本文選題：IK細(xì)胞因子　切入點(diǎn)：胚胎著床　出處：《重慶醫(yī)科大學(xué)》2012年碩士論文

【摘要】：目的 胚胎著床對于哺乳動物的妊娠至關(guān)重要，是胚胎與子宮之間復(fù)雜而精細(xì)的對話過程，也是胚胎進(jìn)一步發(fā)育的必經(jīng)之路。胚胎成功著床依賴于具有植入能力的胚泡與具有容受性的子宮內(nèi)膜的相互協(xié)調(diào)及一系列分子參與這一過程的調(diào)節(jié)。IK細(xì)胞因子（IK cytokine）基因位于2p15-p14，其所編碼蛋白的分子量為19KD。最初從K562紅白血病細(xì)胞系的培養(yǎng)基中分離、提純，能抑制主要組織相容性復(fù)合體Ⅱ類（MHC Ⅱ）抗原的固有表達(dá)和其由干擾素γ（IFN-γ）誘導(dǎo)的表達(dá)。已知IK細(xì)胞因子與MHC Ⅱ表達(dá)密切相關(guān)，那么，IK細(xì)胞因子是否參與母胎免疫耐受的調(diào)節(jié)，在妊娠過程中是否發(fā)揮作用，目前國內(nèi)外尚未見相關(guān)報(bào)道。本研究旨在通過檢測IK細(xì)胞因子在小鼠早孕期子宮內(nèi)膜的表達(dá)規(guī)律，探討其在胚胎著床中的作用，為胚胎著床機(jī)制、妊娠失敗的防治提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 方法 1.Real-Time PCR：檢測正常妊娠第1天至第7天（D1-D7）IK細(xì)胞因子mRNA的表達(dá)以及妊娠D4、D5注射IK細(xì)胞因子反義寡聚脫氧核苷酸（IK cytokine A-ODNs）前后MHC Ⅱ mRNA的表達(dá)。 2. Western blot：①檢測IK細(xì)胞因子在正常妊娠D1-D7小鼠子宮內(nèi)膜的表達(dá)；②檢測IK細(xì)胞因子D5小鼠子宮內(nèi)膜胚胎著床點(diǎn)和著床旁的表達(dá)；③檢測經(jīng)宮角注射IK細(xì)胞因子A-ODNs和IK細(xì)胞因子正義寡聚脫氧核苷酸（IK cytokine S-ODNs）24h、48h（即妊娠D4和D5）后IK細(xì)胞因子的表達(dá)；④檢測妊娠D4、D5注射IK細(xì)胞因子A-ODNs前后MHC Ⅱ的表達(dá)。 3.免疫組織化學(xué)：分別檢測IK細(xì)胞因子在正常妊娠D1-D7、假孕PD1-PD7小鼠子宮內(nèi)膜的表達(dá)以及IK細(xì)胞因子A-ODNs作用后IK細(xì)胞因子蛋白的表達(dá)。 4.宮角注射IK細(xì)胞因子A-ODNs：探討對小鼠胚胎著床的影響。 結(jié)果 1.IK細(xì)胞因子mRNA表達(dá)量在妊娠D1-D4逐漸升高，于妊娠D4達(dá)高峰（P0.05）。 2.Western blot和免疫組織化學(xué)結(jié)果顯示IK細(xì)胞因子蛋白表達(dá)量在妊娠D1-D5逐漸升高，，于妊娠D5達(dá)高峰（P0.05）。 3.IK細(xì)胞因子在妊娠D5胚胎著床點(diǎn)的表達(dá)顯著高于著床點(diǎn)旁組織。 4.假孕小鼠子宮內(nèi)膜IK細(xì)胞因子蛋白表達(dá)明顯低于正常妊娠小鼠，且整個(gè)假孕過程中沒有表達(dá)高峰。 5.宮角注射IK細(xì)胞因子A-ODNs后24h和48h（即妊娠D4和D5），子宮內(nèi)膜IK細(xì)胞因子表達(dá)明顯受到抑制，MHC Ⅱ抗原表達(dá)增強(qiáng)，且胚胎著床數(shù)量明顯減少（P0.05）。 結(jié)論 IK細(xì)胞因子在妊娠小鼠子宮內(nèi)膜“著床窗”時(shí)期表達(dá)最高，妊娠D3宮角注射IK細(xì)胞因子A-ODNs24h和48h（即著床窗）后，IK細(xì)胞因子蛋白表達(dá)受到顯著抑制，而MHC Ⅱ抗原表達(dá)明顯增強(qiáng)，胚胎著床的數(shù)量明顯減少。這一結(jié)果提示在正常妊娠中，IK細(xì)胞因子可能通過抑制MHCⅡ抗原的表達(dá)而抑制了母體與胚胎間的免疫反應(yīng)，從而使胚胎在整個(gè)妊娠過程中免疫耐受，使妊娠得以維持。但當(dāng)IK細(xì)胞因子表達(dá)受到抑制，將解除IK細(xì)胞因子對MHC Ⅱ抗原表達(dá)的抑制，母胎界面MHC Ⅱ抗原表達(dá)增強(qiáng)，從而影響母體對胚胎的免疫耐受而影響胚胎著床。然而，對IK細(xì)胞因子表達(dá)的抑制并沒有完全導(dǎo)致胚胎著床失敗，仍有少數(shù)胚胎著床，我們推測可能還有其他機(jī)制參與母胎免疫耐受的調(diào)控，以保護(hù)胚胎不受母體免疫系統(tǒng)攻擊。
[Abstract]:Purpose

The embryo implantation is essential for the pregnancy of mammal . It is a complicated and elaborate dialogue process between the embryo and the uterus . It is also the only way for embryo to develop further . The gene of IK cytokine is located at 2p15 - p14 . The molecular weight of the encoded protein is 19KD . It is known that IK cytokine is involved in the regulation of MHC class 鈪

本文編號：1698418