發(fā)布時間：2022-10-23 19:23

　　背景/目的:急性腦缺血是腦血管功能不全的表現(xiàn),死亡率高。然而,對急性腦缺血的治療仍然有限。本研究旨在探討micro RNA 381（mi R-381）通過LRRC4調(diào)節(jié)SDF-1/CXCR4信號通路對大鼠腦淋巴管阻塞（CLB）后的急性腦缺血神經(jīng)損傷修復的影響。方法:建立大鼠CLB和大腦中動脈閉塞模型,將56只Wistar大鼠分為假手術(shù)組、MCAO組、CLB+MCAO+micro RNA 381抑制劑組、CLB+MCAO+micro RNA 381模擬組、CLB+MCAO+AMD3100和CLB+MCAO+micro RNA 381模擬+AMD3100組。改良神經(jīng)嚴重度評分（m NSS）用于評估神經(jīng)損傷,TTC染色用于測定梗死體積,末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶介導的d UTP缺口末端標記（TUNEL）染色和流式細胞術(shù)用于評價細胞凋亡,免疫熒光法用于測定Brd U陽性細胞數(shù),酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）測定腫瘤壞死因子-α（TNF-α）、白細胞介素-1β（IL-1β）、白細胞介素-6（IL-6）、白細胞介素-10（IL-10）、神經(jīng)生長因子（NGF）和神經(jīng)突生長抑制因子-A（Nogo-A）等,逆... 

【文章頁數(shù)】：95 頁

【學位級別】：博士

【文章目錄】：
前言
中文摘要
Abstract
中英文縮略詞對照表
第1章 綜述
    1.1 急性腦缺血(缺血性腦卒中)
        1.1.1 缺血性腦卒中的定義及流行病學特點
        1.1.2 缺血性腦卒中的發(fā)病機理及病理改變
        1.1.3 缺血性腦卒中對于細胞凋亡的影響
    1.2 MircoRNA在腦缺血中的作用
        1.2.1 MicroRNA的定義及生物學作用
        1.2.2 MicroRNA在腦缺血中的表達及發(fā)生、發(fā)展、修復過程中的作用
    1.3 SDF-1/CXCR4信號通路在腦缺血中的作用
        1.3.1 SDF-1/CXCR4信號通路的定義
        1.3.2 SDF-1/CXCR4信號通路的生物學作用
        1.3.3 SDF-1/CXCR4信號通路與Micro RNA的關(guān)系
        1.3.4 SDF-1/CXCR4信號通路在腦缺血中的作用
    1.4 LRRC4在腦缺血中的作用
        1.4.1 LRRC4的定義
        1.4.2 LRRC4在膠質(zhì)瘤中的作用
    1.5 腦淋巴管回流
        1.5.1 腦淋巴管的定義及生理
        1.5.2 腦淋巴管回流障礙與腦缺血的關(guān)系
    1.6 與腦缺血相關(guān)的個別基因及蛋白
        1.6.1 VEGF在腦缺血中的正性保護作用
        1.6.2 ERK在腦缺血中的正性保護作用
        1.6.3 Slit2在腦缺血中的正性保護作用
        1.6.4 Nogo-A在腦缺血中的負性作用
        1.6.5 NGF在腦缺血中的正性保護作用
        1.6.6 IL-10 在腦缺血中的正性保護作用
        1.6.7 TNF-α、IL-1β、IL-6在腦缺血中的負性作用
    1.7 本研究所涉及的特殊試劑
    1.8 立項依據(jù)
第2章 材料與方法
    2.1 主要實驗材料
    2.2 主要儀器
    2.3 雙熒光素酶報告基因分析
    2.4 動物模型的建立
        2.4.1 動物的選擇
        2.4.2 實驗分組
        2.4.3 腦淋巴管阻塞動物模型的制作
        2.4.4 大腦中動脈阻塞動物模型的制作
    2.5 改良神經(jīng)嚴重度評分(m NSS)
    2.6 2,3,5-三苯基四唑氯化物(TTC)染色
    2.7 蘇木精-伊紅(HE)染色
    2.8 末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶(Td T)介導的缺口末端標記(TUNEL)染色
    2.9 微管相關(guān)蛋白 2(MAP2)染色
    2.10 流式細胞術(shù)
    2.11 免疫熒光
    2.12 酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)
    2.13 逆轉(zhuǎn)錄定量聚合酶鏈反應(yīng)(RT-qPCR)
    2.14 蛋白印跡法(Western blotting)
    2.15 統(tǒng)計分析
第3章 結(jié)果
    3.1 LRRC4是microRNA 381 的靶基因
    3.2 大鼠模型的建立及神經(jīng)功能評分
    3.3 microRNA 381 上調(diào)、LRRC4下調(diào)減少腦梗死體積
    3.4 各組大鼠神經(jīng)元形態(tài)學變化
    3.5 microRNA 381 上調(diào)和LRRC4下調(diào)減少細胞凋亡
    3.6 microRNA 381 的上調(diào)和LRRC4的下調(diào)降低神經(jīng)元細胞凋亡
    3.7 各組大鼠Brd U陽性表達
    3.8 各組大鼠TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-10、NGF和Nogo-A的含量
    3.9 各組大鼠腦組織microRNA 381 表達及LRRC4、SDF-1、CXCR4、ERK、Slit2、VEGF m RNA的表達
    3.10 各組大鼠腦組織中LRRC4、SDF-1、CXCR4、ERK、Slit2和VEGF的蛋白表達
第4章 討論
第5章 結(jié)論
參考文獻
作者簡介及在學期間所取得的科研成果
致謝


【參考文獻】：
期刊論文
[1]電針對局灶性腦缺血大鼠弓狀核Gas7和NGF表達的影響[J]. 趙健,丁見,黃銳,吳鋒,李懷斌.  中國針灸. 2019(11)
[2]Constraint-induced movement therapy enhances angiogenesis and neurogenesis after cerebral ischemia/reperfusion[J]. Zhi-Yong Zhai,Juan Feng.  Neural Regeneration Research. 2019(10)
[3]頭穴透刺對局灶性腦缺血大鼠海馬CA1區(qū)酸感受離子通道1a、2b表達的影響[J]. 田亮,王金海,趙敏,鮑英存,商俊芳,鄢琦,張振昶,杜小正,姜華,孫潤潔,袁博,張星華,張婷卓,李興蘭.  針刺研究. 2016(05)
[4]富亮氨酸重復超家族新成員LRRC4的克隆與在腦瘤中的表達分析[J]. 王潔如,錢駿,董利,李小玲,譚琛,李江,張必成,周潔,李桂源.  生物化學與生物物理進展. 2002(02)



本文編號：3696982