本文選題：類胰島素生長因子結合蛋白6　切入點：維生素D受體　出處：《北京協和醫(yī)學院》2011年博士論文　論文類型：學位論文

【摘要】：胰島素樣生長因子(Insulin-like Growth Factor, IGF)是人體重要的促生長因子在胚胎的組織器官形成及發(fā)育和成體的生長過程中發(fā)揮重要的促進作用。胰島素樣生長因子結合蛋白(IGF-binding Protein, IGFBP)是IGF的結合蛋白,目前該家族共有六個成員(分別命名為IGFBP-1-IGFBP-6)。IGFBPs家族通過兩條途徑發(fā)揮作用。一方面,IGF依賴性途徑和IGF非依賴性途徑。 胰島素樣生長因子結合蛋白-6(Insulin-like growth factor binding protein-6, IGFBP-6)是一種分泌型糖蛋白,能夠與胰島素樣生長因子-Ⅱ(Insulin-like growth factor-Ⅱ,IGF-Ⅱ)特異結合并在血流中運送該因子到各器官、組織,一定程度上抑制著IGF-Ⅱ的生物學活性,其與1GF-Ⅱ結合的能力是與IGF-Ⅰ結合的20-100倍。IGFBP-6分布廣泛,在多種組織中都有分布,多種體液和體外建株的細胞系中也檢測到了IGFBP-6的存在。目前對IGFBP-6的研究提示,IGFBP-6具有IGF非依賴性的功能,如抑制細胞的生長、促進細胞凋亡等。但目前對IGFBP-6行使其IGF非依賴性功能的機制了解較少。 實驗室前期研究已發(fā)現,重組表達的IGFBP-6蛋白能夠進入細胞核。在此基礎上,本課題通過GST pull-down實驗和免疫共沉淀實驗發(fā)現IGFBP-6能夠與維生素D受體(Vitamin D Receptor, VDR)相互作用。并且IGFBP-6能夠結合于VDR的C端結構域。進一步研究發(fā)現,IGFBP-6抑制維甲酸X受體(Retinoid X Receptor,RXR)與VDR異二聚體的形成。細胞免疫熒光實驗觀察,IGFBP-6能夠與VDR共定位于細胞核,再次驗證了兩種蛋白的相互作用。 維牛素D3 [1,25-dihydroxyvitamin D3,1,25(OH)2D3]是VDR的配體,能夠結合于VDR并使VDR識別、結合至染色體上的VitD應答元件(VitD Responsible Element, VDRE),從而促進某些在啟動子區(qū)含有VDRE序列的基因轉錄,如骨鈣素(Osteocalcin, Oste)、生長激素(Growth Hormone,GH)、堿性磷酸酶(Alkaline Phospatase, ALP)等。本課題通過雙熒光素酶實驗發(fā)現,IGFBP-6能夠抑制山1,25(OH)2D3引起的骨鈣素和生長激素編碼序列的高水平轉錄。另一方面,已知ALP的活性升高是衡量成骨細胞分化的常用指標。ALP活性測定實驗發(fā)現,由1,25(OH)2D3-VDR介導的ALP活性升高能夠被IGFBP-6所抑制。但是,當細胞中的VDR基因被敲除后,IGFBP-6對由1,25(OH)2D3引起的ALP活性升高不起抑制作用。以上結果提示IGFBP-6能夠通過與VDR的C端結構域相互作用,抑制VDR的轉錄功能,從而調節(jié)成骨細胞的分化。
[Abstract]:Insulin-like Growth factor (IGF) is an important growth promoting factor in human body, which plays an important role in the formation and development of tissues and organs of embryo and the growth of adult. IGF-binding protein (IGFBP). Is the binding protein of IGF, At present, there are six members of the family (named IGFBP-1-IGFBP-6).IGFBPs family, respectively, which play a role through two pathways), on the one hand, IGF-dependent pathway and IGF independent pathway. Insulin-like growth factor binding protein-6 (IGFBP-6) is a secretory glycoprotein that specifically binds to insulin-like growth factor- 鈪，

本文編號：1567449