熒光光譜法測定大蒜中三種含硫氨基酸與BSA間的相互作用
發(fā)布時間：2022-01-23 17:55
大蒜中的含硫氨基酸,如脫氧蒜氨酸（SAC）、蒜氨酸（SACS）、 S-烯丙基巰基半胱氨酸（SAMC）,具有抗腫瘤、抗氧化等多種生理、藥理活性,這些活性應(yīng)當(dāng)與上述含硫氨基酸和存在于生物體內(nèi)的蛋白質(zhì)等生物大分子之間的相互作用有直接關(guān)系。為探明其關(guān)系,本文以牛血清蛋白（BSA）為模型蛋白,運用熒光光譜法和紫外吸收光譜法,研究了pH 7.40的Tris-HCl緩沖溶液中,大蒜中SAC, SACS, SAMC與BSA的相互作用。采用熒光分光光度計,以280 nm為激發(fā)波長,掃描300～400 nm的熒光發(fā)射光譜;采用紫外分光光度計,掃描SAMC的300～400 nm紫外吸收光譜。熒光光譜和紫外吸收光譜結(jié)果分析表明:BSA與SAC, SACS的猝滅類型是動態(tài)猝滅。BSA與SAMC的猝滅類型是靜態(tài)猝滅,在298和310 K下兩者的結(jié)合常數(shù)分別為6.18×103和5.54×103 L·mol-1,結(jié)合作用較強;對應(yīng)溫度下BSA與SAMC均近似為1個結(jié)合位點,可形成1∶1的復(fù)合物,推斷其在生物體內(nèi)能被較好的儲存與轉(zhuǎn)運;兩者的結(jié)合距離為1....
【文章來源】：光譜學(xué)與光譜分析. 2020,40(11)北大核心EISCICSCD
【文章頁數(shù)】：6 頁
【部分圖文】：
不同濃度SACS, SAC, SAMC與BSA相互作用的熒光發(fā)射光譜
大蒜(Allium sativum L., 又稱為葫蒜、 葫、 獨蒜等), 富含含硫氨基酸, 如蒜氨酸(S-allyl cysteine sulfoxid, SACS)、 脫氧蒜氨酸(S-allyl cysteine, SAC)、 S-烯丙基巰基半胱氨酸(S-allyl mercapto cysteine, SAMC; 見圖1)等, 它們具有清除自由基、 抗糖尿病等多種功效。 大蒜的保健、 藥用等生物學(xué)功能, 應(yīng)當(dāng)同這些含硫氨基酸和存在于生物體內(nèi)的蛋白質(zhì)等生物大分子之間的相互作用有直接關(guān)系。 藥物分子進(jìn)入體內(nèi)后與血清白蛋白結(jié)合, 在體內(nèi)被運輸、 儲存, 發(fā)揮藥用價值, 常常以BSA作為模型蛋白闡明研究保健功能成分與血清蛋白之間的結(jié)合方式、 結(jié)合位點等相互作用機(jī)制; 這些機(jī)制的闡明, 對于保健食品、 藥物等產(chǎn)品的開發(fā)與應(yīng)用, 具有重要的理論指導(dǎo)價值。馬雪紅[1]報道了SACS與BSA、 HSA的結(jié)合作用, 即在298 K下結(jié)合常數(shù)分別為9.81×102和2.27×102 L·mol-1; SAC與BSA之間的作用主要為靜電引力, 與HSA之間的作用主要為疏水作用力。 Sun[2]等報道了SACS和HAS的結(jié)合作用, 在298 K結(jié)合常數(shù)為1.58×104 L·mol-1; SAC與BSA之間的作用主要為氫鍵和范德華力。 由此可見, 這兩種氨基酸因結(jié)構(gòu)不同結(jié)合作用相差較大, 而SAMC與血清白蛋白的結(jié)合作用還未見報道, 同時三種含硫氨基酸因結(jié)構(gòu)不同引起結(jié)合作用變化等也需要進(jìn)一步闡明。 為彌補這些不足, 本論文擬采用熒光光譜法和紫外吸收光譜法分析三種含硫氨基酸與牛血清白蛋白的相互作用, 計算其結(jié)合常數(shù)、 結(jié)合作用力類型、 熱力學(xué)參數(shù)、 結(jié)合距離、 結(jié)合位點等, 以為三種含硫氨基酸的開發(fā)與利用提供相應(yīng)的理論依據(jù)。
圖2 不同濃度SACS, SAC, SAMC與BSA相互作用的熒光發(fā)射光譜由表2看出: SAMC和BSA的結(jié)合位點數(shù)n分別為1.224 0和1.294 2, 即近似形成一個結(jié)合位點, 為1∶1復(fù)合物; 其結(jié)合常數(shù)KA數(shù)量級>103, 表明它們之間的結(jié)合力較強, SAMC在生物體內(nèi)可以較好的儲存與轉(zhuǎn)運。 由圖1可以看出: 三種含硫氨基酸都含有相同的烯丙基和丙氨酸的結(jié)構(gòu), 其差異僅是SAMC有二硫鍵結(jié)構(gòu), 而SAC和SACS都沒有二硫鍵, 說明SAMC上二硫鍵的存在使得SAMC與BSA的結(jié)合為靜態(tài)猝滅, 即相互作用較強。
