本文關(guān)鍵詞：體外持續(xù)傳代引起小鼠透明軟骨細(xì)胞表型和細(xì)胞外基質(zhì)平衡變化的研究

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【摘要】：目的研究體外持續(xù)傳代對(duì)透明軟骨細(xì)胞形態(tài)表型、分化特性及細(xì)胞外基質(zhì)(ECM)平衡狀態(tài)的影響。方法酶消化法分離培養(yǎng)小鼠透明軟骨細(xì)胞,連續(xù)傳代至第5代。采用蘇木精-伊紅染色觀察軟骨細(xì)胞的形態(tài)改變,采用半定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)分析軟骨細(xì)胞特異性基因、常規(guī)基因、基質(zhì)金屬蛋白酶家族(MMPs)和基質(zhì)金屬蛋白酶組織抑制劑家族(TIMPs)m RNA水平的變化,采用明膠酶譜分析鑒定軟骨細(xì)胞明膠酶活性的改變。結(jié)果隨著傳代次數(shù)增加,軟骨細(xì)胞形態(tài)由圓形或多邊形變?yōu)殚L(zhǎng)梭形,其特異性基因的表達(dá)量明顯下降(P0.05),至第5代已基本喪失。相比而言,常規(guī)基因的下調(diào)并不明顯。MMPs和TIMPs均有下調(diào)(P0.05),僅MMP-1和TIMP-1改變的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);MMPs/TIMPs比值隨傳代發(fā)生紊亂。在蛋白質(zhì)水平,隨傳代次數(shù)增加,明膠酶的活性下降,P4和P5代細(xì)胞下調(diào)顯著(P0.05)。結(jié)論軟骨細(xì)胞在體外培養(yǎng)過程中,其特異性表型特征會(huì)隨傳代次數(shù)增加而逐漸喪失,軟骨細(xì)胞發(fā)生反分化而表現(xiàn)出纖維化趨勢(shì)。同時(shí),ECM的平衡狀態(tài)被打破,合成與分解代謝紊亂。在利用軟骨細(xì)胞進(jìn)行相關(guān)疾病的研究或軟骨組織工程學(xué)實(shí)驗(yàn)時(shí),應(yīng)選用前3代的軟骨細(xì)胞。
【作者單位】： 口腔疾病研究國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室華西口腔醫(yī)院(四川大學(xué));
【基金】：口腔疾病研究國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室(四川大學(xué))自主研究課題(SKLOD201527) 四川大學(xué)青年教師科研啟動(dòng)基金(2015SCU-11013);四川大學(xué)大學(xué)生創(chuàng)新創(chuàng)業(yè)訓(xùn)練計(jì)劃(201610610374)~~
【分類號(hào)】：R329.2
【正文快照】： 關(guān)節(jié)軟骨的修復(fù)是骨科臨床治療的難題。生理情況下,成熟軟骨細(xì)胞處于相對(duì)靜止的狀態(tài),增殖與合成軟骨特異性細(xì)胞外基質(zhì)(extracellular matrix,ECM)的能力極其有限,故較小的創(chuàng)傷就會(huì)造成嚴(yán)重的軟骨損傷和變性,導(dǎo)致關(guān)節(jié)功能障礙[1]。組織工程為修復(fù)損傷和疾病組織提供新的治療方

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 何清義,李起鴻,許建中,楊柳;轉(zhuǎn)化軟骨細(xì)胞與正常軟骨細(xì)胞的生物特性比較[J];中國(guó)臨床康復(fù);2002年10期

2 楊物鵬,許建中;軟骨細(xì)胞培養(yǎng)及其調(diào)控[J];中國(guó)矯形外科雜志;2000年08期

3 楊彩榮;軟骨細(xì)胞培養(yǎng)及其調(diào)控因素研究進(jìn)展[J];國(guó)外醫(yī)學(xué).耳鼻咽喉科學(xué)分冊(cè);2002年03期

4 張文濤,盧世璧,黃英,李楠;軟骨細(xì)胞形態(tài)、表型與胞間通訊研究[J];中國(guó)修復(fù)重建外科雜志;2002年05期

5 K-Y李,S-G樸,D.申,J-C樸,I-S李;用一種細(xì)胞凹入技術(shù)進(jìn)行軟骨細(xì)胞剛度的測(cè)量(英文)[J];大連大學(xué)學(xué)報(bào);2004年02期

6 張文濤,盧世璧;軟骨細(xì)胞形態(tài)、表型與胞間通訊的研究(英文)[J];中國(guó)臨床康復(fù);2004年14期

7 張惠珍,王樹軍,柳子星,李美星,王穎,張勇,陳影,葛海良;豬軟骨細(xì)胞同種異體移植的免疫排斥機(jī)制[J];上海第二醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào);2005年02期

