本研究目的在于獲得維生素K₂優(yōu)勢突變株,并利用響應(yīng)面設(shè)計優(yōu)化發(fā)酵培養(yǎng)基進(jìn)一步提高其產(chǎn)量。采取常壓室溫等離子體誘變技術(shù)結(jié)合結(jié)構(gòu)類似物抗性初篩、24孔板發(fā)酵復(fù)篩,對納豆芽孢桿菌進(jìn)行誘變選育,并應(yīng)用Box-Behnken設(shè)計對發(fā)酵培養(yǎng)基進(jìn)行優(yōu)化。通過ARTP誘變選育得到一株維生素K₂優(yōu)勢突變株,維生素K₂產(chǎn)量較初始菌株提高了3.23倍。Box-Behnken實驗優(yōu)化后,最佳值為K₂HPO₄（0.69 g/L）,甘油（66.01 g/L）和酵母粉（25.12 g/L）,發(fā)酵后維生素K₂產(chǎn)量較優(yōu)化前提高了56.7%。通過ARPT技術(shù)誘變選育出一株維生素K₂優(yōu)勢突變株,采用響應(yīng)面法優(yōu)化發(fā)酵培養(yǎng)基。實驗結(jié)果表明,突變株具有潛在的生產(chǎn)應(yīng)用價值,建立的育種方法也可為其他工業(yè)微生物的選育提供有益的參考,對提高人們的健康水平具有十分重要的意義。 

【文章頁數(shù)】：9 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 實驗材料
        1.1.1 實驗菌種
        1.1.2 培養(yǎng)基
        1.1.3 主要儀器
        1.1.4 主要試劑
    1.2 實驗方法
        1.2.1 ARTP誘變
        1.2.2 存活率和正突變率的計算
        1.2.3 突變株的篩選方法
        1.2.4 維生素K2含量測定
        1.2.5 遺傳穩(wěn)定性驗證
        1.2.6 碳氮源、無機(jī)鹽篩選以及中心值確定
        1.2.7 Box-Behnken中心組合實驗設(shè)計
2 結(jié)果與分析
    2.1 ARTP誘變
        2.1.1 ARTP誘變致死率以及正突變率
        2.1.2 ARTP誘變處理后得到的優(yōu)勢菌株的產(chǎn)量及遺傳穩(wěn)定性
    2.2 碳源、氮源、無機(jī)鹽篩選以及中心值確定
    2.3 響應(yīng)面法優(yōu)化回歸模型的建立及其分析
3 結(jié)語


【參考文獻(xiàn)】：
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