本文關(guān)鍵詞： 眼前節(jié)缺血 血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子 蘇拉明 直肌離斷術(shù) 酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)　出處：《河北聯(lián)合大學(xué)》2011年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

【摘要】：目的: 通過離斷兔眼多條直肌的方法建立眼前節(jié)缺血?jiǎng)游锬Ｐ?檢測(cè)兔眼前節(jié)缺血模型中眼前節(jié)組織中VEGF的表達(dá)情況,了解VEGF與眼前節(jié)缺血的關(guān)系,并探討蘇拉明對(duì)VEGF的抑制作用,為眼前節(jié)缺血的治療提供思路和診治依據(jù)。 材料與方法: 體重2.5±0.2kg的純種大耳白兔54只,健康雄性,排除眼疾,隨機(jī)分為正常假手術(shù)組18只兔(36只眼)與損傷組36只兔。并將損傷組分為損傷缺血組(36只眼,左眼),損傷治療組(36只眼,右眼),其中正常假手術(shù)組,僅行球結(jié)膜環(huán)形剪開不建立眼前節(jié)缺血模型;損傷組同一大耳白兔左眼離斷兔眼4條直肌后,兔眼球周注射平衡鹽液1ml(損傷缺血組);右眼離斷兔眼4條直肌后,球周注射蘇拉明0.5mg(損傷治療組),將各組按不同的時(shí)間點(diǎn)3小時(shí)、6小時(shí)、1天、3天、7天、14天,六個(gè)時(shí)間點(diǎn)分別于裂隙燈下觀察各組眼前節(jié)的變化情況,然后取眼前節(jié)組織后,將動(dòng)物處死;眼前節(jié)組織用做組織病理學(xué)檢查,免疫組織化學(xué)檢查,觀察各個(gè)時(shí)間點(diǎn)VEGF在眼前節(jié)組織中的表達(dá)情況及治療后情況,并用ELISA方法測(cè)定房水中VEGF濃度。所得數(shù)據(jù)資料均用SPSS13.0軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。 結(jié)果: 1、大體觀察:離斷兔眼四條直肌后,損傷缺血組3小時(shí)出現(xiàn)結(jié)膜水腫,角膜透明,房水尚清,房閃(-),虹膜、瞳孔變化不大;6小時(shí)出現(xiàn)結(jié)膜水腫明顯,角膜薄霧狀水腫,房閃(+),虹膜、瞳孔變化不大;第1天即出現(xiàn)全結(jié)膜充血,角膜輕度水腫,房水輕混濁,房閃(++),虹膜、瞳孔變化不大;第3天角膜水腫加重,房水混濁,可見塵樣KP,虹膜表面開始出現(xiàn)新生血管,房閃(++~+++),瞳孔輕度散大,呈豎橢圓形;第7天出現(xiàn)角膜水腫混濁,內(nèi)皮皺褶,房水閃輝(+++),瞳孔散大,虹膜紋理不清,虹膜表面均可見新生血管,對(duì)光反射遲鈍等;第14天角膜水腫、前房反應(yīng)均減輕,房閃(+~++),角膜緣及虹膜可見新生血管;治療組各時(shí)間點(diǎn)的角膜水腫程度、前房反應(yīng)情況均較損傷缺血組減輕。 2、組織病理學(xué)檢查結(jié)果顯示: 損傷缺血組:術(shù)后3小時(shí),角膜上皮細(xì)胞排列整齊,無水腫,基質(zhì)層排列規(guī)整,虹膜上皮細(xì)胞完整,排列稍疏松,基質(zhì)無水腫,有血管走行。6小時(shí),角膜上皮細(xì)胞排列整齊,無水腫,基質(zhì)層排列稍疏松,虹膜上皮細(xì)胞完整,排列疏松,基質(zhì)稍水腫。第1天,角膜上皮細(xì)胞排列稍紊亂,角膜緣基質(zhì)排列疏松;虹膜上皮細(xì)胞排列稍顯疏松,未見明顯的數(shù)量改變,細(xì)胞形態(tài)大致正常。第3天即出現(xiàn)角膜上皮細(xì)胞腫脹,基質(zhì)內(nèi)有炎細(xì)胞浸潤(rùn);部分虹膜上皮細(xì)胞變性,基質(zhì)水腫,白細(xì)胞附壁、游出。