本文關(guān)鍵詞：人誘導(dǎo)性多能干細(xì)胞向表皮樣干細(xì)胞分化的初步研究　出處：《南昌大學(xué)》2011年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

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【摘要】：目的： 觀察人誘導(dǎo)性多能干細(xì)胞的體外培養(yǎng)與特性,探討人誘導(dǎo)性多能干細(xì)胞向表皮樣干細(xì)胞定向分化的可行性,為其作為皮膚組織工程種子細(xì)胞的新來源提供實驗基礎(chǔ)。 方法： 取已作滅活處理的CF-1小鼠胚胎成纖維細(xì)胞作飼養(yǎng)層,人誘導(dǎo)性多能干細(xì)胞接種于飼養(yǎng)層上,加入含堿性成纖維細(xì)胞生長因子的胚胎干細(xì)胞培養(yǎng)液進(jìn)行培養(yǎng),Ⅳ型膠原酶消化法傳代,倒置顯微鏡下觀察人誘導(dǎo)性多能干細(xì)胞形態(tài)及生長狀況,堿性磷酸酶染色檢測,懸浮培養(yǎng)觀察擬胚體形成能力。根據(jù)并仿效人體皮膚發(fā)育規(guī)律,將人羊膜鋪布培養(yǎng)板底,消化傳代的人誘導(dǎo)性多能干細(xì)胞接種于其上,加入不含堿性成纖維細(xì)胞生長因子的胚胎干細(xì)胞培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。以不加羊膜作為對照組。觀察誘導(dǎo)后細(xì)胞形態(tài)學(xué)變化,免疫細(xì)胞化學(xué)染色法檢測β1整合素和CK19表達(dá)。 結(jié)果： 在本培養(yǎng)體系條件下培養(yǎng)的人誘導(dǎo)性多能干細(xì)胞形態(tài)學(xué)上呈典型的干細(xì)胞克隆狀生長,邊界清楚,細(xì)胞增殖旺盛：堿性磷酸酶檢測呈陽性表達(dá)；在無飼養(yǎng)層懸浮培養(yǎng)條件下形成擬胚體。誘導(dǎo)培養(yǎng)4天后在羊膜表面形成干細(xì)胞克隆,部分細(xì)胞p1整合素和CK19呈陽性表達(dá)。而對照組大量細(xì)胞死亡,未見β1整合素和CK19陽性細(xì)胞。結(jié)論： 在本培養(yǎng)體系條件下培養(yǎng)的人誘導(dǎo)性多能干細(xì)胞生長穩(wěn)定,其生物學(xué)特性與人胚胎干細(xì)胞相似。在羊膜誘導(dǎo)下人誘導(dǎo)性多能干細(xì)胞可定向分化為表皮樣干細(xì)胞,具有作為皮肽組織工程種子細(xì)胞新來源的潛能。為進(jìn)一步誘導(dǎo)分化研究和其在再生醫(yī)學(xué)與皮膚組織工程中的應(yīng)用奠定了實驗基礎(chǔ)。
[Abstract]:Objective:
【學(xué)位授予單位】：南昌大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2011
【分類號】：R329

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本文編號：1342498