本文關(guān)鍵詞：人CAP1蛋白真核表達(dá)及細(xì)胞定位與功能　出處：《西安交通大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版)》2016年02期 　論文類型：期刊論文

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【摘要】：目的構(gòu)建CAP1蛋白真核表達(dá)質(zhì)粒并使之在細(xì)胞內(nèi)得以表達(dá),確定CAP1蛋白在細(xì)胞中的定位及其對細(xì)胞遷移的影響。方法以HeLa細(xì)胞cDNA為模板,經(jīng)PCR獲取CAP1編碼區(qū)cDNA,將該編碼區(qū)cDNA序列插入pCMV-Myc質(zhì)粒中,構(gòu)建帶Myc標(biāo)簽的真核表達(dá)重組質(zhì)粒。重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染至293細(xì)胞中,Western blot方法檢測其在真核細(xì)胞內(nèi)的表達(dá);重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染HeLa細(xì)胞,免疫熒光法檢測其細(xì)胞內(nèi)的定位,劃痕實(shí)驗(yàn)觀察其對細(xì)胞遷移的影響。結(jié)果成功構(gòu)建了CAP1真核表達(dá)重組質(zhì)粒,并在真核細(xì)胞內(nèi)成功表達(dá),確定CAP1定位于細(xì)胞質(zhì)中,劃痕實(shí)驗(yàn)證明CAP1過表達(dá)的細(xì)胞遷移能力明顯下降。結(jié)論在真核細(xì)胞中成功表達(dá)了CAP1重組質(zhì)粒且CAP1定位于細(xì)胞質(zhì),其過表達(dá)對細(xì)胞遷移有抑制作用,為研究CAP1的生理功能奠定實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。
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【作者單位】： 石河子大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院;軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院放射與輻射醫(yī)學(xué)研究所;石河子大學(xué)醫(yī)學(xué)院;
【基金】：國家自然科學(xué)基金資助項目(No.30960093,31160183,31270894,31470827)~~
【分類號】：R3416
【正文快照】： 細(xì)胞骨架在細(xì)胞形態(tài)發(fā)生、胞質(zhì)分裂、胞吞作用、細(xì)胞遷移等諸多方面發(fā)揮作用。細(xì)胞骨架異常會誘發(fā)包括神經(jīng)退行性疾病在內(nèi)的多種人類疾病,并可影響腫瘤轉(zhuǎn)移。肌動蛋白是細(xì)胞骨架的重要組成部分,單體肌動蛋白與多聚肌動蛋白間的動態(tài)平衡在細(xì)胞骨架調(diào)控系統(tǒng)中起關(guān)鍵作用[1-2]。

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1 胡剛;李揚(yáng)秋;周羽z，

本文編號：1348404