALB/c小鼠組NO、NOS、Arginase值與正常對照組比較,感染P.b第1天血清NO值顯著升高(P0.01),第3、5天血清NO值無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,第7、9天血清NO值降低(P0.05);感染P.b第1、3、5、7、9天血清NOS值無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異;感染P.b第1、3天血清Arginase值降低(P0.05),第5、7、9天血清Arginase值無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。SD大鼠組NO、NOS、Arginase值與正常對照組比較,感染P.b第1、3、5、7、9天血清NO值顯著升高(P0.01);感染P.b第1、3、5、7、9天血清NOS無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異;感染P.b第1、3、5、7、9天血清Arginase值均降低(P0.05)。5.昆明小鼠組血清IFN-γ、IL-4相對表達(dá)值與正常對照組比較,感染P.b第1、3、5天血清IFN-γ值升高(P0.05),第7、9天血清INF-γ值無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異;感染P.b第1天血清IL-4值無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,第3、5、7、9天血清IL-4值升高(P0.05)。BALB/c小鼠組血清IFN-γ、IL-4與正常對照組比較,感染P.b第1、3、5天血清IFN-γ值升高(P0.05),第7、9天血清IFN-γ值無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異;感染P.b第1天血清IL-4值無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,第3、5、7、9天血清IL-4值顯著升高(P0.01)。SD大鼠組血清IFN-γ、IL-4與正常對照組比較,感染P.b第1、3、5、7天血清IFN-γ升高(P0.05),第9天血清IFN-γ無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異;感染P.b第1、3天血清IL-4無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,第5、7、9天血清IL-4值升高(P0.05)。6.BALB/c小鼠TLR4、TL9相對表達(dá)值與正常對照組比較,感染P.b第1、3、5、7天TLR4相對表達(dá)顯著升高(P0.01),第9天TLR9相對表達(dá)下降(P0.05);感染P.b第1、3天TLR9相對表達(dá)無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,第5天TLR9相對表達(dá)顯著升高(P0.01),第7天TLR9相對表達(dá)下降(P0.05),第9天TLR9相對表達(dá)顯著下降(P0.01)。SD大鼠TLR4、TLR9相對表達(dá)值與正常對照組比較,感染P.b第1、3、5、7天TLR4相對表達(dá)顯著升高(P0.01),感染P.b第9天TLR4相對表達(dá)無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異;感染P.b第1、3、5、7、9天TLR9相對表達(dá)均顯著升高(P0.01)。結(jié)論:(1)本實(shí)驗(yàn)證實(shí)不同鼠類宿主存在易感性差異的現(xiàn)象,昆明小鼠和BALB/c小鼠無法控制感染而最終死亡,SD大鼠能有效清除瘧原蟲且最終自愈。(2)早期IFN-γ大量的表達(dá)以及CD4+T淋巴細(xì)胞的比例上升提示Th1類免疫應(yīng)答反應(yīng)在抗瘧原蟲感染過程中起重要作用。(3)昆明小鼠和BALB/c小鼠的NK、NKT細(xì)胞比例先升高后降低,而SD大鼠NK細(xì)胞比例升高后維持穩(wěn)定,NKT細(xì)胞比例持續(xù)升高,提示大鼠的NK、NKT細(xì)胞在清除瘧原蟲過程中起到重要作用,這也許是造成其易感性差異的原因之一(4)昆明小鼠和BALB/c小鼠NO值先升高后降低,而SD大鼠NO值持續(xù)升高,提示大鼠的NO在清除瘧原蟲中起到作用。(5)BALB/c小鼠TLR4和TLR9相對表達(dá)先升高后降低,而SD大鼠TLR4相對表達(dá)升高后降低,TLR9相對表達(dá)持續(xù)升高,提示TLR9相對表達(dá)的差異可能是造成瘧原蟲易感性差異的原因之一。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：蚌埠醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R382

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本文編號：1698706