第7天角膜內(nèi)皮細(xì)胞腫脹,部分脫落,基質(zhì)層,血管擴(kuò)張,炎細(xì)胞增多;虹膜色素上皮層明顯水腫,空泡變性,染色質(zhì)分布不均勻,可見炎細(xì)胞浸潤(rùn),血管腔內(nèi)白細(xì)胞數(shù)量增多。14天角膜緣部的淺層鞏膜內(nèi)仍可見大量炎細(xì)胞滲出,以淋巴細(xì)胞為主,紅細(xì)胞游出;虹膜基質(zhì)、上皮層水腫減輕,細(xì)小血管增多。損傷治療組各時(shí)間點(diǎn)均較損傷組的細(xì)胞形態(tài)有明顯的改善。 3、VEGF免疫組化結(jié)果:免疫組化結(jié)果顯示,正常假手術(shù)組虹膜 血管內(nèi)皮細(xì)胞有弱陽(yáng)性的表達(dá),損傷組術(shù)后虹膜上皮細(xì)胞及血管內(nèi)皮細(xì)胞VEGF表達(dá)升高,以血管內(nèi)皮細(xì)胞升高為主。VEGF免疫組化評(píng)分結(jié)果顯示正常假手術(shù)組各時(shí)間點(diǎn)比較無差異(P0.05),損傷缺血組VEGF表達(dá)隨時(shí)間延長(zhǎng)表達(dá)逐漸增加,3小時(shí)開始升高,1天表達(dá)逐漸增加,7天表達(dá)到最高峰, 14天下降,相鄰兩組之間比較差異具有顯著性(p0.05);各時(shí)間點(diǎn)正常假手術(shù)組與損傷缺血組比較,損傷缺血組VEGF表達(dá)明顯增高,差異具有顯著性(p0.05),損傷缺血組與損傷治療組比較,損傷治療組VEGF表達(dá)下降,兩組比較差異具有顯著性(p0.05)。 4、ELISA結(jié)果顯示:正常假手術(shù)組房水中各時(shí)間點(diǎn)VEGF含量比較無顯著性差異(P0.05),損傷缺血組VEGF含量隨時(shí)間延長(zhǎng)含量逐漸增加,3小時(shí)開始升高,1天表達(dá)逐漸增加,7天表達(dá)到最高峰, 14天下降,相鄰兩組比較差異具有顯著性(p0.05);各時(shí)間點(diǎn)正常假手術(shù)組與損傷缺血組比較,損傷缺血組VEGF含量明顯高于正常假手術(shù)組,兩組比較差異具有顯著性(p0.05),損傷缺血組與損傷治療組比較,損傷治療組VEGF含量較損傷缺血組下降,兩組比較差異具有顯著性(p0.05)。 結(jié)論: 1.兔眼可用于制備眼前節(jié)缺血模型; 2.兔眼多條直肌離斷,造成兔眼前節(jié)缺血,虹膜組織中血管內(nèi)皮細(xì)胞VEGF表達(dá)升高,房水中VEGF的濃度亦升高,提示其為該病的發(fā)病機(jī)制之一; 3.ASI早期球周注射蘇拉明可以通過抑制VEGF表達(dá),進(jìn)而抑制促血管形成因素對(duì)眼前節(jié)組織的破壞作用對(duì)維持眼前節(jié)組織的形態(tài)和功能起到了重要的作用。
[Abstract]:Objective:
The establishment of anterior segment ischemia animal model by transection of rabbit eyes rectus, to detect expression of VEGF in rabbit eyes of anterior segment ischemia model in section tissues, understand the relationship between VEGF and anterior segment ischemia, and to investigate the inhibitory effect of Sura on VEGF, ideas and provide diagnostic evidence for treatment of anterior segment ischemia.
Materials and methods:
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本文編號(hào)：1445808