8 張全有;陳維毅;衛(wèi)小春;李春江;劉琳琳;;軟骨細(xì)胞黏彈性及恢復(fù)變形與年齡相關(guān)性研究[J];力學(xué)學(xué)報(bào);2009年06期

9 郭志紅;體外再生移植用軟骨[J];國(guó)外科技動(dòng)態(tài);2000年12期

10 何清義,李起鴻;間歇性液態(tài)壓力和連續(xù)灌注系統(tǒng)下的軟骨細(xì)胞培養(yǎng)[J];中華骨科雜志;2000年09期

中國(guó)重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫 前3條

1 周紅輝;萬福生;;人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞分化為軟骨細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)研究[A];華東六省一市生物化學(xué)與分子生物學(xué)學(xué)會(huì)2006年學(xué)術(shù)交流會(huì)論文集[C];2006年

2 趙陽;柳子星;王穎;張惠珍;王樹軍;葛海良;;大鼠IL—10真核表達(dá)載體在軟骨細(xì)胞中的瞬時(shí)表達(dá)[A];中國(guó)免疫學(xué)會(huì)第四屆學(xué)術(shù)大會(huì)會(huì)議議程及論文摘要集[C];2002年

3 張繼帥;郝振明;譚曉紅;王友亮;毛春明;呂婭歆;程萱;楊曉;;軟骨細(xì)胞特異性Smad4基因剔除導(dǎo)致小鼠長(zhǎng)骨發(fā)育異常[A];中國(guó)的遺傳學(xué)研究——中國(guó)遺傳學(xué)會(huì)第七次代表大會(huì)暨學(xué)術(shù)討論會(huì)論文摘要匯編[C];2003年

中國(guó)重要報(bào)紙全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 吳一福;西安交大：用人胎兒軟骨細(xì)胞培養(yǎng)成功軟骨組織工程種子細(xì)胞[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2006年

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前6條

1 韓一生;重組PcDNA3-hBMP3轉(zhuǎn)染兔關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞和對(duì)其增殖的影響[D];第四軍醫(yī)大學(xué);1999年

2 楊曦;轉(zhuǎn)錄共抑制因子MINT對(duì)軟骨細(xì)胞分化的調(diào)控作用機(jī)理的研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2005年

3 王艷梅;人VEGF_(165)轉(zhuǎn)基因組織工程軟骨的實(shí)驗(yàn)研究[D];中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2009年

4 邢東明;低強(qiáng)度壓應(yīng)力對(duì)于體外培養(yǎng)的軟骨細(xì)胞代謝的影響[D];中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué);1999年

5 周堅(jiān);IHH和FGF8在脊椎動(dòng)物肢翼遠(yuǎn)端骨骼元件發(fā)育中的功能研究[D];上海交通大學(xué);2008年

6 羅劍;G蛋白偶聯(lián)受體GPR48在小鼠骨發(fā)育中的功能研究[D];湖南師范大學(xué);2007年

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 趙海洋;生長(zhǎng)因子基因在損傷兔關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞中的表達(dá)[D];蚌埠醫(yī)學(xué)院;2013年

2 史光華;miR-1對(duì)軟骨細(xì)胞增殖分化的影響[D];山西醫(yī)科大學(xué);2013年

3 尹寶英;蠶絲負(fù)載軟骨細(xì)胞體外構(gòu)建組織工程軟骨[D];西北農(nóng)林科技大學(xué);2005年

4 周紅輝;人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞分化為軟骨細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)研究[D];南昌大學(xué);2006年

5 趙斌;軟骨細(xì)胞擴(kuò)增及其與液態(tài)凝膠構(gòu)建組織工程化軟骨的實(shí)驗(yàn)研究[D];中國(guó)人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院;2007年

6 尹敏霞;軟骨細(xì)胞規(guī)模擴(kuò)增及其與beta-TCP和液態(tài)膠原復(fù)合構(gòu)建軟骨的實(shí)驗(yàn)研究[D];北京林業(yè)大學(xué);2006年

7 金琪;小鼠軟骨內(nèi)成骨過程中軟骨細(xì)胞發(fā)育與淋巴管生長(zhǎng)的研究[D];華中師范大學(xué);2015年

8 趙可慶;基因芯片篩選骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞與軟骨細(xì)胞的差異表達(dá)基因[D];大連醫(yī)科大學(xué);2008年

9 馬進(jìn)峰;軟骨生長(zhǎng)因子（CDGF）對(duì)培養(yǎng)兔軟骨細(xì)胞的作用及其與IGF-I的協(xié)同效果[D];青島大學(xué);2001年

10 馮穎;人端粒酶反轉(zhuǎn)錄酶基因（hTERT）構(gòu)建永生化軟骨細(xì)胞可行性的研究[D];吉林大學(xué);2007年

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本文編號(hào)：1176979