發(fā)布時(shí)間：2017-12-23 20:37

  本文關(guān)鍵詞：低氧對大鼠胃腸線粒體呼吸鏈復(fù)合物及相關(guān)活性物質(zhì)表達(dá)的影響　出處：《西北師范大學(xué)》2015年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

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【摘要】：機(jī)體暴露于高海拔低氧條件下,可產(chǎn)生各種代償反應(yīng)。線粒體是細(xì)胞呼吸的主要場所和氧化磷酸化的重要結(jié)構(gòu),在維持細(xì)胞正常的能量代謝、離子轉(zhuǎn)運(yùn)等功能方面具有重要作用且對缺血、缺氧也較為敏感。模擬5000m海拔低氧可引起中樞或外周調(diào)節(jié)因子變化及胃腸道黏膜屏障損傷,其消化、吸收、分泌等功能受到一定的影響。低氧可引起相關(guān)活性物質(zhì)的改變,胃腸組織線粒體氧化應(yīng)激平衡失調(diào),產(chǎn)生一系列代償性功能改變,對低氧應(yīng)答和適應(yīng)機(jī)制具有重要研究意義。以雄性健康Wister大鼠為材料,采用低壓艙模擬5000m海拔低氧的方法,低氧暴露分為4h組、24h組、72h組(每組n=7)。動(dòng)物置于低氧艙內(nèi),以蘭州(海拔1500米)的常氧環(huán)境作為對照組。低氧處理后將動(dòng)物移出并處死、取血清、胃和小腸組織分別進(jìn)行線粒體提取等處理。運(yùn)用分光光度法測定不同時(shí)相低氧處理對胃及小腸組織線粒體呼吸鏈復(fù)合物酶Ⅰ(CⅠ,NADH脫氫酶)、Ⅱ(CⅡ,琥珀酸脫氫酶)、Ⅲ(CⅢ,細(xì)胞色素c還原酶)、Ⅳ(CⅣ,細(xì)胞色素c氧化酶)活性、超氧化物歧化酶(SOD)活性及脂類過氧化產(chǎn)物丙二醛(MDA)含量,運(yùn)用免疫組織化學(xué)法檢測其組織中低氧誘導(dǎo)因子1α(HIF-1α)、Bax蛋白、Bcl-2蛋白、腫瘤壞死因子-α(TNF-α)及c-fos蛋白表達(dá)變化、測定血清SOD活性及MDA含量。結(jié)果1.模擬5000m海拔低氧處理4h后,大鼠胃和小腸組織中線粒體呼吸鏈酶復(fù)合物CⅠ、CⅡ、CⅢ和CⅣ活性顯著降低(P0.05或P0.01),胃組織CⅣ活性為對照的59.95%,降低最顯著,而小腸組織CⅠ活性降低最顯著,為對照組的63.29%;低氧24h,復(fù)合物活性低于對照組(P0.01或P0.05),高于處理4h組(P0.01或P0.05)有逐漸回升的趨勢;72h之后與對照組無明顯差異(P0.05)。急性低氧引起胃和小腸組織線粒體呼吸鏈復(fù)合物酶活性降低,可引起細(xì)胞代謝降低,但亞急性代謝趨于回升。2.低氧處理4h、24h、72h后胃和小腸組織線粒體SOD活性均顯著降低(P0.05或P0.01);胃腸組織線粒體MDA含量在低氧組均高于對照組(P0.05或P0.01),低氧24h時(shí)增加最為顯著(P0.01)。而血清SOD活性顯著降低(P0.01);低氧24h時(shí)降低最為顯著(P0.01),MDA含量在0-72h低氧組均高于對照組(P0.05或P0.01)。低氧引起自由基水平變化可對細(xì)胞代謝產(chǎn)生不利影響。3.低氧處理4h大鼠小腸組織中HIF-1α、Bax陽性表達(dá)高于對照組(P0.01),而Bcl-2低于對照組(P0.01);24h后,HIF-1α陽性表達(dá)組是對照組的3.8倍(P0.01);Bax陽性表達(dá)組是對照的2.15倍(P0.01);Bcl-2低于對照組,是對照的70.56%(P0.01),Bcl-2/Bax的值也降低至最小。低氧72h HIF-1α、Bax陽性表達(dá)較24h有不同程度降低(P0.01),而Bcl-2表達(dá)高于24h組(P0.05)。24h為低氧應(yīng)答的重要時(shí)段,HIF-1α表達(dá)升高可誘導(dǎo)機(jī)體的低氧應(yīng)答和適應(yīng)機(jī)制,其與Bax的表達(dá)呈正相關(guān),與Bcl-2的表達(dá)呈負(fù)相關(guān),提示其可能參與細(xì)胞促凋亡反應(yīng)。4.低氧4h,大鼠小腸組織中TNF-α陽性表達(dá)顯著高于對照組(P0.01),是對照組的1.95倍;c-fos表達(dá)顯著高于對照組(P0.01),是對照組的2.33倍;低氧24h比4h有一定程度降低,72h明顯低于低氧24h組(P0.01),但仍高于對照組(P0.05)。TNF-α表達(dá)升高,其可能為小腸組織中急性低氧反應(yīng)的細(xì)胞因子參與低氧應(yīng)激下的炎性反應(yīng)。結(jié)論1.低氧抑制胃和小腸組織線粒體呼吸鏈復(fù)合物酶活性。2.胃、小腸組織及血清中SOD活性顯著降低及脂類過氧化產(chǎn)物MDA含量在低氧應(yīng)激下顯著升高。3.低氧引起小腸組織中HIF-1α、Bax蛋白表達(dá)增加,Bcl-2蛋白表達(dá)減少。4.低氧引起小腸組織TNF-α、c-fos、表達(dá)呈不同程度增加。模擬5000米低氧4h為抑制呼吸鏈復(fù)合物活性和自由基代謝增加的重要時(shí)段;而24h為HIF-1α低氧應(yīng)答和細(xì)胞凋亡反應(yīng)的重要時(shí)期。72h低氧效應(yīng)趨于減弱,組織機(jī)能呈逐漸恢復(fù)的趨勢。
【學(xué)位授予單位】：西北師范大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R363

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