鮑曼不動桿菌外膜蛋白OmpK的原核重組表達(dá)與純化
本文關(guān)鍵詞:鮑曼不動桿菌外膜蛋白OmpK的原核重組表達(dá)與純化 出處:《中國病原生物學(xué)雜志》2017年09期 論文類型:期刊論文
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【摘要】:目的通過分子克隆方法制備重組鮑曼不動桿菌外膜蛋白K(OmpK)并進(jìn)行純化,為進(jìn)一步研究該蛋白的免疫活性奠定基礎(chǔ)。方法采用PCR方法擴(kuò)增鮑曼不動桿菌標(biāo)準(zhǔn)菌株ATCC19606外膜蛋白K編碼基因,將該基因克隆入原核表達(dá)載體pColdI,構(gòu)建重組質(zhì)粒pColdI/OmpK。將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化至大腸埃希菌BL21,經(jīng)IPTG誘導(dǎo)表達(dá)重組蛋白,通過鎳親和層析柱進(jìn)行純化。結(jié)果 PCR擴(kuò)增獲得大小約726bp的目的基因片段,將其克隆入原核表達(dá)載體pColdI后進(jìn)行酶切和DNA測序分析,pColdI/OmpK構(gòu)建正確,重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化BL21經(jīng)IPTG誘導(dǎo)后表達(dá)目的蛋白(相對分子質(zhì)量約30×103),經(jīng)鎳親和純化得到高純度的重組OmpK。結(jié)論通過分子克隆技術(shù)使鮑曼不動桿菌OmpK蛋白在構(gòu)建的原核表達(dá)系統(tǒng)中得到高效表達(dá),并獲得了高純度的重組蛋白,為進(jìn)一步研究鮑曼不動桿菌OmpK的免疫活性奠定了基礎(chǔ)。
[Abstract]:......
【作者單位】: 川北醫(yī)學(xué)院免疫與分子生物學(xué)研究所;
【基金】:四川省教育廳重點(diǎn)項(xiàng)目(No.17ZA0166)
【分類號】:R378
【正文快照】: ***鮑曼不動桿菌為繼銅綠假單胞菌、肺炎克雷伯桿菌之后又一常見院內(nèi)感染病菌,感染對象主要為長期使用廣譜抗菌藥物和機(jī)械通氣及長期住院的慢性病患者,在院內(nèi)容易引起暴發(fā)流行,主要引起肺部感染,軟組織或傷口感染、插管相關(guān)感染、尿路感染、菌血癥和繼發(fā)性腦膜炎等病癥。鮑曼
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,本文編號:1348375
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