發(fā)布時間：2018-02-03 08:41

  本文關(guān)鍵詞： 牛血清白蛋白 熒光探針 熒光猝滅 鏈霉素 槲皮素 脫落酸　出處：《山東師范大學(xué)》2011年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

【摘要】：藥物與生物大分子之間的結(jié)合機理和作用機理是藥學(xué)科學(xué)領(lǐng)域中一個重要的組成部分。藥物在人體中的結(jié)合部位和作用機理直接影響著藥物對疾病的治療作用。因此,在模擬人體環(huán)境條件下研究藥物與生物大分子的結(jié)合部位和作用機理是十分必要的,也可以確保人們用藥的安全、合理和有效。蛋白質(zhì)是生物體內(nèi)重要的大分子,它能與許多內(nèi)源或外源性的化合物結(jié)合,具有存儲和轉(zhuǎn)運的功能。藥物進入人體一般要經(jīng)過血漿的貯存和運輸,到達受體部位發(fā)生藥理作用,因此研究血清白蛋白與藥物的結(jié)合作用機理具有重要的理論和現(xiàn)實意義。 目前,用于表征蛋白質(zhì)-藥物分子結(jié)合作用的方法很多,其中熒光探針技術(shù)因其具有靈敏度高、選擇性好、簡便等特點而得到廣泛應(yīng)用。熒光探針法就是利用加入的藥物與探針分子作用使得生物大分子或探針分子的熒光發(fā)生變化來研究藥物分子與生物大分子之間的作用機理,從而進一步了解藥物分子在人體中的作用機理。本論文主要采用熒光探針法研究藥物分子與牛血清白蛋白的結(jié)合部位和作用機理,從而進一步了解和研究藥物在人體中的作用機理和發(fā)揮藥效的途徑。本論文共分為五章 第一章綜述了藥物分子與血清白蛋白相互作用的研究現(xiàn)狀及研究意義。首先簡要介紹了蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)和理化性質(zhì),然后依次對藥物小分子與血清白蛋白相互作用的研究方法、研究內(nèi)容和研究進展展開了評述。 第二章利用熒光光譜和紫外光譜法研究了伊文思藍(EB, Evans blue)和鏈霉素(SM, streptomycin)對牛血清白蛋白間的競爭反應(yīng)機制。伊文思藍能夠猝滅牛血清白蛋白的熒光發(fā)生靜態(tài)猝滅。然而當(dāng)加入鏈霉素后,牛血清白蛋白的熒光恢復(fù)。這說明EB和鏈霉素對BSA發(fā)生了競爭反應(yīng)。求得了牛血清白蛋白與鏈霉素的結(jié)合常數(shù)為6.52×10~6 L/moL。 第三章利用熒光光譜法研究了牛血清白蛋白與脫落酸的相互作用。脫落酸與牛血清白蛋白作用使牛血清白蛋白發(fā)生熒光猝滅。根據(jù)Stern-Volmer方程和熒光壽命研究了熒光猝滅的類型及機理。其猝滅機理是靜態(tài)猝滅,即脫落酸和牛血清白蛋白形成了一種穩(wěn)定的復(fù)合物。利用同步熒光光譜確定了脫落酸對牛血清白蛋白的微區(qū)結(jié)構(gòu)的影響。通過實驗求算了脫落酸和牛血清白蛋白的結(jié)合常數(shù)和結(jié)合點數(shù)K =6.38×10~4L.mol~(-1), n =1.452。 第四章利用熒光探針法篩選評價了天然抗氧化藥劑槲皮素的抗氧化能力,以1, 3-二苯基異苯并呋喃(DPBF)作為熒光探針,研究了抗氧化藥物槲皮素對單線態(tài)氧的清除能力,討論了其作用機制,并實驗了干擾物質(zhì)的影響。 第五章利用熒光猝滅法建立了測定植物中脫落酸的新方法。
[Abstract]:The binding mechanism and action mechanism between drugs and biomolecules is an important part in the field of pharmaceutical science. The binding site and action mechanism of drugs in human body directly affect the therapeutic effect of drugs on diseases. So... It is necessary to study the binding site and action mechanism of drugs and biomolecules under simulated human environment, and to ensure the safety of drug use. Reasonable and effective. Protein is an important macromolecule in organism, it can bind with many endogenous or exogenous compounds, and has the function of storage and transportation. Drugs entering the human body generally have to be stored and transported through plasma. Therefore, it is of great theoretical and practical significance to study the mechanism of binding of serum albumin to drugs. At present, there are many methods used to characterize protein-drug molecular binding, among which fluorescent probe technology has high sensitivity and good selectivity. Fluorescence probe method is to make use of the action of added drug and probe molecule to change the fluorescence of biological macromolecule or probe molecule to study the action between drug molecule and biological macromolecule. Using mechanism. In order to further understand the action mechanism of drug molecules in human body, this paper mainly uses fluorescence probe method to study the binding site and action mechanism of drug molecules with bovine serum albumin (BSA). In order to further understand and study the mechanism of action of drugs in the human body and the ways to give full play to the drug effect. This paper is divided into five chapters. In the first chapter, the research status and significance of the interaction between drug molecules and serum albumin are reviewed. Firstly, the structure and physicochemical properties of proteins are briefly introduced. Then, the research methods, contents and progress of the interaction between drug small molecules and serum albumin were reviewed in turn. In chapter 2, Evans blueand streptomycin SM were studied by fluorescence and UV spectra. The mechanism of competitive reaction between bovine serum albumin by streptomycin.Evans blue can quench the fluorescence of bovine serum albumin by static quenching, however, when streptomycin is added. The fluorescence recovery of bovine serum albumin indicates that EB and streptomycin react competitively to BSA, and the binding constant of bovine serum albumin to streptomycin is 6.52 脳 10 ~ (-6) L / mol ~ (-1). In chapter 3, the interaction between bovine serum albumin and abscisic acid was studied by fluorescence spectrometry. The fluorescence quenching of bovine serum albumin was induced by the interaction of abscisic acid and bovine serum albumin. The type and mechanism of fluorescence quenching are studied by the equation and fluorescence lifetime. The quenching mechanism is static quenching. The effect of abscisic acid on the microstructures of bovine serum albumin (BSA) was determined by synchronous fluorescence spectroscopy. The abscisic acid and bovine serum albumin (BSA) were calculated by experiments. Binding constants and binding points K of the. 6.38 脳 10 ~ (4) L. Moll (. -1). N 1.452. In chapter 4th, the antioxidant ability of quercetin was evaluated by fluorescence probe method, and 1,3-diphenyl isobenzofuran (DPBF) was used as the fluorescent probe. The scavenging ability of quercetin on singlet oxygen was studied, the mechanism of its action was discussed, and the effect of interfering substances was tested. In Chapter 5th, a new method for the determination of abscisic acid in plants was established by fluorescence quenching method.
【學(xué)位授予單位】：山東師范大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2011
【分類號】：R346

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