研究背景:胃癌是世界上最為常見的惡性腫瘤之一,由于較高的發(fā)病率與死亡率,其已經(jīng)成為目前威脅我國人民生命與健康的嚴(yán)重問題。根治性R0手術(shù)切除與充分的淋巴結(jié)清掃是目前唯一可能使胃癌達(dá)到治愈的治療手段。然而,由于早期缺乏明顯的臨床癥狀及陽性體征,多數(shù)病人在確診為胃癌時以處于疾病的進(jìn)展期,大大影響了病人的治療效果。另一方面,即便接受了根治性手術(shù),仍然有很大一部分病人在術(shù)后短期內(nèi)出現(xiàn)了腫瘤的復(fù)發(fā)與轉(zhuǎn)移,這使得胃癌病人預(yù)后依然無法令人滿意。盡管傳統(tǒng)的腫瘤標(biāo)志物檢測,如血清癌胚抗原(CEA)、糖類抗原CA19-9、糖類抗原CA125等已廣泛應(yīng)用于臨床,但對于胃癌的診斷而言仍缺乏足夠的特異性與敏感性。因此,尋找新的、更為敏感的診斷標(biāo)志物與預(yù)后分子,對于提高胃癌早期診斷的成功率、監(jiān)測腫瘤的復(fù)發(fā)與轉(zhuǎn)移,揭示胃癌發(fā)生發(fā)展涉及的分子機(jī)制具有非常重要的意義。細(xì)胞分裂周期蛋白6(Cell division cycle 6,CDC6)位于人類染色體17q21.3,是真核細(xì)胞DNA復(fù)制起始必需的調(diào)控蛋白。研究發(fā)現(xiàn)CDC6的主要功能是參與DNA復(fù)制前復(fù)合體(pre-replication complex,pre-RC)...

【文章頁數(shù)】：107 頁

【學(xué)位級別】：博士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
英文縮略語
第一部分 MiR-26b在胃癌組織中的表達(dá)及其對胃癌細(xì)胞增殖、侵襲能力影響的實(shí)驗(yàn)研究
    1 前言
    2 材料與方法
        2.1 實(shí)驗(yàn)資料
            2.1.1 胃癌組織標(biāo)本的收集及病人的臨床病理特征
            2.1.2 主要實(shí)驗(yàn)試劑
            2.1.3 主要實(shí)驗(yàn)儀器與設(shè)備
        2.2 實(shí)驗(yàn)方法
            2.2.1 組織、細(xì)胞RNA的提取與反轉(zhuǎn)錄
            2.2.2 熒光實(shí)時定量 PCR(real-time quantitative PCR, RT-PCR)
            2.2.3 細(xì)胞系的復(fù)蘇、培養(yǎng)與傳代
            2.2.4 過表達(dá)miR-26b細(xì)胞系的建立
            2.2.5 MTS實(shí)驗(yàn)
            2.2.6 細(xì)胞凋亡實(shí)驗(yàn)
            2.2.7 Transwell 細(xì)胞侵襲實(shí)驗(yàn)
            2.2.8 熒光素酶報(bào)告基因?qū)嶒?yàn)(luciferase reporter gene assay)
            2.2.9 數(shù)據(jù)處理與統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
    3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        3.1 miR-26b在胃癌組織及細(xì)胞中的表達(dá)情況
        3.2 miR-26b表達(dá)與胃癌病人臨床病理資料的關(guān)系
        3.3 miR-26b對細(xì)胞增殖、凋亡及侵襲能力的影響
        3.4 miR-26b靶基因的預(yù)測及驗(yàn)證
    4 討論
    5 結(jié)論
第二部分 CDC6在胃癌組織中的表達(dá),對胃癌細(xì)胞生物學(xué)功能的影響及其與MiR-26b調(diào)控關(guān)系的研究
    1 前言
    2 材料與方法
        2.1 實(shí)驗(yàn)資料
            2.1.1 主要實(shí)驗(yàn)試劑
            2.1.2 主要實(shí)驗(yàn)儀器與設(shè)備
        2.2 實(shí)驗(yàn)方法
            2.2.1 免疫組織化學(xué)染色
            2.2.2 細(xì)胞系的培養(yǎng)與傳代
            2.2.3 細(xì)胞RNA的提取與反轉(zhuǎn)錄
            2.2.4 熒光實(shí)時定量 PCR(real-time quantitative PCR, RT-PCR)
            2.2.5 Western blot
            2.2.6 建立沉默CDC6的胃癌細(xì)胞系
            2.2.7 MTS實(shí)驗(yàn)
            2.2.8 細(xì)胞凋亡實(shí)驗(yàn)
            2.2.9 Transwell細(xì)胞侵襲實(shí)驗(yàn)
            2.2.10 數(shù)據(jù)處理與統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
    3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        3.1 CDC6在胃癌組織及胃癌細(xì)胞系中的表達(dá)情況
        3.2 CDC6表達(dá)水平與胃癌病人臨床病理資料之間的關(guān)系
        3.3 miR-26b與 CDC6在胃癌組織中表達(dá)的相關(guān)性
        3.4 干擾沉默CDC6對胃癌細(xì)胞增殖、凋亡及侵襲能力的影響
        3.5 恢復(fù)CDC6表達(dá)對過表達(dá)miR-26b細(xì)胞增殖、侵襲能力的影響
    4 討論
    5 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
本研究創(chuàng)新性的自我評價
綜述
    參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間取得的研究成果
致謝
個人簡歷



本文編號：3931137