癌癥是導致人類死亡的主要原因之一。僅2018年,癌癥新增人數(shù)已達到1810萬,死亡人數(shù)約960萬。據(jù)全球36種癌癥的統(tǒng)計結(jié)果顯示,肺癌的發(fā)病率和致死率均列第一位,緊隨其后的是乳腺癌、前列腺癌、腸癌、胃癌和肝癌。導致患者死亡的主要原因是腫瘤細胞極易發(fā)生侵襲轉(zhuǎn)移。腫瘤細胞的侵襲是腫瘤轉(zhuǎn)移的前提,而上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化(EMT)是腫瘤細胞獲得侵襲能力的前提,因此,深入闡明EMT過程的調(diào)控機制已成為腫瘤轉(zhuǎn)移研究中的關(guān)鍵。E-鈣粘蛋白的表達下調(diào)是EMT過程的標志事件,作為Snail家族成員之一的Snail2也參與了EMT過程中E-鈣粘蛋白的轉(zhuǎn)錄抑制;同時,表觀遺傳機制在EMT過程中也扮演了重要的角色。然而,在腫瘤細胞EMT過程中,Snail2是通過何種表觀遺傳機制抑制E-鈣粘蛋白的轉(zhuǎn)錄目前尚不清楚。本論文中,我們首先以肺癌為研究對象。在肺癌腫瘤組織中檢測到轉(zhuǎn)錄因子Snail2有顯著高表達。在TGF-β1誘導肺細胞發(fā)生EMT過程中,只有Snail2顯著高表達。并且,在肺癌細胞中,當Snail2高表達或沉默時,可促進或抑制EMT現(xiàn)象的發(fā)生。通過染色質(zhì)免疫共沉淀實驗檢測發(fā)現(xiàn),當Snail2高表達時,肺癌細胞中...

【文章頁數(shù)】：114 頁

【學位級別】：博士

【文章目錄】：
中文摘要
abstract
關(guān)鍵詞及縮寫
第一章 引言
    1.1 癌癥的簡介
        1.1.1 肺癌的現(xiàn)狀
        1.1.2 肝癌的現(xiàn)狀
        1.1.3 腸癌的現(xiàn)狀
        1.1.4 惡性腫瘤與EMT
    1.2 EMT簡介
        1.2.1 EMT的分類
        1.2.2 EMT的發(fā)生
        1.2.3 轉(zhuǎn)錄因子與EMT
        1.2.4 組蛋白修飾酶與EMT
    1.3 研究意義與實驗設(shè)計
        1.3.1 研究意義
        1.3.2 實驗思路和設(shè)計
第二章 實驗材料與方法
    2.1 實驗材料
        2.1.1 細胞系,質(zhì)粒,動物
        2.1.2 抗體
        2.1.3 試劑
        2.1.4 儀器與設(shè)備
    2.2 實驗方法
        2.2.1 細胞培養(yǎng)條件與傳代培養(yǎng)
        2.2.2 細胞感染
        2.2.3 EMT現(xiàn)象的誘導
        2.2.4 細胞總RNA提取
        2.2.5 熒光定量PCR
        2.2.6 免疫印跡法
        2.2.7 免疫共沉淀
        2.2.8 染色質(zhì)免疫共沉淀
        2.2.9 細胞增殖實驗
        2.2.10 細胞劃痕實驗
        2.2.11 細胞侵襲實驗
        2.2.12 動物腫瘤模型建立
        2.2.13 統(tǒng)計學分析方法
第三章 實驗結(jié)果與討論
    3.1 Snail2、G9a和HDACs參與肺癌EMT過程,增強肺癌的侵襲轉(zhuǎn)移
        3.1.1 Snail2在癌癥患者組織中表達水平檢測
        3.1.2 誘導肺細胞EMT過程,篩選調(diào)控EMT的轉(zhuǎn)錄因子
        3.1.3 Snail2對肺癌細胞EMT現(xiàn)象的影響
        3.1.4 Snail2對肺癌細胞E-鈣粘蛋白表達的調(diào)控
        3.1.5 Snail2、G9a和HDACs對 E-鈣粘蛋白啟動子的調(diào)控
        3.1.6 Snail2、G9a和HDACs相互作用的研究
        3.1.7 Snail2對肺癌細胞體外增殖能力的影響
        3.1.8 Snail2、G9a和HDACs對肺癌細胞體外遷移能力的影響
        3.1.9 Snail2、G9a和HDACs對肺癌細胞體外侵襲能力的影響
        3.1.10 Snail2、G9a和HDACs對肺癌細胞體內(nèi)侵襲轉(zhuǎn)移能力的影響
        3.1.11 小結(jié)
    3.2 Snail2、G9a和 HDACs參與肝癌EMT過程,增強肝癌的侵襲轉(zhuǎn)移
        3.2.1 Snail2在肝癌患者組織中表達水平檢測
        3.2.2 誘導肝細胞EMT過程,篩選調(diào)控EMT的轉(zhuǎn)錄因子
        3.2.3 Snail2對肝癌細胞EMT現(xiàn)象的影響
        3.2.4 Snail2對肝癌細胞E-鈣粘蛋白表達的調(diào)控
        3.2.5 Snail2、G9a和HDACs對E-鈣粘蛋白啟動子的調(diào)控
        3.2.6 Snail2、G9a和HDACs相互作用的研究
        3.2.7 Snail2對肝癌細胞體外增殖能力的影響
        3.2.8 Snail2、G9a和HDACs對肝癌細胞體外遷移能力的影響
        3.2.9 Snail2、G9a和HDACs對肝癌細胞體外侵襲能力的影響
        3.2.10 Snail2、G9a和HDACs對肝癌細胞體內(nèi)侵襲轉(zhuǎn)移能力的影響
        3.2.11 小結(jié)
    3.3 Snail2、EZH2和HDAC6 參與腸癌EMT過程,增強腸癌的侵襲轉(zhuǎn)移
        3.3.1 Snail2在腸癌患者組織中表達水平檢測
        3.3.2 Snail2對腸癌細胞EMT現(xiàn)象的影響
        3.3.3 Snail2對腸癌細胞體外增殖能力的影響
        3.3.4 Snail2對腸癌細胞體外遷移能力的影響
        3.3.5 Snail2對腸癌細胞體外侵襲能力的影響
        3.3.6 Snail2對腸癌細胞體內(nèi)侵襲轉(zhuǎn)移能力的影響
        3.3.7 Snail2、EZH2和HDAC6對腸癌細胞E-鈣粘蛋白表達的調(diào)控
        3.3.8 Snail2、EZH2和HDAC6相互作用的研究
        3.3.9 Snail2、EZH2和HDAC6對腸癌細胞體外遷移能力的影響
        3.3.10 小結(jié)
    3.4 討論
結(jié)論
參考文獻
作者簡介及作者攻讀博士學位期間發(fā)表論文
致謝



本文編號：4024013