本文關(guān)鍵詞：人蛻膜組織子宮內(nèi)膜干細(xì)胞的分離、培養(yǎng)及鑒定

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【摘要】：目的:研究人蛻膜組織中子宮內(nèi)膜干細(xì)胞(endometrial stem cells,EnSCs)的分離、培養(yǎng)及鑒定方法。方法:取人工流產(chǎn)患者的蛻膜組織,用胰酶和II型膠原酶消化分離子宮內(nèi)膜細(xì)胞,計數(shù)后,以極低密度接種于10 cm培養(yǎng)皿,分離單克隆貼壁細(xì)胞。倒置顯微鏡觀察EnSCs形態(tài)變化及克隆形成情況;CCK-8法繪制EnSCs生長曲線,計算倍增時間;流式細(xì)胞儀分析EnSCs細(xì)胞周期及表面抗原CD29、CD31、CD34、CD44、CD45、CD73、CD90、CD105、CD146表達(dá)情況。結(jié)果:EnSCs呈長梭形,成纖維細(xì)胞樣,可見粗細(xì)不等的胞質(zhì)突起,增殖至80-90%呈漩渦狀生長,其克隆形成率分別為3.91%和9.14%;EnSCs生長曲線呈"S"型,接種48 h至60 h后進(jìn)入對數(shù)生長期,于第9天達(dá)到平臺期,倍增時間為37-52 h;流式細(xì)胞儀測定EnSCs表面抗原CD29(99.13%),CD44(97.39%),CD73(99.68%),CD90(96.76%),CD105(89.64%),CD146(77.96%)呈陽性表達(dá),而CD31(1.30%),CD34(0.68%),CD45(1.26%)呈陰性表達(dá),有61.79%的細(xì)胞處于G0/G1期,22.37%的細(xì)胞處于S+G2/M期。結(jié)論:采用組織消化法分離單克隆貼壁的子宮內(nèi)膜細(xì)胞,能夠獲得純化的EnSCs。
【作者單位】： 廣州軍區(qū)廣州總醫(yī)院婦產(chǎn)科;廣州中醫(yī)藥大學(xué);
【關(guān)鍵詞】： 子宮內(nèi)膜干細(xì)胞 細(xì)胞表面標(biāo)記抗原 分離 鑒定
【分類號】：R329.2
【正文快照】： 前言 研究認(rèn)為,人子宮內(nèi)膜功能層和基底層中存在子宮內(nèi)膜干細(xì)胞(endometrial stem cells ,En SCs)[1],En SCs與子宮內(nèi)膜的修復(fù)、子宮內(nèi)膜異位癥、子宮內(nèi)膜息肉等[2,3]有明顯的相關(guān)性。另外,En SCs在子宮內(nèi)膜重建、盆腔臟器脫垂、膀胱組織修復(fù)等組織修復(fù)已有廣泛的研究[4,5],

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10 王s，

本文編號：1103597