本文關(guān)鍵詞： 微小RNA- 基因敲減 胸腺 CD+T細胞　出處：《基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與臨床》2016年03期 　論文類型：期刊論文

【摘要】：目的研究miR-126基因敲減對小鼠胸腺細胞發(fā)育的影響,并初步探討其意義。方法觀察miR-126基因敲減(KD)小鼠胸腺的體積、重量和細胞總數(shù);Real-time PCR檢測小鼠胸腺miR-126表達水平;HE染色觀察小鼠胸腺形態(tài)學(xué)結(jié)構(gòu);FACS檢測胸腺中淋巴細胞比例、核抗原Ki-67的表達以及細胞凋亡的變化;最后,Western blot檢測胸腺中磷酸化AKT(p-AKT)和磷酸化ERK1/2(p-ERK)的表達。結(jié)果 WT和miR-126KD小鼠胸腺體積大小、重量以及細胞總數(shù)均無明顯差異,但miR-126KD小鼠胸腺miRNA-126表達水平顯著下調(diào)(P0.05)。miR-126KD小鼠胸腺組織結(jié)構(gòu)出現(xiàn)形態(tài)學(xué)異常。與WT小鼠相比,miR-126KD小鼠胸腺CD4~+SP細胞比例及細胞絕對數(shù)明顯增加(P0.05),而CD4~+CD8~+(DP)細胞比例及絕對數(shù)則顯著減少(P0.05),miR-126KD小鼠胸腺CD4~+SP細胞核抗原Ki-67表達顯著增加(P0.05),且細胞凋亡明顯減少(P0.05),而DP細胞Ki-67表達則明顯減少(P0.05)。最后,miR-126KD小鼠胸腺淋巴細胞中磷酸化AKT和磷酸化ERK1/2的表達水平明顯下調(diào)(P0.05)。結(jié)論 miR-126基因敲減可顯著影響胸腺細胞特別是CD4~+SP細胞的發(fā)育,為后續(xù)進一步深入探討miR-126對T淋巴細胞發(fā)育以及功能的影響提供重要的實驗基礎(chǔ)。
[Abstract]:Objective to study the effect of miR-126 knockout on the development of thymocytes in mice and its significance. Methods the volume of thymus in miR-126 knockout mice was observed. The expression level of miR-126 in thymus of mice was detected by real-time PCR. The morphological structure of thymus was observed by HE staining. The percentage of lymphocytes in thymus, the expression of nuclear antigen Ki-67 and the changes of apoptosis were observed. Finally, we detected the expression of phosphorylated AKTa-p-AKT and phosphorylated ERK1 / 2p-ERK in thymus by Western blot. The results showed that there was no significant difference in the volume, weight and total number of cells between WT and miR-126KD mice. However, the expression of miRNA-126 in thymus of miR-126KD mice was significantly down-regulated. The morphologic changes of thymus tissue were observed in P0.05, miR-126KD mice. Compared with WT mice, the percentage and absolute number of CD _ 4 ~ SP cells in thymus of miR-126KD mice were significantly increased, while the percentage of CD _ 4 ~ CD _ (8) ~ (DPN) cells and the absolute number of cells in thymus were significantly increased compared with WT mice. Logarithm significantly decreased the expression of CD _ 4 ~ SP nuclear antigen Ki-67 in thymus of P0.05 ~ 126KD mice, and significantly decreased the apoptosis of P0.05, while the expression of Ki-67 in DP cells decreased the expression of P0.05. Finally, phosphorylated AKT and phosphorylated AKT in thymocytes of miR-126KD mice were significantly reduced. Conclusion miR-126 knockout can significantly affect the development of thymocytes, especially CD4 ~ SP cells. It provides an important experimental basis for the further study of the effect of miR-126 on the development and function of T lymphocytes.
【作者單位】： 遵義醫(yī)學(xué)院免疫學(xué)教研室貴州省免疫學(xué)研究生教育創(chuàng)新基地;
【基金】：國家自然科學(xué)基金(31370918) 教育部新世紀優(yōu)秀人才計劃(NCET-12-0661)
【分類號】：R392

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本文編號：1542706