發(fā)布時(shí)間：2018-03-04 21:37

  本文選題：類胰島素生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白6　切入點(diǎn)：維生素D受體　出處：《北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院》2011年博士論文　論文類型：學(xué)位論文

【摘要】：胰島素樣生長(zhǎng)因子(Insulin-like Growth Factor, IGF)是人體重要的促生長(zhǎng)因子在胚胎的組織器官形成及發(fā)育和成體的生長(zhǎng)過程中發(fā)揮重要的促進(jìn)作用。胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白(IGF-binding Protein, IGFBP)是IGF的結(jié)合蛋白,目前該家族共有六個(gè)成員(分別命名為IGFBP-1-IGFBP-6)。IGFBPs家族通過兩條途徑發(fā)揮作用。一方面,IGF依賴性途徑和IGF非依賴性途徑。 胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白-6(Insulin-like growth factor binding protein-6, IGFBP-6)是一種分泌型糖蛋白,能夠與胰島素樣生長(zhǎng)因子-Ⅱ(Insulin-like growth factor-Ⅱ,IGF-Ⅱ)特異結(jié)合并在血流中運(yùn)送該因子到各器官、組織,一定程度上抑制著IGF-Ⅱ的生物學(xué)活性,其與1GF-Ⅱ結(jié)合的能力是與IGF-Ⅰ結(jié)合的20-100倍。IGFBP-6分布廣泛,在多種組織中都有分布,多種體液和體外建株的細(xì)胞系中也檢測(cè)到了IGFBP-6的存在。目前對(duì)IGFBP-6的研究提示,IGFBP-6具有IGF非依賴性的功能,如抑制細(xì)胞的生長(zhǎng)、促進(jìn)細(xì)胞凋亡等。但目前對(duì)IGFBP-6行使其IGF非依賴性功能的機(jī)制了解較少。 實(shí)驗(yàn)室前期研究已發(fā)現(xiàn),重組表達(dá)的IGFBP-6蛋白能夠進(jìn)入細(xì)胞核。在此基礎(chǔ)上,本課題通過GST pull-down實(shí)驗(yàn)和免疫共沉淀實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)IGFBP-6能夠與維生素D受體(Vitamin D Receptor, VDR)相互作用。并且IGFBP-6能夠結(jié)合于VDR的C端結(jié)構(gòu)域。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn),IGFBP-6抑制維甲酸X受體(Retinoid X Receptor,RXR)與VDR異二聚體的形成。細(xì)胞免疫熒光實(shí)驗(yàn)觀察,IGFBP-6能夠與VDR共定位于細(xì)胞核,再次驗(yàn)證了兩種蛋白的相互作用。 維牛素D3 [1,25-dihydroxyvitamin D3,1,25(OH)2D3]是VDR的配體,能夠結(jié)合于VDR并使VDR識(shí)別、結(jié)合至染色體上的VitD應(yīng)答元件(VitD Responsible Element, VDRE),從而促進(jìn)某些在啟動(dòng)子區(qū)含有VDRE序列的基因轉(zhuǎn)錄,如骨鈣素(Osteocalcin, Oste)、生長(zhǎng)激素(Growth Hormone,GH)、堿性磷酸酶(Alkaline Phospatase, ALP)等。本課題通過雙熒光素酶實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn),IGFBP-6能夠抑制山1,25(OH)2D3引起的骨鈣素和生長(zhǎng)激素編碼序列的高水平轉(zhuǎn)錄。另一方面,已知ALP的活性升高是衡量成骨細(xì)胞分化的常用指標(biāo)。ALP活性測(cè)定實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn),由1,25(OH)2D3-VDR介導(dǎo)的ALP活性升高能夠被IGFBP-6所抑制。但是,當(dāng)細(xì)胞中的VDR基因被敲除后,IGFBP-6對(duì)由1,25(OH)2D3引起的ALP活性升高不起抑制作用。以上結(jié)果提示IGFBP-6能夠通過與VDR的C端結(jié)構(gòu)域相互作用,抑制VDR的轉(zhuǎn)錄功能,從而調(diào)節(jié)成骨細(xì)胞的分化。
[Abstract]:Insulin-like Growth factor (IGF) is an important growth promoting factor in human body, which plays an important role in the formation and development of tissues and organs of embryo and the growth of adult. IGF-binding protein (IGFBP). Is the binding protein of IGF, At present, there are six members of the family (named IGFBP-1-IGFBP-6).IGFBPs family, respectively, which play a role through two pathways), on the one hand, IGF-dependent pathway and IGF independent pathway. Insulin-like growth factor binding protein-6 (IGFBP-6) is a secretory glycoprotein that specifically binds to insulin-like growth factor- 鈪，

本文編號(hào)：1567449