本文關(guān)鍵詞：Orexin對(duì)慢性間歇性低氧模型大鼠上氣道開(kāi)放的調(diào)控機(jī)制　出處：《復(fù)旦大學(xué)》2011年博士論文　論文類(lèi)型：學(xué)位論文

  更多相關(guān)文章： orexin 頦舌肌 舌下神經(jīng) orexin受體 下丘腦外側(cè)區(qū) 睡眠覺(jué)醒狀態(tài) 慢性間歇性低氧

【摘要】：背景與目的阻塞性睡眠呼吸暫停(obstructive sleep apnea, OS A)是一種以睡眠中反復(fù)的上氣道阻塞、通氣明顯減少或停止導(dǎo)致體內(nèi)低氧為特征的較高發(fā)病率的臨床疾病,可引起高血壓、心肌梗塞、中風(fēng)和猝死等一系列嚴(yán)重的相關(guān)癥狀和疾病。頦舌肌是最大的促使上氣道開(kāi)放的擴(kuò)張肌,受舌下運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元發(fā)出的舌下神經(jīng)支配。當(dāng)其收縮時(shí)使舌肌向前運(yùn)動(dòng),促使咽部氣道開(kāi)放,從而保證了肺的有效通氣,是呼吸正常進(jìn)行的前提。研究表明,OSA的發(fā)病機(jī)制與睡眠期,尤其是快眼動(dòng)(rapid eye movement, REM)睡眠期頦舌肌肌張力的抑制有關(guān)。對(duì)于氣道解剖結(jié)構(gòu)已狹窄的OSA病人,REM期頦舌肌肌張力的下降,引起舌肌向口咽腔方向后墜,導(dǎo)致嚴(yán)重的上氣道阻塞,引起睡眠期反復(fù)的低氧血癥。但目前對(duì)其病因、發(fā)病機(jī)制等并沒(méi)有完全闡明。研究顯示OSA患者血漿中orexin A的濃度顯著低于正常人。而orexin基因敲除小鼠在REM睡眠期會(huì)頻繁地出現(xiàn)睡眠呼吸暫停。這些實(shí)驗(yàn)結(jié)果都提示OSA與orexin的調(diào)控異常有關(guān)。Orexins(包括orexin A和orexin B)是下丘腦orexin神經(jīng)元分泌的一種神經(jīng)肽,在體內(nèi)很多生理過(guò)程中發(fā)揮重要的作用,如攝食和能量穩(wěn)態(tài)、睡眠覺(jué)醒周期、應(yīng)激、心血管呼吸的調(diào)節(jié)等等。Orexin受體(orexin receptor, OXR)屬于G蛋白耦聯(lián)受體家族,主要分為兩種亞型——orexin-1型受體(orexin type 1 receptor, OX1R)和orexin-2型受體(orexin type 2 receptor, OX2R).其中orexinA可以和兩種受體結(jié)合,orexin B主要和OX2R結(jié)合。形態(tài)學(xué)研究表明,舌下運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元不僅接受orexin纖維的投射,還表達(dá)OX1R和OX2R。然而,到目前為止還不清楚orexin對(duì)上氣道開(kāi)放是如何調(diào)控的。關(guān)于orexin對(duì)頦舌肌和舌下神經(jīng)活動(dòng)的調(diào)節(jié)作用,至今研究甚少。在去大腦貓的舌下神經(jīng)核微量注射orexin A可增強(qiáng)頦舌肌的活動(dòng)。在大鼠腦橋KF核微量注射orexin B可延長(zhǎng)舌下神經(jīng)的放電時(shí)間。但這些僅有的結(jié)果并未探討內(nèi)源性orexin對(duì)頦舌肌的作用及其作用的機(jī)制,以及orexin在不同睡眠覺(jué)醒狀態(tài)下是如何通過(guò)作用于舌下運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元來(lái)增強(qiáng)頦舌肌的活動(dòng)。