本文關(guān)鍵詞：全反式視黃酸通過RARα抑制缺氧缺糖引起的原代神經(jīng)元凋亡

  更多相關(guān)文章： 全反式視黃酸 缺氧缺糖損傷 原代神經(jīng)元 轉(zhuǎn)錄生長(zhǎng)因子β 含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-

【摘要】：目的 :探討全反式視黃酸(all-trans retinoic acid,ATRA)是否能夠抑制缺氧缺糖損傷(oxygen and glucose-deprivation,OGD)誘導(dǎo)的原代神經(jīng)元凋亡。方法 :采用原代神經(jīng)元作為研究對(duì)象,分為對(duì)照組、OGD組、OGD+ATRA組;體外分離培養(yǎng)原代神經(jīng)元,用神經(jīng)元特異性烯醇化酶(neuron-specific enolase,NSE)鑒定神經(jīng)元;倒置顯微鏡觀察OGD損傷前后細(xì)胞形態(tài)變化;流式細(xì)胞技術(shù)研究OGD損傷后各組原代神經(jīng)元凋亡水平;Real-time PCR檢測(cè)視黃酸核受體α(retinoic acid receptor alpha,RARα)、轉(zhuǎn)錄生長(zhǎng)因子β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)、轉(zhuǎn)錄生長(zhǎng)因子β2(transforming growth factor-β2,TGF-β2)、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-3(cysteinyl aspartate specific proteinase,Caspase-3)mRNA表達(dá)水平;Western blot印跡檢測(cè)RARα、TGF-β、Caspase-3蛋白表達(dá)水平。結(jié)果 :成功培養(yǎng)原代神經(jīng)元;原代神經(jīng)元OGD損傷后,倒置顯微鏡觀察發(fā)現(xiàn)OGD組死亡的原代神經(jīng)元較OGD+ATRA組明顯增多,細(xì)胞更加雜亂;流式細(xì)胞計(jì)數(shù)發(fā)現(xiàn)OGD+ATRA組(26.11±2.96)%細(xì)胞凋亡率較OGD組(52.14±5.23)%明顯降低(P=0.025);OGD+ATRA組RARαmRNA表達(dá)水平(1.52±0.43)和蛋白表達(dá)水平(0.22±0.02)較OGD組的m RNA表達(dá)水平(0.49±013)和蛋白表達(dá)水平(0.10±0.02)均明顯增高(P=0.006,P=0.005),而OGD+ATRA組TGF-β1、TGF-β2 m RNA表達(dá)水平(0.45±0.10,0.41±0.08)分別較OGD組(0.81±0.15,0.98±0.15)明顯降低(P=0.034,P=0.018),而且OGD+ATRA組TGF-β、Caspase-3蛋白表達(dá)水平(0.22±0.04,0.18±0.03)分別較OGD組(0.39±0.05,0.47±0.06)也明顯降低(P=0.016,P=0.002),OGD+ATRA組(1.08±0.49)與OGD組(1.00±0.15)Caspase-3 m RNA表達(dá)水平無明顯差異(P=0.148)。結(jié)論 :ATRA可以激活其受體RARα進(jìn)而下調(diào)TGF-β,抑制凋亡因子Caspase-3的表達(dá),最終抑制OGD損傷引起的原代神經(jīng)元凋亡。
【作者單位】： 重慶醫(yī)科大學(xué)附屬兒童醫(yī)院營(yíng)養(yǎng)研究中心兒童發(fā)育疾病研究教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室認(rèn)知發(fā)育與學(xué)習(xí)記憶障礙轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)重慶市重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室兒科學(xué)重慶市重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【關(guān)鍵詞】： 全反式視黃酸 缺氧缺糖損傷 原代神經(jīng)元 轉(zhuǎn)錄生長(zhǎng)因子β 含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(編號(hào):81161120498、81100454、81100476)
【分類號(hào)】：R338
【正文快照】： 維生素A(vitamin A,VA)在一系列重要的生物學(xué)過程中扮演著重要的角色,包括視覺、繁殖、生長(zhǎng)和發(fā)育[1]。VA的生物學(xué)效應(yīng)主要以其活性代謝物視黃酸(retinoic acid,RA)發(fā)揮作用,RA通過激活其核受體視黃酸受體(retinoic acid receptors,RARs)或視黃酸X受體(retinoid-X receptors,R，

本文編號(hào)：1103877