本研究為了研制一種多重PCR檢測試劑盒,用于對腸道致病性大腸埃希氏菌(Enteropathogenic Escherichia coli,EPEC)、產(chǎn)志賀毒素大腸埃希氏菌(Shigatoxin-producing E. coli,STEC)和腸道出血性大腸埃希氏菌(Enterohemorrhagic E. coli,EHEC)3種DEC(Diarrheagenic E. coli,DEC)的快速檢測。優(yōu)化所涉及的多重PCR檢測體系和構(gòu)建相應(yīng)的檢測試劑盒,其中的主要檢測試劑采用凍干工藝,評價(jià)該試劑盒的檢測特異性、靈敏度、重復(fù)性以及保質(zhì)期。結(jié)果表明,本研究成功建立了針對于3種DEC的檢測體系EP和檢測體系ST;3種DEC標(biāo)準(zhǔn)菌株和分離菌株均出現(xiàn)明顯的目標(biāo)基因條帶,而其他種類DEC標(biāo)準(zhǔn)菌株和分離菌株均未出現(xiàn)目標(biāo)基因條帶;該試劑盒檢測管EP和檢測管ST的檢出限分別可達(dá)到1.5×103 cfu/mL和2.1×103cfu/mL,且二者檢測重復(fù)率均為100%;該試劑盒可在4℃條件下保存12個(gè)月,也可在42℃環(huán)境運(yùn)輸120h,期間其檢測效力不受影響。本研究研制的試劑盒性能好,檢測結(jié)果穩(wěn)定、可靠,適...

【文章頁數(shù)】：9 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 菌株
    1.2 主要試劑與儀器
    1.3 方法
        1.3.1 多重PCR檢測體系建立
        1.3.2 試劑盒制備
        1.3.3 DNA樣品制備
        1.3.4 特異性試驗(yàn)
        1.3.5 靈敏度試驗(yàn)
        1.3.6 重復(fù)性試驗(yàn)
        1.3.7 保質(zhì)期驗(yàn)證
2 結(jié)果與討論
    2.1 多重PCR檢測體系建立
    2.2 特異性試驗(yàn)
    2.3 靈敏度試驗(yàn)
    2.4 重復(fù)性驗(yàn)證
    2.5 保質(zhì)期驗(yàn)證
3 結(jié)論



本文編號：3766337