本文關(guān)鍵詞： 小梁細(xì)胞 血小板源性生長(zhǎng)因子-BB 基質(zhì)金屬蛋白酶　出處：《濱州醫(yī)學(xué)院》2012年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

【摘要】：目的： 探索完善的體外培養(yǎng)牛眼小梁細(xì)胞的方法,探討血小板源性生長(zhǎng)因子-BB(platelet-derived growth factor-BB,PDGF-BB)對(duì)體外培養(yǎng)牛眼小梁細(xì)胞增殖的影響及對(duì)細(xì)胞表面基質(zhì)金屬蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)表達(dá)的影響及意義。 方法： 對(duì)牛眼小梁細(xì)胞進(jìn)行體外培養(yǎng)并鑒定(NSE、Ⅷ因子和FN的表達(dá)),用紅血球計(jì)數(shù)法計(jì)數(shù)細(xì)胞,并繪制細(xì)胞生長(zhǎng)曲線。獲得三代對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期小梁細(xì)胞之后,分別用不同濃度的PDGF-BB (Ong/ml、5.0ng/ml、12.5ng/ml、25.0ng/ml)進(jìn)行刺激干預(yù)。24小時(shí)后收集細(xì)胞,用SRB法和MTT法檢測(cè)PDGF-BB對(duì)牛眼小梁細(xì)胞增殖的影響。然后分別采用RT-PCR法和免疫組織化學(xué)法觀察PDGF-BB對(duì)培養(yǎng)2小時(shí)后牛眼小梁細(xì)胞MMP-2mRNA和蛋白表達(dá)水平的影響。 結(jié)果： 體外培養(yǎng)牛眼小梁細(xì)胞NSE、FN染色呈陽(yáng)性,Ⅷ因子染色呈陰性,傳三代細(xì)胞在接種第三天進(jìn)入對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期,持續(xù)時(shí)間為三天左右。SRB和MTT法均顯示隨PDGF-BB濃度增加,小梁細(xì)胞增殖能力明顯增強(qiáng),呈良好的線性關(guān)系,統(tǒng)計(jì)學(xué)分析顯示有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。RT-PCR檢測(cè)發(fā)現(xiàn),隨PDGF-BB濃度增加,牛眼小梁細(xì)胞MMP-2的mRNA表達(dá)水平明顯升高(P0.05)；免疫組織化學(xué)檢測(cè)發(fā)現(xiàn),PDGF-BB能顯著促進(jìn)牛眼小梁細(xì)胞MMP-2的蛋白表達(dá)(P0.05)。 結(jié)論： 實(shí)驗(yàn)用牛眼小梁細(xì)胞,最好選擇傳三代小梁細(xì)胞,應(yīng)采用傳代后三天左右的對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期細(xì)胞。PDGF-BB對(duì)體外培養(yǎng)牛眼小梁細(xì)胞的增殖有明顯的促進(jìn)作用。在體外培養(yǎng)的條件下,PDGF-BB可以引起牛眼小梁細(xì)胞MMP-2表達(dá)量的增加,可能對(duì)降低眼內(nèi)壓具有重要作用。
[Abstract]:Objective: Objective: to explore the method of cultured bovine trabecular meshwork cells in vitro and to explore platelet-derived growth factor-BB. The effect of PDGF-BBB on the proliferation of cultured bovine trabecular meshwork cells and on the matrix metalloproteinase-2 matrix metalloproteinase-2 on the surface of bovine trabecular meshwork cells was studied. The effect and significance of MMP-2 expression. Methods: Bovine trabecular meshwork cells were cultured in vitro to identify the expression of NSE, factor 鈪，

本文編號(hào)：1486958