缺血性心臟疾病依然是世界范圍內(nèi)引起死亡的最主要疾病,并且呈現(xiàn)逐年快速增加的趨勢(shì)。據(jù)歐洲統(tǒng)計(jì)學(xué)數(shù)據(jù)顯示,缺血性心臟疾病每年導(dǎo)致180萬患者死亡,占?xì)W洲總死亡病例數(shù)的20%,其巨大的危害不言而喻。心臟功能衰竭是急性心肌梗死后最常見、也是最為人知的并發(fā)癥,在過去的三十年時(shí)間里,隨著科學(xué)技術(shù)的不斷進(jìn)步和心臟治療技術(shù)的廣泛開展,如經(jīng)皮冠狀動(dòng)脈介入治療、介入性藥物治療等手段,使急性心肌梗死的死亡率逐漸呈現(xiàn)下降趨勢(shì),有效遏制了心肌梗死后心臟功能衰竭等眾多并發(fā)癥的發(fā)生。心臟功能衰竭常常伴隨著嚴(yán)重的左心室重構(gòu),最終表現(xiàn)為心室腔擴(kuò)張和心臟功能障礙。研究數(shù)據(jù)顯示:2010年,在因急性心肌梗死引發(fā)心臟功能衰竭而住院的患者中,1年死亡率仍然高達(dá)45.5%。該數(shù)據(jù)自2007年以來一直保持增加趨勢(shì),嚴(yán)重危害患者生命健康。2013年,中國(guó)的人群調(diào)查數(shù)據(jù)顯示,慢性心臟功能衰竭的發(fā)生率已經(jīng)高達(dá)0.9%,但是目前仍然缺乏有效的治療方法。心肌梗死后心臟功能衰竭的發(fā)生發(fā)展過程十分復(fù)雜,有研究報(bào)道顯示,心肌細(xì)胞壞死、過多的心肌細(xì)胞凋亡、各類細(xì)胞因子的分泌、心臟內(nèi)部纖維化以及梗死區(qū)域非心肌細(xì)胞增生導(dǎo)致的的心臟力學(xué)變化等都在心肌梗死... 

【文章頁數(shù)】：127 頁

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
縮略語表
中文摘要
Abstract
前言
文獻(xiàn)回顧
    1.心血管疾病概述
        1.1.心血管疾病流行病學(xué)現(xiàn)狀分析
        1.2.心血管疾病的致死率
        1.3.心血管疾病造成的社會(huì)負(fù)擔(dān)
        1.4.心力衰竭
            1.4.1.心力衰竭的流行病學(xué)現(xiàn)狀
            1.4.2.心力衰竭的致死率
            1.4.3.心力衰竭造成的的社會(huì)負(fù)擔(dān)
    2.自噬
        2.1.自噬的定義
        2.2.自噬的機(jī)制
        2.3.自噬與心血管疾病的關(guān)系
            2.3.1.自噬發(fā)揮心臟保護(hù)功能的機(jī)制
            2.3.2.自噬與心臟疾病的關(guān)系
            2.3.3.自噬與心力衰竭和肥厚型增生的關(guān)系
            2.3.4.自噬與缺血/再灌注損傷的關(guān)系
            2.3.5.自噬與糖尿病心肌病的關(guān)系
    3.OSM研究概述
        3.1.OSM與心血管疾病的關(guān)系
        3.2.OSM受體分類及調(diào)節(jié)
    4.Mst1研究概述
第一部分 OSM改善心肌梗死后心臟功能,延緩左室重構(gòu)
    1.材料
        1.1.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
        1.2.主要試劑
        1.3.主要儀器
    2.方法
        2.1.動(dòng)物實(shí)驗(yàn)分組
        2.2.小鼠心肌梗死模型的構(gòu)建
        2.3.小鼠OSM處理
        2.4.小鼠心臟超聲檢測(cè)
        2.5.小鼠心臟左心室壓力檢測(cè)
        2.6.小鼠心臟馬松染色
        2.7.小鼠心臟組織制作透射電鏡標(biāo)本,并觀察心肌組織超微結(jié)構(gòu)
        2.8.細(xì)胞實(shí)驗(yàn)分組
        2.9.原代心肌細(xì)胞分離培養(yǎng)
        2.10.原代心肌細(xì)胞自噬水平的檢測(cè)—GFP-LC3表達(dá)量檢測(cè)
        2.11.原代心肌細(xì)胞p62和蛋白聚集體的共定位檢測(cè)
        2.12.透射電子顯微鏡觀察原代心肌細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)的變化
        2.13.檢測(cè)心臟組織及原代心肌細(xì)胞信號(hào)通路分子蛋白表達(dá)情況
            2.13.1.蛋白樣本的制備:
            2.13.2.Western blotting實(shí)驗(yàn)檢測(cè)分子表達(dá)量變化
