本文關(guān)鍵詞： 燒傷 銅綠假單胞桿菌 感染 模型 動(dòng)物　出處：《第三軍醫(yī)大學(xué)》2011年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

【摘要】：目的:研制穩(wěn)定、規(guī)范的燒(燙)傷創(chuàng)面模型和燒(燙)傷創(chuàng)面感染模型,為燒傷創(chuàng)面治療藥物藥效學(xué)評(píng)價(jià)提供可靠的動(dòng)物模型。 方法:1、穩(wěn)定的燒(燙)傷動(dòng)物模型的篩選及建立采用恒溫水浴鍋及恒溫恒壓燙傷儀,根據(jù)致傷效果篩選出最穩(wěn)定、規(guī)范的致傷方法;致傷動(dòng)物采用SD大鼠、昆明小鼠及新西蘭大白兔,篩選燒(燙)傷創(chuàng)面的動(dòng)物模型。(1)大鼠燒(燙)傷創(chuàng)面模型的制備:實(shí)驗(yàn)動(dòng)物120只SD大鼠,致傷儀器采用恒溫恒壓燙傷儀,致傷溫度80℃,致傷壓力為燙傷棒自重0.5kg,燙頭面積4cm~2。致傷部位:大鼠后肢股骨上端為中心點(diǎn),每側(cè)各制作一個(gè)燒傷創(chuàng)面,左右對(duì)稱。致傷時(shí)間3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14s(每時(shí)相點(diǎn)10只)。傷后24h取右側(cè)創(chuàng)面組織行病理組織學(xué)觀察。觀察左側(cè)創(chuàng)面愈合情況并記錄左側(cè)創(chuàng)面愈合時(shí)間,根據(jù)創(chuàng)面愈合時(shí)間及病理組織學(xué)觀察結(jié)果篩選淺二度,深二度的創(chuàng)面致傷時(shí)間。 (2)小鼠燒(燙)傷創(chuàng)面模型的制備:實(shí)驗(yàn)動(dòng)物120只昆明小鼠,致傷儀器采用恒溫恒壓燙傷儀,致傷溫度80℃,致傷壓力為燙傷棒自重0.5kg,燙頭面積2cm2。致傷部位:小鼠后肢股骨上端為中心點(diǎn),每側(cè)各制作一個(gè)燒傷創(chuàng)面,左右對(duì)稱。致傷時(shí)間3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14s(每時(shí)相點(diǎn)10只)。傷后24h取右側(cè)創(chuàng)面組織行病理組織學(xué)觀察。根據(jù)愈合時(shí)間及病理組織學(xué)觀察結(jié)果篩選淺二度,深二度的創(chuàng)面致傷時(shí)間。 (3)大白兔燒(燙)傷創(chuàng)面模型的制備:實(shí)驗(yàn)動(dòng)物24只新西蘭大白兔,致傷儀器采用恒溫恒壓燙傷儀,致傷溫度80℃,致傷壓力為燙傷棒自重0.5kg,燙頭面積8cm2。致傷部位:大白兔脊柱兩側(cè),左右對(duì)稱,每側(cè)制作5個(gè)創(chuàng)面。致傷時(shí)間3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14s(每時(shí)相點(diǎn)2只)。傷后24h取12只兔創(chuàng)面組織行病理組織學(xué)觀察。根據(jù)愈合時(shí)間及病理組織學(xué)觀察結(jié)果篩選淺二度,深二度的創(chuàng)面致傷時(shí)間。 2、大鼠燒(燙)傷創(chuàng)面感染模型的制備:另取36只SD大鼠,并隨機(jī)分為淺二度、深二度組,每組18只,按照前述方法與篩選的致傷時(shí)間分別制成淺二度、深二度創(chuàng)面。傷后即刻在2組大鼠一側(cè)創(chuàng)面分別接種0.1ml含1×10~9、1×10~7、1×10~5cfu銅綠假單胞菌標(biāo)準(zhǔn)菌株ATCC27853的菌液(每種菌量6只大鼠),在另一側(cè)創(chuàng)面涂抹等量的生理鹽水作為對(duì)照。接種細(xì)菌后1,2,3,5,7,14d檢測(cè)并計(jì)算痂下細(xì)菌含量,取菌落進(jìn)行革蘭染色及生化反應(yīng)鑒定菌種;記錄2組大鼠創(chuàng)面愈合時(shí)間,對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行t檢驗(yàn)。結(jié)果:1、根據(jù)動(dòng)物模型的創(chuàng)面致傷情況確定出最合適的致傷方法是運(yùn)用恒溫恒壓燙傷儀致傷,最穩(wěn)定、規(guī)范的燙傷創(chuàng)面模型動(dòng)物為大鼠。 2、根據(jù)組織學(xué)檢查、創(chuàng)面愈合時(shí)間(6s組為14.2±1.5d,8s組為19.8±1.6d)篩選出燙傷6s及8s分別為淺二度和深二度創(chuàng)面致傷時(shí)間。 3、淺二度組大鼠僅接種1×10~9cfu細(xì)菌創(chuàng)面有少許炎性細(xì)胞浸潤(rùn);深二度組接種1×10~9cfu、1×10~7cfu細(xì)菌均有炎性細(xì)胞浸潤(rùn),前者浸潤(rùn)更為明顯。 4、創(chuàng)面細(xì)菌鑒定結(jié)果為銅綠假單胞桿菌。淺二度組接種各種菌量創(chuàng)面痂下細(xì)菌含量菌小于10~5cfu/g;而深二度組接種1×10~9cfu細(xì)菌創(chuàng)面接種14天d內(nèi)均高于10~5cfu/g且有繼續(xù)上升的趨勢(shì)。 5、淺二度大鼠接種1×10~9、1×10~7、1×10~5cfu細(xì)菌創(chuàng)面和生理鹽水對(duì)照創(chuàng)面愈合時(shí)間相近(t值分別為1.26,0.29.1.07,P0.05);深二度組大鼠接種1×10~9cfu細(xì)菌創(chuàng)面愈合時(shí)間較生理鹽水對(duì)照創(chuàng)面明顯延長(zhǎng)[(22.5±1.0)d與(19.4±1.6)d,t=2.73,p0.05]。 結(jié)論1、采用恒溫恒壓燙傷儀致傷大鼠,可制備穩(wěn)定、規(guī)范的燒(燙)傷創(chuàng)面動(dòng)物模型。 2、大鼠淺II°燙傷創(chuàng)面模型致傷條件:采用恒溫恒壓燙傷儀,燙頭面積4cm2、燙頭溫度80℃,致傷壓力為燙傷棒自重0.5kg,燙傷時(shí)間為6s。大鼠深I(lǐng)I°燙傷創(chuàng)面模型致傷條件:采用恒溫恒壓燙傷儀,燙頭面積4cm2、燙頭溫度80℃,致傷壓力為燙傷棒自重0.5kg,燙傷時(shí)間為8s。 3、大鼠深I(lǐng)I°燙傷創(chuàng)面接種1×10~9 cfu銅綠假單胞菌標(biāo)準(zhǔn)菌株ATCC 27853,是用于感染創(chuàng)面防治研究較為理想的動(dòng)物燙傷創(chuàng)面感染模型,該模型穩(wěn)定、重復(fù)性較高。
[Abstract]:Objective : To develop a stable and standardized burn wound model and burn ( scald ) wound infection model to provide a reliable animal model for the evaluation of the curative effect of burn wound . Methods : 1 銆，

本文編號(hào)：1542693