胃癌是全球死亡率位居第三的惡性腫瘤疾病。目前,對于胃癌的發(fā)生和發(fā)展分子機制尚不明晰。轉錄因子FOXS1是我們基于TCGA測序數(shù)據(jù)篩選到的新的胃癌組織與正常組織之間顯著差異表達的基因之一,位于chr20q11.21。TCGA胃癌數(shù)據(jù)和GEO數(shù)據(jù)庫分析結果均顯示FOXS1基因在胃癌中顯著高表達;并且通過RT-PCR和免疫組化檢測發(fā)現(xiàn)FOXS1在胃癌中也顯著高表達,這一系列結果提示FOXS1基因可能促進胃癌的發(fā)生發(fā)展。Fox轉錄因子家族因含有保守的叉頭框的DNA結合結構域而被命名,其成員在腫瘤發(fā)生發(fā)展中具有非常重要的作用。Fox家族已成為腫瘤研究中的熱點。然而,目前FOXS1作為Fox家族最新發(fā)現(xiàn)的一個成員,其在胃癌中的生物學功能與分子機制研究至今未被報道,因此本論文重點研究FOXS1轉錄因子與胃癌臨床意義的關系以及其對細胞增殖、周期、侵襲與遷移等生物學功能的影響,并闡明其發(fā)揮生物學功能的分子機制。目的:探討轉錄因子FOXS1在胃癌中的表達及臨床價值。體外檢測FOXS1基因對胃癌細胞生長、周期和克隆形成能力的影響。體內檢測FOXS1基因對胃癌細胞裸鼠成瘤能力的影響。檢測FOXS1基因對胃癌細胞...

【文章頁數(shù)】：114 頁

【學位級別】：博士

【文章目錄】：
英文縮略語名詞對照
摘要
ABSTRACT
前言
第一部分 FOXS1基因在胃癌中的表達與臨床意義分析
    1 材料與方法
        1.1 材料
        1.2 方法
    2 結果
        2.1 FOXS1基因在胃癌中高表達
        2.2 FOXS1基因與胃癌臨床信息的關系
    3 討論
第二部分 FOXS1基因促進了胃癌細胞增殖作用
    1 材料與方法
        1.1 材料
        1.2 方法
    2 結果
        2.1 FOXS1基因的敲降效率檢測
        2.2 FOXS1基因敲降對細胞生長的影響
        2.3 FOXS1基因敲降對細胞克隆形成的影響
        2.4 FOXS1基因敲降誘導G1期細胞周期停滯
        2.5 FOXS1基因過表達效果的檢測
        2.6 FOXS1基因過表達促進細胞生長
        2.7 FOXS1基因過表達促進細胞克隆形成能力
        2.8 FOXS1基因過表達激活了G1/S期細胞周期檢查點
        2.9 FOXS1基因過表達促進了腫瘤細胞體內成瘤能力
    3 討論
第三部分 FOXS1基因促進了胃癌細胞侵襲與轉移作用
    1 材料與方法
        1.1 材料
        1.2 方法
    2 結果
        2.1 FOXS1基因敲降抑制了胃癌細胞的侵襲與遷移
        2.2 FOXS1基因過表達促進了胃癌細胞的侵襲與遷移
        2.3 FOXS1基因促進了胃癌細胞EMT的發(fā)生
    3 討論
第四部分 FOXS1基因啟動子區(qū)域的鑒定與分析
    1 材料與方法
        1.1 材料
        1.2 方法
    2 結果
        2.1 FOXS1基因啟動子區(qū)域主要在-660⁺1bp之間
        2.2 FOXS1基因啟動子區(qū)域轉錄因子的預測分析與鑒定
        2.3 外源性NFKB1對FOXS1基因調控作用的分析
        2.4 NFKB1對FOXS1基因啟動子區(qū)域調控作用的分析
        2.5 NFKB1與FOXS1啟動子區(qū)域的體內結合分析
    3 討論
第五部分 FOXS1基因通過Hh信號通路促進了胃癌細胞發(fā)展進程
    1 材料與方法
        1.1 材料
        1.2 方法
    2 結果
        2.1 FOXS1基因參與的信號通路富集分析
        2.2 FOXS1基因與GLI1基因的相關性分析
        2.3 GLI1基因可以抑制FOXS1基因的表達
        2.4 GLI1基因可以抑制FOXS1啟動子區(qū)域的啟動子活性
        2.5 在體內GLI1直接結合在FOXS1啟動子區(qū)域
        2.6 FOXS1啟動子區(qū)域GLI1結合位點的定點突變分析
    3 討論
第六部分 miR-125a-5p可結合到FOXS1基因的3'-UTR區(qū)域抑制其翻譯
    1 材料與方法
        1.1 材料
        1.2 方法
    2 結果
        2.1 調控FOXS1基因的miRNAs預測分析
        2.2 miRNAs過表達對FOXS1基因m RNA水平沒有調控作用
        2.3 miR-125a-5p過表達顯著抑制了FOXS1蛋白的表達
        2.4 miR-125a-5p抑制對FOXS1mRNA水平的表達無影響
        2.5 miR-125a-5p抑制促進了FOXS1蛋白的表達
        2.6 miR-125a-5p可以結合在FOXS13'-UTR位點
    3 討論
全文總結
參考文獻
綜述:FOX家族轉錄因子研究進展
    參考文獻
致謝
博士期間發(fā)表的論文



本文編號：4023333