本文關(guān)鍵詞：人誘導性多能干細胞向表皮樣干細胞分化的初步研究　出處：《南昌大學》2011年碩士論文　論文類型：學位論文

  更多相關(guān)文章： 人誘導性多能干細胞 重編程 表皮干細胞 分化 羊膜

【摘要】：目的： 觀察人誘導性多能干細胞的體外培養(yǎng)與特性,探討人誘導性多能干細胞向表皮樣干細胞定向分化的可行性,為其作為皮膚組織工程種子細胞的新來源提供實驗基礎(chǔ)。 方法： 取已作滅活處理的CF-1小鼠胚胎成纖維細胞作飼養(yǎng)層,人誘導性多能干細胞接種于飼養(yǎng)層上,加入含堿性成纖維細胞生長因子的胚胎干細胞培養(yǎng)液進行培養(yǎng),Ⅳ型膠原酶消化法傳代,倒置顯微鏡下觀察人誘導性多能干細胞形態(tài)及生長狀況,堿性磷酸酶染色檢測,懸浮培養(yǎng)觀察擬胚體形成能力。根據(jù)并仿效人體皮膚發(fā)育規(guī)律,將人羊膜鋪布培養(yǎng)板底,消化傳代的人誘導性多能干細胞接種于其上,加入不含堿性成纖維細胞生長因子的胚胎干細胞培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。以不加羊膜作為對照組。觀察誘導后細胞形態(tài)學變化,免疫細胞化學染色法檢測β1整合素和CK19表達。 結(jié)果： 在本培養(yǎng)體系條件下培養(yǎng)的人誘導性多能干細胞形態(tài)學上呈典型的干細胞克隆狀生長,邊界清楚,細胞增殖旺盛：堿性磷酸酶檢測呈陽性表達；在無飼養(yǎng)層懸浮培養(yǎng)條件下形成擬胚體。誘導培養(yǎng)4天后在羊膜表面形成干細胞克隆,部分細胞p1整合素和CK19呈陽性表達。而對照組大量細胞死亡,未見β1整合素和CK19陽性細胞。結(jié)論： 在本培養(yǎng)體系條件下培養(yǎng)的人誘導性多能干細胞生長穩(wěn)定,其生物學特性與人胚胎干細胞相似。在羊膜誘導下人誘導性多能干細胞可定向分化為表皮樣干細胞,具有作為皮肽組織工程種子細胞新來源的潛能。為進一步誘導分化研究和其在再生醫(yī)學與皮膚組織工程中的應用奠定了實驗基礎(chǔ)。
[Abstract]:Objective:
【學位授予單位】：南昌大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2011
【分類號】：R329

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本文編號：1342498