深靜脈血栓形成(Deep vein thrombosis,DVT)是較為常見的外周血管系統(tǒng)疾病之一,深靜脈血栓的發(fā)生多是由于血管內(nèi)皮損傷、血流動力學(xué)改變及血液異常高凝狀態(tài)等原因所導(dǎo)致。其中急性期下肢血栓如發(fā)生脫落,則有引起肺動脈栓塞(pulmonary embolism,PE)的風(fēng)險,死亡率較高,嚴(yán)重威脅患者的生命健康。如短期內(nèi)血栓無法全部清除則發(fā)生血栓機(jī)化,遠(yuǎn)期發(fā)展為血栓形成后綜合征(post-thrombotic syndrome,PTS),其表現(xiàn)為下肢疼痛腫脹、皮膚色素沉著、感覺異常、下肢皮膚反復(fù)潰瘍等臨床表現(xiàn),嚴(yán)重影響患者生活質(zhì)量。目前臨床上常用的治療方法包括單純抗凝治療、手術(shù)取栓、微創(chuàng)介入治療等。雖然這些治療手段對于急性期的血栓有著較好的療效,但對于慢性期血栓以及血栓機(jī)化后造成的內(nèi)皮損傷治療效果有限。干細(xì)胞是目前缺血性疾病的研究熱點(diǎn)之一,其中內(nèi)皮祖細(xì)胞(Endothelial progenitor cells,EPCs)作為內(nèi)皮細(xì)胞的前體細(xì)胞,具有定向分化為成熟內(nèi)皮細(xì)胞的潛在能力,在新生血管形成以及受損內(nèi)皮修復(fù)的過程中發(fā)揮重要作用。已有的研究已經(jīng)證明在深靜脈血栓發(fā)生之后內(nèi)皮祖...

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圖２．內(nèi)皮祖細(xì)胞雙熒光染色ａ）細(xì)胞吞噬Ｄｉｌ－Ａｃ－ＬＤＬ后呈現(xiàn)紅色熒光；ｂ）細(xì)胞結(jié)合??

第一部分?ｍｉＲ－１５０對內(nèi)皮祖細(xì)胞分化的影響和調(diào)控機(jī)制的實驗研宂??■?■■??圖２．內(nèi)皮祖細(xì)胞雙熒光染色ａ）細(xì)胞吞噬Ｄｉｌ－Ａｃ－ＬＤＬ后呈現(xiàn)紅色熒光；ｂ）細(xì)胞結(jié)合??Ｆ１ＴＣ－ＵＥＡ－１后細(xì)胞呈現(xiàn)綠色熒光；ｃ）紅色熒光與綠色熒光共染后呈現(xiàn)黃色熒光??３．流式細(xì)胞學(xué)檢測??分....

圖３．早期內(nèi)皮祖細(xì)胞中ＣＤ３１陽性細(xì)胞數(shù)所占比例為３６．１％，ＣＤ３４陽性細(xì)胞數(shù)所占比??

％，ＣＤ４５陽性細(xì)胞數(shù)所占??比例在９２．２％，ＣＤ１４陽性細(xì)胞數(shù)所占比例在９３．４％，ＣＤ１３３陽性細(xì)胞數(shù)所占比例為??７．８５％，ｖＷＦ陽性細(xì)胞數(shù)所占比例在１．６７％；晚期內(nèi)皮祖細(xì)胞中ＣＤ３１陽性細(xì)胞數(shù)所??占比例為９７．３％，ＣＤ３４陽性細(xì)胞數(shù)所占比例在１９．６％，?ＶＥＧ....

圖４．滅光顯微鏡Ｆ顯不ｍｉＲ－１５０?ａｇｏｍｉｒ轉(zhuǎn)染效率ａ）光鏡下內(nèi)皮祖細(xì)胞；ｂ）內(nèi)皮袓細(xì)胞??

入中止劑１００Ｍ，混勻后置于酶標(biāo)儀中檢測４５０ｎｍ中ＯＤ值；??（８）以標(biāo)準(zhǔn)品檢測結(jié)果建立標(biāo)準(zhǔn)曲線，對比檢測樣品的濃度。??結(jié)果??１．?ｍｉＲ－１５０?ａｇｏｍｉｒ?及?ｍｉＲ－１５０?ａｎｔａｇｏｍｉｒ?轉(zhuǎn)染效率檢測??為＿Ｔ檢測ｍｉＲ－１５０?ａｇｏｍｉｒ及ｍｉＲ－１５０?....

圖６．流式細(xì)胞學(xué)檢測下調(diào)ｍｉＲ－１５０的早期內(nèi)皮祖細(xì)胞以及上調(diào)ｍｉＲ－１５０的晚期內(nèi)皮祖細(xì)??胞中?ＣＤ３４、ＶＥＧＦＲ２、ＣＤ１３３、ＣＤ３１、ＣＤ４５、ＣＤ１４?以及?ｖＷＦ?的表達(dá)含量??．－

第二部分?ｍｉＲ－１５０對內(nèi)皮祖細(xì)胞分化的影響和調(diào)控機(jī)制的實驗研宄??４?Ｉ?ｊ，?｜?＼?一?《?１??Ｉ?ｉ？?龜?１?Ｉ?Ｌ?．??＊?＞？?量?？星’?１？星．?卜？墓?Ｉ－？星?卜’■??圖６．流式細(xì)胞學(xué)檢測下調(diào)ｍｉＲ－１５０的早期內(nèi)皮祖細(xì)胞以及上調(diào)ｍｉＲ－１５０的晚期....

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