所以,本實(shí)驗(yàn)主要探討內(nèi)源性orexin是如何調(diào)節(jié)頦舌肌和舌下神經(jīng)的活動(dòng)及其作用的受體機(jī)制,另外在清醒自由運(yùn)動(dòng)動(dòng)物的不同睡眠覺(jué)醒狀態(tài)觀(guān)察內(nèi)源性orexin對(duì)頦舌肌活動(dòng)的作用,并且通過(guò)建立慢性間歇性低氧(chronic intermittent hypoxia, CIH)模型大鼠模擬臨床OSA,觀(guān)察CIH模型大鼠頦舌肌和舌下神經(jīng)活動(dòng)的變化,探討下丘腦外側(cè)區(qū)(lateral hypothalamus, LH) orexin神經(jīng)元和延髓舌下神經(jīng)核OXR在OSA病理過(guò)程中的作用機(jī)制,希望為OSA的發(fā)病機(jī)制及其臨床治療提供新的理論依據(jù)。材料與方法實(shí)驗(yàn)采用健康成年雄性SD大鼠。1. 正常大鼠麻醉后在延髓一側(cè)舌下神經(jīng)核進(jìn)行微量注射,同時(shí)記錄同側(cè)頦舌肌的肌電活動(dòng),觀(guān)察不同濃度的外源性orexin A、不同的OXR特異性拮抗劑對(duì)頦舌肌肌電的作用；2.預(yù)先用特異性神經(jīng)毀損藥物orexin-SAP毀損大鼠雙側(cè)LH區(qū)orexin神經(jīng)元或雙側(cè)延髓舌下神經(jīng)核區(qū)的舌下運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元,14天后麻醉動(dòng)物記錄頦舌肌肌電和舌下神經(jīng)放電活動(dòng),觀(guān)察內(nèi)源性orexin對(duì)頦舌肌肌電和舌下神經(jīng)放電的作用；3.預(yù)先用orexin-SAP毀損大鼠雙側(cè)LH區(qū)orexin神經(jīng)元,14天后記錄清醒自由運(yùn)動(dòng)動(dòng)物的腦電、頸部肌電和頦舌肌肌電活動(dòng),觀(guān)察不同睡眠覺(jué)醒狀態(tài)下內(nèi)源性orexin對(duì)頦舌肌肌電的作用；4.建立CIH模型大鼠,記錄頦舌肌肌電和舌下神經(jīng)放電活動(dòng)的變化,并觀(guān)察LH區(qū)orexin神經(jīng)元和延髓舌下神經(jīng)核OXR的表達(dá)變化。結(jié)果用“均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)誤”表示,多樣本均數(shù)比較采用單因素的方差分析,再用Newman-Keuls檢驗(yàn),兩樣本均數(shù)比較采用配對(duì)設(shè)計(jì)的t檢驗(yàn),或成組設(shè)計(jì)的t檢驗(yàn),P0.05時(shí)認(rèn)為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)果1.外源性orexin A對(duì)正常大鼠麻醉狀態(tài)下頦舌肌肌電的作用：正常大鼠延髓舌下神經(jīng)核微量注射外源性orexin A (0.1 μ1)后主要引起頦舌肌的呼吸相關(guān)性活動(dòng)增強(qiáng)。50μmol/l (n=6, P0.05)、100μmol/l (n=5, P0.05)、 200μmol/l (n=5, P0.05) orexin A均使頦舌肌的呼吸相關(guān)性活動(dòng)明顯增加,但呼吸頻率均無(wú)變化(P0.05)。其中200μ.mol/l orexin A對(duì)頦舌肌呼吸相關(guān)性活動(dòng)的作用比50 μmol/l orexin A顯著增大(P0.05)。2.內(nèi)源性orexin對(duì)正常大鼠麻醉狀態(tài)下頦舌肌肌電和舌下神經(jīng)放電的作用：2.1預(yù)先用特異性神經(jīng)毀損藥物orexin-SAP (0.43mg/ml,400nl/側(cè))毀損雙側(cè)LH區(qū)orexin神經(jīng)元,頦舌肌的呼吸相關(guān)性活動(dòng)減小(n=6,P0.001),舌下神經(jīng)的呼吸相關(guān)性活動(dòng)也明顯減小(n=5,P0.001)。