1、研究背景腫瘤轉(zhuǎn)移是一個(gè)極為復(fù)雜的、多步驟的細(xì)胞生物學(xué)過程,也稱為侵襲-轉(zhuǎn)移級(jí)聯(lián)進(jìn)程,在這個(gè)過程中原發(fā)性腫瘤細(xì)胞獲得侵襲能力,然后擴(kuò)散到遠(yuǎn)處器官。包括乳腺癌在內(nèi)的多種實(shí)體惡性腫瘤中,90%以上的癌癥相關(guān)死亡是由轉(zhuǎn)移所引發(fā)的。雖然早期診斷、手術(shù)切除和輔助治療方案都有所改善,但轉(zhuǎn)移性疾病在很大程度上仍舊是無法治愈的。隨著腫瘤干細(xì)胞學(xué)說的興起,我們對(duì)腫瘤干細(xì)胞的認(rèn)知越來越深刻,腫瘤干細(xì)胞即為腫瘤中極其少數(shù)的一群具有自我更新及多向分化潛能的細(xì)胞群體,與臨床腫瘤患者的轉(zhuǎn)移、復(fù)發(fā)和治療抵抗密切相關(guān)。所以,腫瘤干細(xì)胞的干性特征與腫瘤轉(zhuǎn)移表型之間存在著千絲萬(wàn)縷的聯(lián)系。最近的研究表明,驅(qū)動(dòng)腫瘤細(xì)胞發(fā)生侵襲、轉(zhuǎn)移的主要原因是細(xì)胞獲得遺傳或表觀遺傳學(xué)上的改變。因此,探索調(diào)控腫瘤轉(zhuǎn)移及腫瘤干細(xì)胞干性的關(guān)鍵分子機(jī)制就顯的極為關(guān)鍵和迫切。信號(hào)銜接蛋白p62(SQSTM1)最初被鑒定作為一種細(xì)胞質(zhì)內(nèi)的62kDa蛋白,可與p56^lck的SH2結(jié)構(gòu)域結(jié)合。p62這種多結(jié)構(gòu)域多功能蛋白可以選擇性的與Raptor、Keap1、Ubiquitin、LC3等不同信號(hào)媒介相互作用,分別調(diào)控細(xì)胞代謝、氧化應(yīng)...

【文章頁(yè)數(shù)】：93 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
中文摘要
英文摘要
(一)前言
(二)材料和方法
    1.細(xì)胞培養(yǎng)及化學(xué)試劑
    2.臨床樣本
    3.質(zhì)粒構(gòu)建和轉(zhuǎn)染
    4.RNAi瞬時(shí)干擾
    5.病毒包裝
    6.微流控芯片設(shè)計(jì)
    7.微球懸浮培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)
    8.Transwell實(shí)驗(yàn)
    9.動(dòng)物實(shí)驗(yàn)
    10.斑馬魚胚胎異種移植實(shí)驗(yàn)
    11.總 RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、普通PCR、熒光實(shí)時(shí)定量qPCR
    12.免疫印跡
    13.蛋白質(zhì)免疫共沉淀
    14.RNA免疫共沉淀
    15.Luciferase檢測(cè)
    16.膠內(nèi)酶解
    17.質(zhì)譜分析
    18.細(xì)胞免疫熒光
    19.免疫組織化學(xué)染色
    20.統(tǒng)計(jì)學(xué)分析方法
(三)結(jié)果
    1.p62 在轉(zhuǎn)移性乳腺癌中高表達(dá),其過表達(dá)與不良預(yù)后相關(guān)
    2.p62 促進(jìn)乳腺癌細(xì)胞的侵襲表型
    3.干擾p62 可抑制乳腺癌的轉(zhuǎn)移,并降低體內(nèi)成瘤性
    4.p62 結(jié)合vimentin并促進(jìn)vimentin蛋白表達(dá)
    5.vimentin在 p62 介導(dǎo)的乳腺癌轉(zhuǎn)移中發(fā)揮重要作用
    6.臨床乳腺癌標(biāo)本中,p62與vimentin蛋白表達(dá)呈正相關(guān)
(四)討論
(五)結(jié)論
(六)參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間發(fā)表論文情況
致謝



本文編號(hào)：3928670