                2.13.2.1 配制SDS-聚丙烯酰胺凝膠:
                2.13.2.2.Western blotting過程:
        2.14.原代心肌細(xì)胞凋亡檢測(cè)
        2.15.原代心肌細(xì)胞線粒體膜電位檢測(cè)
        2.16.心肌組織活性氧檢測(cè)
        2.17.檸檬酸合成酶活性檢測(cè)
        2.18.心肌組織ATP含量測(cè)定
        2.19.心肌組織線粒體鈣存儲(chǔ)能力檢測(cè)
        2.20.數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)與分析
    3.結(jié)果
        3.1.OSM處理改善心肌梗死后心臟功能
        3.2.OSM處理改善心肌梗死后血流動(dòng)力學(xué)指標(biāo)
        3.3.OSM顯著延緩心肌梗死后左心室重構(gòu)
        3.4.OSM顯著改善心肌梗死后心肌組織結(jié)構(gòu),促進(jìn)心肌細(xì)胞自噬
        3.5.OSM顯著改善心肌梗死后心肌組織線粒體功能
        3.6.OSM顯著改善缺氧后原代心肌細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)損傷,促進(jìn)自噬水平
        3.7.OSM顯著減少原代心肌細(xì)胞缺氧后凋亡
        3.8.OSM顯著改善原代心肌細(xì)胞缺氧后線粒體膜電位
        3.9.OSM顯著促進(jìn)原代心肌細(xì)胞缺氧后自噬水平GFP-LC3的表達(dá)
        3.10.OSM顯著抑制原代心肌細(xì)胞缺氧后p62與蛋白聚集體的聚集
        3.11.OSM顯著促進(jìn)原代心肌細(xì)胞缺氧后自噬流水平
        3.12.OSM顯著促進(jìn)心肌梗死后心肌自噬相關(guān)蛋白的表達(dá),抑制Mst1的磷酸化
    4.討論
第二部分 OSM通過Oβ受體促進(jìn)心肌梗死后心肌細(xì)胞自噬,改善心肌梗死后心臟功能
    1.材料
        1.1.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
        1.2.主要試劑
        1.3.主要儀器
    2.方法
        2.1.動(dòng)物實(shí)驗(yàn)分組一
        2.2.動(dòng)物實(shí)驗(yàn)分組二
        2.3.小鼠心肌梗死模型的構(gòu)建
        2.4.小鼠3-MA處理處理
        2.5.小鼠OSM處理處理
        2.6.小鼠心臟超聲檢測(cè)
        2.7.小鼠心臟左心室血流動(dòng)力學(xué)檢測(cè)
        2.8.小鼠心臟馬松染色
        2.9.小鼠心臟組織制作透射電鏡標(biāo)本,并觀察心肌組織超微結(jié)構(gòu)
        2.10.細(xì)胞實(shí)驗(yàn)分組
        2.11.原代心肌細(xì)胞分離培養(yǎng)
        2.12.原代心肌細(xì)胞自噬水平的檢測(cè)—GFP-LC3表達(dá)量檢測(cè)
        2.13.原代心肌細(xì)胞p62和蛋白聚集體的共定位檢測(cè)
        2.14.透射電子顯微鏡觀察原代心肌細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)的變化
        2.15.檢測(cè)心臟組織及原代心肌細(xì)胞信號(hào)通路分子蛋白表達(dá)情況
        2.16.原代心肌細(xì)胞凋亡檢測(cè)
        2.17.原代心肌細(xì)胞線粒體膜電位檢測(cè)
        2.18.心肌組織活性氧檢測(cè)
        2.19.檸檬酸合成酶活性檢測(cè)
        2.20.心肌組織ATP含量測(cè)定
        2.21.數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)與分析
    3.結(jié)果
        3.1.3-MA顯著抑制OSM發(fā)揮的心肌梗死后心臟保護(hù)作用
        3.2.OSM不能改善Oβ受體敲除小鼠心肌梗死后心臟功能
        3.3.OSM不能改善Oβ受體敲除小鼠心肌梗死后血流動(dòng)力學(xué)指標(biāo)
        3.4.Oβ受體敲除后,OSM不能延緩小鼠心肌梗死后左心室重構(gòu)
        3.5.Oβ受體敲除后,OSM不能改善心肌梗死后心肌組織超微結(jié)構(gòu),不能促進(jìn)心肌細(xì)胞自噬
        3.6.OSM不能改善Oβ受體敲除小鼠心肌梗死后心肌組織線粒體功能