【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]蒜氨酸與牛及人血清白蛋白的相互作用[J]. 馬雪紅,宋百靈,肖文浚,耿晶,李新霞,陳堅. 光譜學(xué)與光譜分析. 2017(06)
[2]光譜法研究11-羥基喜樹堿與牛血清白蛋白的相互作用[J]. 汪雙雙,倪永年. 分析試驗室. 2010(01)
本文編號：3604879
【文章來源】：光譜學(xué)與光譜分析. 2020,40(11)北大核心EISCICSCD
【文章頁數(shù)】：6 頁
【部分圖文】：
不同濃度SACS, SAC, SAMC與BSA相互作用的熒光發(fā)射光譜
大蒜(Allium sativum L., 又稱為葫蒜、 葫、 獨蒜等), 富含含硫氨基酸, 如蒜氨酸(S-allyl cysteine sulfoxid, SACS)、 脫氧蒜氨酸(S-allyl cysteine, SAC)、 S-烯丙基巰基半胱氨酸(S-allyl mercapto cysteine, SAMC; 見圖1)等, 它們具有清除自由基、 抗糖尿病等多種功效。 大蒜的保健、 藥用等生物學(xué)功能, 應(yīng)當(dāng)同這些含硫氨基酸和存在于生物體內(nèi)的蛋白質(zhì)等生物大分子之間的相互作用有直接關(guān)系。 藥物分子進(jìn)入體內(nèi)后與血清白蛋白結(jié)合, 在體內(nèi)被運輸、 儲存, 發(fā)揮藥用價值, 常常以BSA作為模型蛋白闡明研究保健功能成分與血清蛋白之間的結(jié)合方式、 結(jié)合位點等相互作用機(jī)制; 這些機(jī)制的闡明, 對于保健食品、 藥物等產(chǎn)品的開發(fā)與應(yīng)用, 具有重要的理論指導(dǎo)價值。馬雪紅[1]報道了SACS與BSA、 HSA的結(jié)合作用, 即在298 K下結(jié)合常數(shù)分別為9.81×102和2.27×102 L·mol-1; SAC與BSA之間的作用主要為靜電引力, 與HSA之間的作用主要為疏水作用力。 Sun[2]等報道了SACS和HAS的結(jié)合作用, 在298 K結(jié)合常數(shù)為1.58×104 L·mol-1; SAC與BSA之間的作用主要為氫鍵和范德華力。 由此可見, 這兩種氨基酸因結(jié)構(gòu)不同結(jié)合作用相差較大, 而SAMC與血清白蛋白的結(jié)合作用還未見報道, 同時三種含硫氨基酸因結(jié)構(gòu)不同引起結(jié)合作用變化等也需要進(jìn)一步闡明。 為彌補這些不足, 本論文擬采用熒光光譜法和紫外吸收光譜法分析三種含硫氨基酸與牛血清白蛋白的相互作用, 計算其結(jié)合常數(shù)、 結(jié)合作用力類型、 熱力學(xué)參數(shù)、 結(jié)合距離、 結(jié)合位點等, 以為三種含硫氨基酸的開發(fā)與利用提供相應(yīng)的理論依據(jù)。
圖2 不同濃度SACS, SAC, SAMC與BSA相互作用的熒光發(fā)射光譜由表2看出: SAMC和BSA的結(jié)合位點數(shù)n分別為1.224 0和1.294 2, 即近似形成一個結(jié)合位點, 為1∶1復(fù)合物; 其結(jié)合常數(shù)KA數(shù)量級>103, 表明它們之間的結(jié)合力較強, SAMC在生物體內(nèi)可以較好的儲存與轉(zhuǎn)運。 由圖1可以看出: 三種含硫氨基酸都含有相同的烯丙基和丙氨酸的結(jié)構(gòu), 其差異僅是SAMC有二硫鍵結(jié)構(gòu), 而SAC和SACS都沒有二硫鍵, 說明SAMC上二硫鍵的存在使得SAMC與BSA的結(jié)合為靜態(tài)猝滅, 即相互作用較強。
【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]蒜氨酸與牛及人血清白蛋白的相互作用[J]. 馬雪紅,宋百靈,肖文浚,耿晶,李新霞,陳堅. 光譜學(xué)與光譜分析. 2017(06)
[2]光譜法研究11-羥基喜樹堿與牛血清白蛋白的相互作用[J]. 汪雙雙,倪永年. 分析試驗室. 2010(01)
本文編號：3604879
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教材專著
