目的:評價吲哚-3-甲醇(indole-3-carbinol,I3C)對處于發(fā)育早期斑馬魚胚胎的毒性效應(yīng)。方法:篩選受精后4h(4hpf)健康斑馬魚胚胎,加入不同濃度I3C為試驗組,以Holt buffer溶液為陰性對照組,將二甲基亞砜(DMSO)作為溶質(zhì)對照組,保持DMSO終濃度為0.1%(v/v%),以已知發(fā)育早期毒性藥物雷帕霉素及辛伐他汀為陽性藥物對照。計數(shù)120hpf胚胎死亡率,同時用bliss法計算半數(shù)致死濃度(LC₅₀)。選取1/4 LC₅₀和/或1/2LC₅₀藥物濃度作用至72hpf或96hpf,對斑馬魚胚胎發(fā)育早期藥物毒性進行評估,觀察指標包括4個方面。(1)一般毒性:體視顯微鏡下活體觀察及計數(shù)斑馬魚胚胎孵化率,脊柱畸形,卵黃囊異常、出血、眼部水腫及游泳浮囊未充盈情況,Image J軟件測量孵化幼魚體長。(2)心臟毒性:在體視顯微鏡下計數(shù)活體心率,使用Image J軟件測量靜脈竇-動脈球(SV-BA)間距。(3)神經(jīng)毒性:在體視顯微鏡下觀察活體胚胎的自發(fā)活動,并進行觸覺敏感性實驗。(4)細胞凋亡:吖啶橙染...

【文章頁數(shù)】：116 頁

【學位級別】：博士

【部分圖文】：

圖1不同濃度I3C，雷帕霉素，辛伐他汀對120hpf斑馬魚胚胎死亡率的影響及LC50a)I3C對120hpf斑馬魚胚胎死亡率的影響及LC50

重慶醫(yī)科大學博士研究生學位論文24死濃度LC50=0.0050683μmol/l，F(xiàn)eiller法校正LC5095%的可信限：0.0048576-0.0052761，LC5：0.003725，LC95：0.006896，見圖1。圖1不同濃度I3C，雷帕霉素，辛伐他汀對120hpf....

圖2I3C對72hpf斑馬魚胚胎孵化率的影響

重慶醫(yī)科大學博士研究生學位論文26圖2I3C對72hpf斑馬魚胚胎孵化率的影響。**P<0.01，與對照組比較。Figure2HatchingrateofI3Cinzebrafishembyrosat72hpf.Comparedwiththecontrolgroup**P<0.0....

圖5心包形態(tài)學改變，雷帕霉素及辛伐他汀誘導(dǎo)心包水腫

重慶醫(yī)科大學博士研究生學位論文30圖4I3C對96hpf斑馬魚幼魚的心臟毒性a)I3C對心率的影響b)I3C對SV-BA間距的影響。與對照組比較*P<0.05，**P<0.01Figure4CardiotoxicityofI3Cinzebrafishlarvaeat96hpf.a....

圖4I3C對96hpf斑馬魚幼魚的心臟毒性a)I3C對心率的影響b)I3C對SV-BA間距的影響

重慶醫(yī)科大學博士研究生學位論文30圖4I3C對96hpf斑馬魚幼魚的心臟毒性a)I3C對心率的影響b)I3C對SV-BA間距的影響。與對照組比較*P<0.05，**P<0.01Figure4CardiotoxicityofI3Cinzebrafishlarvaeat96hpf.a....

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