        3.7.Oβ基因敲低后,OSM不能改善缺氧后原代心肌細(xì)胞的損傷,不能促進(jìn)自噬水平
        3.8.Oβ基因敲低后,OSM不能抑制原代心肌細(xì)胞缺氧后凋亡
        3.9.Oβ基因敲低后,OSM不能改善原代心肌細(xì)胞缺氧后線粒體膜電位
        3.10.Oβ基因敲低后,OSM不能促進(jìn)缺氧后原代心肌細(xì)胞自噬水平
        3.11.Oβ基因敲低后,OSM不能抑制缺氧后原代心肌細(xì)胞p62與蛋白聚集體的聚集
        3.12.Oβ基因敲低后,OSM不能促進(jìn)缺氧后原代心肌細(xì)胞自噬流水平
        3.13.OSM不能促進(jìn)Oβ受體敲除小鼠心肌梗死后心肌自噬相關(guān)蛋白的表達(dá),不能抑制其Mst1的磷酸化
    4.討論
第三部分 OSM通過Oβ受體抑制Mst1的磷酸化,促進(jìn)心肌梗死后心肌細(xì)胞自噬,改善心肌梗死后心臟功能
    1.材料
        1.1.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
        1.2.主要試劑
        1.3.主要儀器
    2.方法
        2.1.動(dòng)物實(shí)驗(yàn)分組
        2.2.小鼠心肌梗死模型的構(gòu)建
        2.3.小鼠OSM處理處理
        2.4.小鼠心臟超聲檢測(cè)
        2.5.小鼠心臟左心室血流動(dòng)力學(xué)檢測(cè)
        2.6.小鼠心臟馬松染色
        2.7.小鼠心臟組織制作透射電鏡標(biāo)本,并觀察心肌組織超微結(jié)構(gòu)
        2.8.細(xì)胞實(shí)驗(yàn)分組
        2.9.原代心肌細(xì)胞分離培養(yǎng)
        2.10.原代心肌細(xì)胞GFP-LC3表達(dá)量檢測(cè)
        2.11.原代心肌細(xì)胞p62和蛋白聚集體的檢測(cè)
        2.12.透射電子顯微鏡觀察心肌細(xì)胞缺氧后超微結(jié)構(gòu)的變化
        2.13.Western blotting檢測(cè)心臟組織及原代心肌細(xì)胞信號(hào)通路分子蛋白表達(dá)情況
        2.14.原代心肌細(xì)胞凋亡檢測(cè)
        2.15.原代心肌細(xì)胞線粒體膜電位檢測(cè)
        2.16.心肌組織活性氧檢測(cè)
        2.17.檸檬酸合成酶活性檢測(cè)
        2.18.心肌組織ATP含量測(cè)定
        2.19.數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)與分析
    3.結(jié)果
        3.1.Mst1敲除后,OSM不能改善心肌梗死后心臟功能
        3.2.Mst1敲除后,OSM改善心肌梗死后血流動(dòng)力學(xué)的保護(hù)作用消失
        3.3.OSM顯著延緩Mst1轉(zhuǎn)基因小鼠心肌梗死后左心室重構(gòu),Mst1敲除后,該保護(hù)作用消失
        3.4.OSM顯著改善Mst1轉(zhuǎn)基因小鼠心肌梗死后心肌組織超微結(jié)構(gòu),Mst1敲除后,該保護(hù)作用消失
        3.5.Mst1敲除后,OSM不能改善心肌梗死后心肌組織線粒體功能
        3.6.Mst1基因敲低后,OSM不能進(jìn)一步緩解缺氧后原代心肌細(xì)胞的損傷,不能促進(jìn)自噬水平
        3.7.Mst1基因敲低后,OSM不能進(jìn)一步減少原代心肌細(xì)胞缺氧后凋亡
        3.8.Mst1基因敲低后,OSM不能進(jìn)一步改善原代心肌細(xì)胞缺氧后線粒體膜電位
        3.9.OSM顯著促進(jìn)Mst1基因過表達(dá)原代心肌細(xì)胞GFP-LC3的表達(dá),Mst1基因敲低后,該作用消失
        3.10.Mst1基因敲低后,OSM不能進(jìn)一步抑制原代心肌細(xì)胞缺氧后p62與蛋白聚集體的聚集
        3.11.Mst1基因敲低后,OSM不能進(jìn)一步促進(jìn)原代心肌細(xì)胞缺氧后自噬流水平
        3.12.OSM通過Oβ受體抑制Mst1的磷酸化,促進(jìn)心肌梗死后心肌自噬
    4.討論
小結(jié)
參考文獻(xiàn)
個(gè)人簡(jiǎn)歷和研究成果
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]《中國(guó)心血管病報(bào)告2017》概要[J]. 陳偉偉,高潤(rùn)霖,劉力生,朱曼璐,王文,王擁軍,吳兆蘇,李惠君,顧東風(fēng),楊躍進(jìn),鄭哲,蔣立新,胡盛壽.  中國(guó)循環(huán)雜志. 2018(01)



本文編號(hào)：3687682