重度慢性間歇低氧對(duì)大鼠海馬神經(jīng)細(xì)胞ERK通路及凋亡的影響
本文關(guān)鍵詞:重度慢性間歇低氧對(duì)大鼠海馬神經(jīng)細(xì)胞ERK通路及凋亡的影響 出處:《河北聯(lián)合大學(xué)》2011年碩士論文 論文類(lèi)型:學(xué)位論文
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【摘要】:目的通過(guò)建立重度慢性間歇低氧大鼠模型,觀察大鼠海馬神經(jīng)細(xì)胞ERK通路及凋亡的變化,探討ERK通路對(duì)神經(jīng)系統(tǒng)的影響。 方法48只成年雄性Wistar大鼠采用隨機(jī)數(shù)字法分組原則分為2組:5%間歇低氧組(5%CIH組)、空白對(duì)照組(UC組),每組按不同時(shí)間點(diǎn)分為4個(gè)亞組:分別為2、4、6、8w組。將5%CIH組大鼠循環(huán)交替給予不同流速的氮?dú)夂蛪嚎s空氣(每一循環(huán)120s,使5%CIH組箱內(nèi)最低氧濃度至5%,然后恢復(fù)至21%,8h/d);UC組大鼠不給予任何處理。分別在實(shí)驗(yàn)第2、4、6、8w后,采用免疫組化學(xué)法檢測(cè)大鼠海馬神經(jīng)細(xì)胞ERK 1/2、c-fos蛋白表達(dá);采用原位細(xì)胞凋亡方法檢測(cè)大鼠海馬神經(jīng)細(xì)胞凋亡變化。應(yīng)用Motic醫(yī)學(xué)圖像分析系統(tǒng)對(duì)免疫組化結(jié)果ERK1/2及c-fos蛋白半定量分析,結(jié)果用積分光密度(IOD)值表示。觀察各組大鼠第2、4、6、8w大鼠海馬神經(jīng)細(xì)胞ERK 1/2、c-fos蛋白的表達(dá)和凋亡指數(shù)的變化。 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理采用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件包進(jìn)行數(shù)據(jù)分析,所得數(shù)據(jù)用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(xˉ±s)表示,組間比較采用獨(dú)立樣本T檢驗(yàn),組內(nèi)比較采用單因素方差分析,多重比較采用LSD法,以P0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 結(jié)果 1重度慢性間歇低氧對(duì)海馬神經(jīng)細(xì)胞ERK1/2蛋白表達(dá)的影響 1.1光學(xué)顯微鏡下觀察到大部分陽(yáng)性表達(dá)細(xì)胞胞漿呈棕黃色或淺黃色。各組大鼠均有陽(yáng)性表達(dá)細(xì)胞,陽(yáng)性細(xì)胞的表達(dá)程度不同。UC組可見(jiàn)散在陽(yáng)性表達(dá)細(xì)胞;5%CIH組陽(yáng)性表達(dá)細(xì)胞明顯增多,主要集中在海馬CAl區(qū)。 1.2 5%CIH組海馬CAl區(qū)神經(jīng)細(xì)胞ERK1/2蛋白表達(dá)IOD值在2、4、6、8w均顯著高于UC組(P 0.05),UC組海馬CAl區(qū)神經(jīng)細(xì)胞ERK1/2蛋白表達(dá)IOD值不同時(shí)間水平無(wú)顯著差異(P㧐0.05),5%CIH組海馬CAl區(qū)神經(jīng)細(xì)胞ERK1/2蛋白表達(dá)IOD值不同時(shí)間水平有顯著差異(P 0.05),表現(xiàn)為:ERK1/2蛋白表達(dá)IOD值隨時(shí)間的延長(zhǎng)呈先上升后下降趨勢(shì),于第6周達(dá)到高峰后下降。 2重度慢性間歇低氧對(duì)海馬神經(jīng)細(xì)胞c-fos蛋白表達(dá)的影響 2.1光學(xué)顯微鏡下觀察到大部分陽(yáng)性表達(dá)細(xì)胞胞核呈棕黃色或淺黃色,各組大鼠均有陽(yáng)性表達(dá)細(xì)胞,陽(yáng)性細(xì)胞的表達(dá)程度不同。UC組可見(jiàn)散在陽(yáng)性表達(dá)細(xì)胞;5%CIH組陽(yáng)性表達(dá)細(xì)胞明顯增多,主要集中在海馬CAl區(qū)。 2.2 5%CIH組海馬CAl區(qū)神經(jīng)細(xì)胞c-fos蛋白表達(dá)IOD值在2、4、6、8w顯著高于UC組(P 0.05),UC組海馬CAl區(qū)神經(jīng)細(xì)胞c-fos蛋白表達(dá)IOD值不同時(shí)間水平無(wú)顯著差異(P㧐0.05),5%CIH組海馬CAl區(qū)神經(jīng)細(xì)胞c-fos蛋白表達(dá)IOD值不同時(shí)間水平有顯著差異(P0.05),表現(xiàn)為:c-fos蛋白表達(dá)IOD值隨時(shí)間的延長(zhǎng)呈先上升后下降趨勢(shì),于第6周達(dá)到高峰后下降。 3重度慢性間歇低氧對(duì)海馬神經(jīng)細(xì)胞凋亡的影響 3.1光學(xué)顯微鏡下觀察到凋亡細(xì)胞形態(tài)呈圓形或橢圓形,胞核呈棕黃色或棕褐色,形態(tài)呈碎點(diǎn)狀,不規(guī)整,大小不一致,非凋亡細(xì)胞胞核被蘇木素復(fù)染呈藍(lán)色,核相對(duì)較大,形態(tài)大小較為一致。光學(xué)顯微鏡下觀察到各組大鼠神經(jīng)細(xì)胞均有凋亡, UC組可見(jiàn)散在凋亡細(xì)胞, 5%CIH組凋亡細(xì)胞明顯增多,主要分布在海馬CAl區(qū)。 3.2 5%CIH組凋亡指數(shù)在2、4、6、8w顯著高于UC組(P0.05),UC組海馬CAl區(qū)神經(jīng)細(xì)胞凋亡指數(shù)不同時(shí)間水平無(wú)顯著差異(P㧐0.05),5%CIH組海馬CAl區(qū)神經(jīng)細(xì)胞凋亡指數(shù)不同時(shí)間水平有顯著差異(P0.05),表現(xiàn)為:神經(jīng)細(xì)胞凋亡指數(shù)隨時(shí)間的延長(zhǎng)呈先上升后下降趨勢(shì),于第6周達(dá)到高峰后下降。 結(jié)論 1重度慢性間歇低氧可激活大鼠海馬神經(jīng)細(xì)胞ERK通路,同時(shí)誘導(dǎo)大鼠海馬神經(jīng)細(xì)胞凋亡。 2 ERK通路可通過(guò)介導(dǎo)大鼠海馬神經(jīng)細(xì)胞凋亡的發(fā)生,進(jìn)而導(dǎo)致重度慢性間歇低氧早期腦損害的形成。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】:河北聯(lián)合大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2011
【分類(lèi)號(hào)】:R363
【參考文獻(xiàn)】
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,本文編號(hào):1353214
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