2.2預(yù)先用orexin-SAP (0.43mg/ml,200nl/側(cè))毀損雙側(cè)舌下運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元,頦舌肌的呼吸相關(guān)性活動(dòng)明顯減小(n=4,P0.001),舌下神經(jīng)的呼吸相關(guān)性活動(dòng)也顯著減小(n=3,P0.001)。3.內(nèi)源性orexin對(duì)正常大鼠不同睡眠覺(jué)醒狀態(tài)下頦舌肌肌電的作用：雙側(cè)LH區(qū)orexin神經(jīng)元?dú)p的大鼠無(wú)論在白天還是黑夜,其慢波睡眠(slowwave sleep, SWS)期的頦舌肌肌電明顯減弱(n=4,P0.01),而清醒(wakefulness,W)期、REM睡眠期頦舌肌肌電有減小趨勢(shì),但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(n=4,P0.05)。4. Orexin對(duì)頦舌肌作用的受體機(jī)制：4.1 OX1R的作用：在正常大鼠延髓舌下神經(jīng)核微量注射特異性O(shè)X1R拮抗劑SB334867(10mmol/l,0.1μl)后,頦舌肌的呼吸相關(guān)性活動(dòng)明顯減弱(n=4,P0.01)；4.2 OX2R的作用：正常大鼠延髓舌下神經(jīng)核微量注射特異性O(shè)X2R拮抗劑TCS OX229 (1 mmol/1,0.1 μl)使頦舌肌的呼吸相關(guān)性活動(dòng)顯著減弱(n=5,P0.01),同時(shí)使頦舌肌的緊張性活動(dòng)也明顯減弱(n=5,P0.05)。5. Orexin對(duì)CIH模型大鼠呼吸活動(dòng)的影響：5.1CIH模型大鼠頦舌肌肌電和舌下神經(jīng)放電的變化：CIH模型大鼠頦舌肌緊張性活動(dòng)減弱(n=6,P0.001),呼吸相關(guān)性活動(dòng)也減弱(n=6,P0.05)；舌下神經(jīng)的呼吸相關(guān)性活動(dòng)也明顯減弱(n=7,P0.05)。5.2 CIH模型大鼠LH區(qū)orexin神經(jīng)元和延髓舌下神經(jīng)核OXR表達(dá)的變化：CIH模型大鼠LH區(qū)orexin神經(jīng)元相對(duì)光密度值減小(n=6,P0.05)。延髓舌下神經(jīng)核OX1R相對(duì)光密度值減少(n=6),OX2R相對(duì)光密度值增多(n=6),但兩者均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論1.內(nèi)源性和外源性orexin A均可增強(qiáng)頦舌肌和舌下神經(jīng)的活動(dòng)；2.延髓舌下運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元的OX1R和OX2R均介導(dǎo)了LH區(qū)orexin神經(jīng)元對(duì)頦舌肌的興奮作用；3.內(nèi)源性orexin能夠在慢波睡眠期增強(qiáng)頦舌肌的活動(dòng)；4.CIH模型大鼠的頦舌肌和舌下神經(jīng)活動(dòng)均減弱,可能和LH區(qū)orexin神經(jīng)元的表達(dá)減少有關(guān)。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：復(fù)旦大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2011
【分類(lèi)號(hào)】：R766;R-332

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前2條

1 姚行齊;楊慧;張桂鳳;唐瑛;;阻塞性睡眠呼吸暫停低通氣綜合征患者的血漿食欲素A水平測(cè)定及意義[J];臨床耳鼻咽喉科雜志;2006年12期

2 歐陽(yáng)松云;王辰;龐寶森;詹玉梅;;低通氣綜合征患者血漿食欲素A水平及代謝紊亂的影響[J];中國(guó)實(shí)用醫(yī)藥;2008年12期

，

本文編號(hào)：1424642