研究背景:心肌纖維化是多種心血管疾病的常見病理過程。心臟成纖維細胞活性異常是心肌纖維化發(fā)生發(fā)展過程中的關(guān)鍵事件。Notch信號通路在抗心肌纖維化中起著非常重要的作用,但其機制尚未闡明,需要進一步研究。Hif1α和RhoA/ROCK信號通路都已被證明參與心肌纖維化。同時也有研究發(fā)現(xiàn)在某些病理生理過程中RhoA/ROCK信號通路是Hif1α的上游途徑。在本研究中,我們旨在確定Notch3對心臟成纖維細胞增殖、凋亡及向肌成纖維細胞轉(zhuǎn)化的調(diào)控作用及其與RhoA/ROCK/Hif1α信號通路的關(guān)系。研究方法:實驗分為3個部分。第一部分探討Notch3對心臟成纖維細胞增殖、表型轉(zhuǎn)化及凋亡的調(diào)控作用。分別應(yīng)用Notch3 siRNA和過表達質(zhì)粒進行Notch3敲減和過表達血清處理后的成纖維細胞。實驗分組:control組,sc notch3組,si notch3組,vector組和ov-N3ICD組。RT-qPCR和western blot檢測Notch3 siRNA和過表達質(zhì)粒轉(zhuǎn)染的效率;應(yīng)用CCK8和Edu試劑盒檢測細胞增殖;流式細胞術(shù)檢測細胞凋亡;Western blot檢測total cas...

【文章頁數(shù)】：108 頁

【學位級別】：博士

【文章目錄】：
英漢縮略語名詞對照
中文摘要
ABSTRACT
前言
實驗設(shè)計
    1 原代乳鼠心臟成纖維細胞的提取及實驗分組
    2 Notch調(diào)節(jié)心臟成纖維細胞活性
    3 Notch3 調(diào)節(jié)RhoA/ROCK/Hif1α信號軸的功能
    4 Notch3 通過RhoA/ROCK/Hif1α信號軸調(diào)節(jié)心臟成纖維細胞活性
    5 Notch3 通過抑制RhoA/ROCK/Hif1α信號通路改善心肌梗死后心肌纖維化
實驗材料與方法
    1 實驗準備
    2 主要材料和儀器設(shè)備
    3 實驗方法
實驗結(jié)果
    1 心臟成纖維細胞鑒定結(jié)果
    2 轉(zhuǎn)染效率檢測
    3 Notch3抑制心臟成纖維細胞增殖
    4 Notch3促進心臟成纖維細胞凋亡
    5 Notch3抑制心臟成纖維細胞表型轉(zhuǎn)化
    6 Notch3 調(diào)節(jié)心臟成纖維細胞中Hif1α,RhoA/ROCK的表達
    7 Hif1α抑制劑和穩(wěn)定劑效果檢測
    8 Hif1α抑制劑可以逆轉(zhuǎn)Notch3 干擾引起的效應(yīng)
    9 DMOG逆轉(zhuǎn)Notch3 過表達誘導的細胞凋亡增加
    10 Notch3 通過RhoA/ROCK/Hif1α發(fā)揮作用
    11 Ad-N3ICD在心肌組織中成功過表達
    12 Notch3抑制心肌梗死后心肌纖維化,改善心肌梗死后心功能
    13 Notch3 通過抑制RhoA/ROCK/Hif1α信號通路發(fā)揮抗纖維化作用
討論
結(jié)論
參考文獻
文獻綜述
    心血管系統(tǒng)的重要調(diào)控者:Notch信號通路
        1 Notch與先天性心臟病
        2 Notch與心血管系統(tǒng)發(fā)育
        3 Notch與動脈粥樣硬化
        4 Notch與心肌缺血
        5 Notch與心肌纖維化
        6 Notch與鈣化性主動脈瓣疾病
        7 Notch與心律失常
        8 Notch與高血壓
        參考文獻
    Hif1α與心血管疾病的關(guān)系及其他信號通路相互作用
        1 Hif1α與心血管疾病
        2 Hif1α和其他信號通路的交叉
        3 總結(jié)
        參考文獻
在讀期間參與課題
攻讀博士期間發(fā)表的論文
致謝



本文編號：3868168