本文關鍵詞： 眼前節(jié)缺血 血管內(nèi)皮生長因子 蘇拉明 直肌離斷術 酶聯(lián)免疫吸附試驗　出處：《河北聯(lián)合大學》2011年碩士論文　論文類型：學位論文

【摘要】：目的: 通過離斷兔眼多條直肌的方法建立眼前節(jié)缺血動物模型,檢測兔眼前節(jié)缺血模型中眼前節(jié)組織中VEGF的表達情況,了解VEGF與眼前節(jié)缺血的關系,并探討蘇拉明對VEGF的抑制作用,為眼前節(jié)缺血的治療提供思路和診治依據(jù)。 材料與方法: 體重2.5±0.2kg的純種大耳白兔54只,健康雄性,排除眼疾,隨機分為正常假手術組18只兔(36只眼)與損傷組36只兔。并將損傷組分為損傷缺血組(36只眼,左眼),損傷治療組(36只眼,右眼),其中正常假手術組,僅行球結膜環(huán)形剪開不建立眼前節(jié)缺血模型;損傷組同一大耳白兔左眼離斷兔眼4條直肌后,兔眼球周注射平衡鹽液1ml(損傷缺血組);右眼離斷兔眼4條直肌后,球周注射蘇拉明0.5mg(損傷治療組),將各組按不同的時間點3小時、6小時、1天、3天、7天、14天,六個時間點分別于裂隙燈下觀察各組眼前節(jié)的變化情況,然后取眼前節(jié)組織后,將動物處死;眼前節(jié)組織用做組織病理學檢查,免疫組織化學檢查,觀察各個時間點VEGF在眼前節(jié)組織中的表達情況及治療后情況,并用ELISA方法測定房水中VEGF濃度。所得數(shù)據(jù)資料均用SPSS13.0軟件包進行統(tǒng)計分析。 結果: 1、大體觀察:離斷兔眼四條直肌后,損傷缺血組3小時出現(xiàn)結膜水腫,角膜透明,房水尚清,房閃(-),虹膜、瞳孔變化不大;6小時出現(xiàn)結膜水腫明顯,角膜薄霧狀水腫,房閃(+),虹膜、瞳孔變化不大;第1天即出現(xiàn)全結膜充血,角膜輕度水腫,房水輕混濁,房閃(++),虹膜、瞳孔變化不大;第3天角膜水腫加重,房水混濁,可見塵樣KP,虹膜表面開始出現(xiàn)新生血管,房閃(++~+++),瞳孔輕度散大,呈豎橢圓形;第7天出現(xiàn)角膜水腫混濁,內(nèi)皮皺褶,房水閃輝(+++),瞳孔散大,虹膜紋理不清,虹膜表面均可見新生血管,對光反射遲鈍等;第14天角膜水腫、前房反應均減輕,房閃(+~++),角膜緣及虹膜可見新生血管;治療組各時間點的角膜水腫程度、前房反應情況均較損傷缺血組減輕。 2、組織病理學檢查結果顯示: 損傷缺血組:術后3小時,角膜上皮細胞排列整齊,無水腫,基質層排列規(guī)整,虹膜上皮細胞完整,排列稍疏松,基質無水腫,有血管走行。6小時,角膜上皮細胞排列整齊,無水腫,基質層排列稍疏松,虹膜上皮細胞完整,排列疏松,基質稍水腫。第1天,角膜上皮細胞排列稍紊亂,角膜緣基質排列疏松;虹膜上皮細胞排列稍顯疏松,未見明顯的數(shù)量改變,細胞形態(tài)大致正常。第3天即出現(xiàn)角膜上皮細胞腫脹,基質內(nèi)有炎細胞浸潤;部分虹膜上皮細胞變性,基質水腫,白細胞附壁、游出。第7天角膜內(nèi)皮細胞腫脹,部分脫落,基質層,血管擴張,炎細胞增多;虹膜色素上皮層明顯水腫,空泡變性,染色質分布不均勻,可見炎細胞浸潤,血管腔內(nèi)白細胞數(shù)量增多。14天角膜緣部的淺層鞏膜內(nèi)仍可見大量炎細胞滲出,以淋巴細胞為主,紅細胞游出;虹膜基質、上皮層水腫減輕,細小血管增多。損傷治療組各時間點均較損傷組的細胞形態(tài)有明顯的改善。 3、VEGF免疫組化結果:免疫組化結果顯示,正常假手術組虹膜 血管內(nèi)皮細胞有弱陽性的表達,損傷組術后虹膜上皮細胞及血管內(nèi)皮細胞VEGF表達升高,以血管內(nèi)皮細胞升高為主。VEGF免疫組化評分結果顯示正常假手術組各時間點比較無差異(P0.05),損傷缺血組VEGF表達隨時間延長表達逐漸增加,3小時開始升高,1天表達逐漸增加,7天表達到最高峰, 14天下降,相鄰兩組之間比較差異具有顯著性(p0.05);各時間點正常假手術組與損傷缺血組比較,損傷缺血組VEGF表達明顯增高,差異具有顯著性(p0.05),損傷缺血組與損傷治療組比較,損傷治療組VEGF表達下降,兩組比較差異具有顯著性(p0.05)。 4、ELISA結果顯示:正常假手術組房水中各時間點VEGF含量比較無顯著性差異(P0.05),損傷缺血組VEGF含量隨時間延長含量逐漸增加,3小時開始升高,1天表達逐漸增加,7天表達到最高峰, 14天下降,相鄰兩組比較差異具有顯著性(p0.05);各時間點正常假手術組與損傷缺血組比較,損傷缺血組VEGF含量明顯高于正常假手術組,兩組比較差異具有顯著性(p0.05),損傷缺血組與損傷治療組比較,損傷治療組VEGF含量較損傷缺血組下降,兩組比較差異具有顯著性(p0.05)。 結論: 1.兔眼可用于制備眼前節(jié)缺血模型; 2.兔眼多條直肌離斷,造成兔眼前節(jié)缺血,虹膜組織中血管內(nèi)皮細胞VEGF表達升高,房水中VEGF的濃度亦升高,提示其為該病的發(fā)病機制之一; 3.ASI早期球周注射蘇拉明可以通過抑制VEGF表達,進而抑制促血管形成因素對眼前節(jié)組織的破壞作用對維持眼前節(jié)組織的形態(tài)和功能起到了重要的作用。
[Abstract]:Objective:
The establishment of anterior segment ischemia animal model by transection of rabbit eyes rectus, to detect expression of VEGF in rabbit eyes of anterior segment ischemia model in section tissues, understand the relationship between VEGF and anterior segment ischemia, and to investigate the inhibitory effect of Sura on VEGF, ideas and provide diagnostic evidence for treatment of anterior segment ischemia.
Materials and methods:
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本文編號：1445808