發(fā)布時間：2018-01-03 22:37

  本文關(guān)鍵詞：PARP-1沉默對骨髓間充質(zhì)干細胞凋亡的影響　出處：《中國老年學(xué)雜志》2017年03期 　論文類型：期刊論文

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【摘要】：目的探討沉默PARP-1對1,4-苯醌(PBQ)致大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞(BMSCs)凋亡的影響。方法以空載體BMSCs為對照組,以PARP-1沉默BMSCs為處理組,免疫印跡法檢測聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(PARP)-1蛋白表達量。磷酸鹽緩沖液(PBS)溶解PBQ,分別以0、2.5、5.0、10.0、20.0、40.0、80.0、160.0和320.0μmol/L PBQ染毒兩組細胞,根據(jù)細胞活力檢測結(jié)果選擇合適染毒濃度后,應(yīng)用噻唑藍(MTT)比色法檢測細胞活力,Annexin V-PE/7-AAD標(biāo)記的流式細胞技術(shù)檢測細胞凋亡,實時熒光定量-聚合酶鏈反應(yīng)檢測兩組細胞PARP-1基因表達。結(jié)果沉默細胞PARP-1蛋白表達量〔(0.15±0.02)倍〕與對照組細胞〔(1.00±0.03)倍〕相比,下降了85%(P0.05)。PBQ染毒24 h后,相同劑量下兩組細胞的活力并無顯著性差異。隨著PBQ染毒劑量增加,兩組細胞PARP-1表達水平和凋亡率均明顯增高(P0.05),且相同劑量下PARP-1沉默細胞比對照組細胞凋亡率明顯增高(P0.05)。結(jié)論 PARP-1沉默BMSCs在PBQ作用下更易發(fā)生凋亡,PARP-1可能參與了PBQ誘導(dǎo)的細胞凋亡。
[Abstract]:Objective to investigate the silencing of PARP-1 1,4- benzoquinone (PBQ) induced rat bone marrow mesenchymal stem cells (BMSCs) apoptosis. Methods BMSCs empty vector control group, PARP-1 silencing BMSCs as treatment group and Western blot of poly adenosine phosphate ribose polymerase two (PARP) -1 protein expression volume of phosphate buffer. Liquid (PBS) dissolved PBQ, respectively 0,2.5,5.0,10.0,20.0,40.0,80.0160.0 and 320 mol/L PBQ in two groups of cells, cell viability was detected according to the selection of appropriate exposure concentration after application of thiazole blue (MTT) than cell viability assay, Annexin V-PE /7-AAD marked apoptosis flow cytometry detection, real-time fluorescence quantitative polymerase chain the reaction cell PARP-1 gene expression of the two groups. Results the expression of PARP-1 protein in cells of silence (0.15 + 0.02) times and the cells in the control group, (1 + 0.03) times was decreased by 85% compared to.PBQ (P0.05) after 24 h exposure, Significant differences of the two groups of cell viability without the same dose. With the increasing of the dose of PBQ, two groups of cells PARP-1 expression and apoptosis rate were significantly increased (P0.05), and the same dose of PARP-1 silenced cells than the control group apoptosis rate was significantly higher (P0.05). Conclusion PARP-1 silencing BMSCs more susceptible to apoptosis in PBQ under the action of PARP-1 may be involved in PBQ induced apoptosis.

【作者單位】： 廣東醫(yī)科大學(xué)公共衛(wèi)生學(xué)院勞動衛(wèi)生與環(huán)境衛(wèi)生教研室;東莞市環(huán)境醫(yī)學(xué)重點實驗室;廣東醫(yī)科大學(xué)公共衛(wèi)生學(xué)院實驗中心;
【基金】：廣東醫(yī)科大學(xué)科研基金(No.2XB13012)
【分類號】：R329.2
【正文快照】： 1,4-苯醌(PBQ)又稱對苯醌,是苯的代謝終產(chǎn)物,在有機合成工業(yè)中廣泛應(yīng)用。PBQ作用于骨髓,能引起造血功能損害并導(dǎo)致白血病,但其毒性作用機制尚不完全清楚〔1〕。PBQ在體內(nèi)能通過形成多種DNA加合物誘導(dǎo)遺傳突變的產(chǎn)生,也能夠促進或抑制細胞凋亡〔2,3〕。聚腺苷二磷酸核糖聚合酶-

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