本文關鍵詞：低氧對大鼠胃腸線粒體呼吸鏈復合物及相關活性物質(zhì)表達的影響　出處：《西北師范大學》2015年碩士論文　論文類型：學位論文

  更多相關文章： 模擬5000m海拔低氧 大鼠胃腸組織 呼吸鏈酶復合物 低氧誘導因子-1α(HIF-1α) 腫瘤壞死因子-α(TNF-α)

【摘要】：機體暴露于高海拔低氧條件下,可產(chǎn)生各種代償反應。線粒體是細胞呼吸的主要場所和氧化磷酸化的重要結(jié)構(gòu),在維持細胞正常的能量代謝、離子轉(zhuǎn)運等功能方面具有重要作用且對缺血、缺氧也較為敏感。模擬5000m海拔低氧可引起中樞或外周調(diào)節(jié)因子變化及胃腸道黏膜屏障損傷,其消化、吸收、分泌等功能受到一定的影響。低氧可引起相關活性物質(zhì)的改變,胃腸組織線粒體氧化應激平衡失調(diào),產(chǎn)生一系列代償性功能改變,對低氧應答和適應機制具有重要研究意義。以雄性健康Wister大鼠為材料,采用低壓艙模擬5000m海拔低氧的方法,低氧暴露分為4h組、24h組、72h組(每組n=7)。動物置于低氧艙內(nèi),以蘭州(海拔1500米)的常氧環(huán)境作為對照組。低氧處理后將動物移出并處死、取血清、胃和小腸組織分別進行線粒體提取等處理。運用分光光度法測定不同時相低氧處理對胃及小腸組織線粒體呼吸鏈復合物酶Ⅰ(CⅠ,NADH脫氫酶)、Ⅱ(CⅡ,琥珀酸脫氫酶)、Ⅲ(CⅢ,細胞色素c還原酶)、Ⅳ(CⅣ,細胞色素c氧化酶)活性、超氧化物歧化酶(SOD)活性及脂類過氧化產(chǎn)物丙二醛(MDA)含量,運用免疫組織化學法檢測其組織中低氧誘導因子1α(HIF-1α)、Bax蛋白、Bcl-2蛋白、腫瘤壞死因子-α(TNF-α)及c-fos蛋白表達變化、測定血清SOD活性及MDA含量。結(jié)果1.模擬5000m海拔低氧處理4h后,大鼠胃和小腸組織中線粒體呼吸鏈酶復合物CⅠ、CⅡ、CⅢ和CⅣ活性顯著降低(P0.05或P0.01),胃組織CⅣ活性為對照的59.95%,降低最顯著,而小腸組織CⅠ活性降低最顯著,為對照組的63.29%;低氧24h,復合物活性低于對照組(P0.01或P0.05),高于處理4h組(P0.01或P0.05)有逐漸回升的趨勢;72h之后與對照組無明顯差異(P0.05)。急性低氧引起胃和小腸組織線粒體呼吸鏈復合物酶活性降低,可引起細胞代謝降低,但亞急性代謝趨于回升。2.低氧處理4h、24h、72h后胃和小腸組織線粒體SOD活性均顯著降低(P0.05或P0.01);胃腸組織線粒體MDA含量在低氧組均高于對照組(P0.05或P0.01),低氧24h時增加最為顯著(P0.01)。而血清SOD活性顯著降低(P0.01);低氧24h時降低最為顯著(P0.01),MDA含量在0-72h低氧組均高于對照組(P0.05或P0.01)。低氧引起自由基水平變化可對細胞代謝產(chǎn)生不利影響。3.低氧處理4h大鼠小腸組織中HIF-1α、Bax陽性表達高于對照組(P0.01),而Bcl-2低于對照組(P0.01);24h后,HIF-1α陽性表達組是對照組的3.8倍(P0.01);Bax陽性表達組是對照的2.15倍(P0.01);Bcl-2低于對照組,是對照的70.56%(P0.01),Bcl-2/Bax的值也降低至最小。低氧72h HIF-1α、Bax陽性表達較24h有不同程度降低(P0.01),而Bcl-2表達高于24h組(P0.05)。24h為低氧應答的重要時段,HIF-1α表達升高可誘導機體的低氧應答和適應機制,其與Bax的表達呈正相關,與Bcl-2的表達呈負相關,提示其可能參與細胞促凋亡反應。4.低氧4h,大鼠小腸組織中TNF-α陽性表達顯著高于對照組(P0.01),是對照組的1.95倍;c-fos表達顯著高于對照組(P0.01),是對照組的2.33倍;低氧24h比4h有一定程度降低,72h明顯低于低氧24h組(P0.01),但仍高于對照組(P0.05)。TNF-α表達升高,其可能為小腸組織中急性低氧反應的細胞因子參與低氧應激下的炎性反應。結(jié)論1.低氧抑制胃和小腸組織線粒體呼吸鏈復合物酶活性。2.胃、小腸組織及血清中SOD活性顯著降低及脂類過氧化產(chǎn)物MDA含量在低氧應激下顯著升高。3.低氧引起小腸組織中HIF-1α、Bax蛋白表達增加,Bcl-2蛋白表達減少。4.低氧引起小腸組織TNF-α、c-fos、表達呈不同程度增加。模擬5000米低氧4h為抑制呼吸鏈復合物活性和自由基代謝增加的重要時段;而24h為HIF-1α低氧應答和細胞凋亡反應的重要時期。72h低氧效應趨于減弱,組織機能呈逐漸恢復的趨勢。
【學位授予單位】：西北師范大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R363

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