本文關(guān)鍵詞：萊茵衣藻LZTFL1蛋白的多克隆抗體制備及應(yīng)用　出處：《中國(guó)生物工程雜志》2017年11期 　論文類型：期刊論文

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【摘要】：目的:亮氨酸拉鏈轉(zhuǎn)錄因子1(LZTFL1)是一種與纖毛信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)相關(guān)的蛋白質(zhì),關(guān)于其如何在信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)中發(fā)揮作用以及作用機(jī)制目前尚不清楚。萊茵衣藻(Chlamydomonas reinhardtii)是研究纖毛信號(hào)傳導(dǎo)的模式生物,而目前對(duì)萊茵衣藻LZTFL1蛋白的研究甚少,尚未有相應(yīng)的檢測(cè)抗體,因此制備LZTFL1多克隆抗體用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)研究。方法:采用RT-PCR技術(shù)從C.reinhardtii CC125中提取總RNA,擴(kuò)增981bp的目的基因Lztfl1,插入到p ET-28a(+)原核表達(dá)載體,成功構(gòu)建p ET-28a(+)-Lztfl1重組質(zhì)粒,轉(zhuǎn)入E.coli BL21(DE3)經(jīng)IPTG誘導(dǎo)后成功表達(dá)6×His-LZTFL1融合蛋白,融合蛋白經(jīng)親和純化后免疫新西蘭大白兔制備多克隆抗體,最后采用間接ELISA法測(cè)得抗血清效價(jià)達(dá)到1∶512 000,經(jīng)Western blot對(duì)C.reinhardtii CC125檢測(cè)具有較高特異性。結(jié)果:首次實(shí)現(xiàn)了萊茵衣藻LZTFL1蛋白的原核表達(dá),制備出一支兔抗萊茵衣藻LZTFL1蛋白的多克隆抗體,為后續(xù)研究LZTFL1蛋白在萊茵衣藻中的結(jié)構(gòu)功能及在纖毛信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)中的相互作用奠定了基礎(chǔ)。
[Abstract]:Objective : The leucine zipper transcription factor 1 ( LZTFL1 ) is a kind of protein related to ciliary signal transduction . It is not clear how it plays a role in signal transduction and the mechanism of action is not clear .

【作者單位】： 天津科技大學(xué)大健康生物技術(shù)研究所天津市大健康生物技術(shù)國(guó)際聯(lián)合研究中心天津科技大學(xué)食品工程與生物技術(shù)學(xué)院;
【基金】：國(guó)際遺傳工程與生物技術(shù)中心聯(lián)合研究資助項(xiàng)目(CRP/CHN15-01)
【分類號(hào)】：R392
【正文快照】： 萊茵衣藻(C.reinhardtii)是一種結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單的單細(xì)胞真核藻類,是目前國(guó)內(nèi)外研究纖毛結(jié)構(gòu)、組裝及功能的主要模式生物之一[1]。纖毛根據(jù)其運(yùn)動(dòng)狀態(tài)分為運(yùn)動(dòng)纖毛和原生纖毛,運(yùn)動(dòng)纖毛是由“9+2”型微管蛋白骨架形成的從細(xì)胞基體部位伸出的較長(zhǎng)細(xì)胞突起,原生纖毛由“9+0”型微管蛋白

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