本文選題：神經(jīng)膠質(zhì)瘤　切入點(diǎn)：熒光　出處：《中國(guó)比較醫(yī)學(xué)雜志》2017年04期 　論文類(lèi)型：期刊論文

【摘要】：目的建立一種穩(wěn)定、可實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)的膠質(zhì)瘤原位移植瘤裸鼠模型。方法用帶有熒光素酶(luciferase-Luc)和綠色熒光蛋白(green fluorescent protein-GFP)基因的慢病毒感染U251神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞,流式細(xì)胞儀篩選穩(wěn)定表達(dá)GFP-Luc熒光的細(xì)胞系,并通過(guò)CCK-8實(shí)驗(yàn)、細(xì)胞周期實(shí)驗(yàn)、Transwell腫瘤遷移及侵襲實(shí)驗(yàn)等評(píng)價(jià)熒光細(xì)胞的增殖、遷移和侵襲能力是否改變;將細(xì)胞接種至裸鼠大腦尾狀核,建立膠質(zhì)瘤原位移植瘤模型,利用小鼠活體成像系統(tǒng)監(jiān)測(cè)腦內(nèi)腫瘤的生長(zhǎng)情況,并通過(guò)石蠟切片,HE染色評(píng)價(jià)細(xì)胞在裸鼠腦內(nèi)的病理特征及成瘤能力。結(jié)果成功構(gòu)建穩(wěn)定表達(dá)GFP熒光和luciferase熒光的U251膠質(zhì)瘤細(xì)胞系及動(dòng)物模型,慢病毒整合并未改變細(xì)胞的增殖、遷移及侵襲能力;模型生長(zhǎng)周期適中,成瘤率高,瘤體在顱內(nèi)生長(zhǎng)穩(wěn)定,HE切片符合人膠質(zhì)瘤特征。結(jié)論雙熒光標(biāo)記的膠質(zhì)瘤細(xì)胞相比于傳統(tǒng)細(xì)胞更有利于膠質(zhì)瘤動(dòng)物模型的實(shí)驗(yàn)研究;U251-GFP-Luc膠質(zhì)瘤細(xì)胞裸鼠模型,其腫瘤生長(zhǎng)和病理特性與人膠質(zhì)瘤相似,且可實(shí)時(shí)觀察腫瘤生長(zhǎng),可作為膠質(zhì)瘤實(shí)驗(yàn)研究的理想動(dòng)物模型。
[Abstract]:Objective to establish a stable, real-time monitoring nude mouse model of glioma transplanted in situ. Methods U251 glioma cells were infected with lentivirus with luciferase-luciferase-luciferase-luciferase-gene and green fluorescent protein-GFP gene. The cell lines stably expressing GFP-Luc fluorescence were screened by flow cytometry, and the proliferation, migration and invasion ability of fluorescent cells were evaluated by CCK-8 assay, cell cycle assay and transwell tumor migration and invasion assay. Cells were inoculated into caudate nucleus of brain of nude mice to establish the model of glioma orthotopic transplantation. The growth of brain tumors was monitored by living imaging system in mice. The pathological characteristics and tumorigenic ability of the cells in the brain of nude mice were evaluated by paraffin section HE staining. Results U251 glioma cell lines and animal models stably expressing GFP fluorescence and luciferase fluorescence were successfully constructed. The integration of lentivirus did not change the proliferation of U251 glioma cells. The growth cycle of the model was moderate and the rate of tumorigenesis was high. Conclusion double fluorescence labeled glioma cells are more favorable to glioma animal model than traditional glioma cells in the experimental study of U251-GFP-Luc glioma cells in nude mice. Its tumor growth and pathological characteristics are similar to those of human glioma, and it can be used as an ideal animal model for the experimental study of glioma.
【作者單位】： 廈門(mén)大學(xué)醫(yī)學(xué)院;福建醫(yī)科大學(xué);廈門(mén)大學(xué)附屬中山醫(yī)院;廈門(mén)大學(xué)藥學(xué)院;
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金(編號(hào):30970733)
【分類(lèi)號(hào)】：R-332;R739.41

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