背景及目的:目前非霍奇金淋巴瘤已穩(wěn)居惡性腫瘤發(fā)病率、致死率的前10位,嚴(yán)重威脅人們的健康,侵襲性B細(xì)胞淋巴瘤是淋巴瘤的重要組成部分,也是目前此領(lǐng)域研究的重點(diǎn)。雖然利妥昔單抗、硼替佐米、來那度胺等藥物的出現(xiàn)已經(jīng)顯著改善了侵襲性B細(xì)胞淋巴瘤患者的預(yù)后,但是化療依然有著不可取代的地位,化療相關(guān)不良反應(yīng)以及腫瘤最終的復(fù)發(fā)進(jìn)展依然是困擾淋巴瘤醫(yī)生和患者的重要問題。因此,新藥或新的治療方案的研發(fā)以及對(duì)傳統(tǒng)化療藥物的改造是目前淋巴瘤研究的重點(diǎn)。本研究探討B(tài)ET蛋白抑制劑JQ1對(duì)淋巴瘤細(xì)胞的毒性及其對(duì)巨噬細(xì)胞功能的影響,并用聚谷氨酸接枝甲氧基聚乙二醇擔(dān)載血管阻斷劑CA4,探討JQ1與抗CD47抗體聯(lián)用治療人Burkitt淋巴瘤,JQ1與納米化CA4聯(lián)用治療A20鼠B細(xì)胞淋巴瘤的療效、作用機(jī)制及安全性,旨在為淋巴瘤的治療提供新的選擇。方法:1.細(xì)胞實(shí)驗(yàn):用CCK-8法檢測(cè)JQ1對(duì)Raji、Pfeiffer、BJAB和A20這4種淋巴瘤細(xì)胞活性的影響;用Annexin-FITC/PI雙染法檢測(cè)JQ1對(duì)Raji、Pfeiffer和A20細(xì)胞凋亡的影響;用流式細(xì)胞術(shù)探討JQ1對(duì)Raji、Pfeiffer和A2... 

【文章頁(yè)數(shù)】：124 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
前言
中文摘要
Abstract
中英文縮略詞對(duì)照表
第1章 緒論
    1.1 侵襲性B細(xì)胞淋巴瘤
        1.1.1 侵襲性B細(xì)胞淋巴瘤的特征
        1.1.2 侵襲性B細(xì)胞淋巴瘤的治療現(xiàn)狀
        1.1.3 腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞及其與B細(xì)胞NHL預(yù)后的關(guān)系
    1.2 BET蛋白抑制劑JQ1
        1.2.1 JQ1的結(jié)構(gòu)及作用機(jī)制
        1.2.2 JQ1的抗淋巴瘤作用
        1.2.3 JQ1對(duì)腫瘤免疫微環(huán)境的影響
        1.2.4 對(duì)JQ1耐藥的產(chǎn)生及相關(guān)藥物聯(lián)用方案
    1.3 抗CD47抗體
        1.3.1 抗CD47抗體的抗腫瘤作用機(jī)制
        1.3.2 抗CD47抗體在淋巴瘤中的應(yīng)用
    1.4 血管阻斷劑
        1.4.1 腫瘤相關(guān)血管的特征及血管阻斷劑的抗腫瘤作用機(jī)制
        1.4.2 淋巴瘤中的血管分布情況及臨床意義
        1.4.3 CA4的抗腫瘤治療現(xiàn)狀
        1.4.4 CA4對(duì)腫瘤免疫微環(huán)境的影響
    1.5 抗腫瘤納米藥物
        1.5.1 納米藥物的定義及優(yōu)勢(shì)
        1.5.2 納米藥物抗腫瘤作用的機(jī)制及影響因素
        1.5.3 抗腫瘤納米藥的研究現(xiàn)狀
    1.6 本課題的立題依據(jù)、研究?jī)?nèi)容及主要的創(chuàng)新點(diǎn)
        1.6.1 立題依據(jù)及研究?jī)?nèi)容
        1.6.2 創(chuàng)新點(diǎn)
第2章 材料與方法
    2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.1.1 淋巴瘤細(xì)胞系
        2.1.2 藥品
        2.1.3 試劑
    2.2 主要設(shè)備
    2.3 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
    2.4 實(shí)驗(yàn)方法
        2.4.1 CA4-NPs載藥量的檢測(cè)
        2.4.2 CA4-NPs粒徑的檢測(cè)
        2.4.3 CA4-NPs的釋放
        2.4.4 細(xì)胞培養(yǎng)
        2.4.5 抗CD47抗體的制備及純度檢測(cè)
        2.4.6 CCK-8 法細(xì)胞增殖檢測(cè)
        2.4.7 Annexin V-FITC/PI法細(xì)胞凋亡檢測(cè)
        2.4.8 細(xì)胞周期檢測(cè)
        2.4.9 JQ對(duì)細(xì)胞表面CD47、PD-L1表達(dá)水平的影響
        2.4.10 超純RNA的提取
        2.4.11 RT-PCR
        2.4.12 吞噬實(shí)驗(yàn)
        2.4.13 CCK-8 法檢測(cè)JQ1與抗CD47抗體聯(lián)用對(duì)淋巴瘤細(xì)胞增殖的影響
        2.4.14 酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(Enzyme-Linked Immuno SorbentAssay,ELISA)檢測(cè)細(xì)胞因子的水平
        2.4.15 JQ1對(duì)巨噬細(xì)胞極化的影響
        2.4.16 體內(nèi)抑瘤實(shí)驗(yàn)
        2.4.17 小鼠血細(xì)胞計(jì)數(shù)及肝功、腎功檢測(cè)
        2.4.18 組織石蠟包埋切片及HE染色
        2.4.19 免疫組織化學(xué)染色
    2.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
    2.6 主要技術(shù)路線
第3章 JQ1與抗CD47抗體聯(lián)用治療人BURKITT淋巴瘤的效果及相關(guān)機(jī)制研究
    3.1 引言
    3.2 結(jié)果
        3.2.1 JQ1對(duì)Raji、Pfeiffer和BJAB細(xì)胞增殖的影響
        3.2.2 JQ1對(duì)Raji、Pfeiffer細(xì)胞凋亡的影響
        3.2.3 JQ1對(duì)Raji、Pfeiffer細(xì)胞周期的影響
        3.2.4 JQ1對(duì)Raji、Pfeiffer表面CD47表達(dá)水平的影響
        3.2.5 JQ1對(duì)Raji細(xì)胞中C-MYC、CD47基因轉(zhuǎn)錄水平的影響
        3.2.6 JQ1對(duì)人巨噬細(xì)胞極化的影響
        3.2.7 JQ1與抗CD47抗體聯(lián)用對(duì)人巨噬細(xì)胞吞噬作用的影響
        3.2.8 JQ1與抗CD47抗體聯(lián)用對(duì)Raji、BJAB細(xì)胞存活率的影響
        3.2.9 JQ1與抗CD47抗體聯(lián)用的抑瘤效果
        3.2.10 JQ1與抗CD47抗體聯(lián)用的相關(guān)毒性
        3.2.11 JQ1與抗CD47抗體對(duì)腫瘤組織中Ki-67 表達(dá)水平的影響
    3.3 討論
    3.4 本章小結(jié)
第4章 JQ1與CA4-NPS聯(lián)用治療鼠B細(xì)胞淋巴瘤的效果及相關(guān)機(jī)制研究
    4.1 引言
    4.2 結(jié)果
        4.2.1 CA4-NPs的載藥量
        4.2.2 CA4-NPs的粒徑分布
        4.2.3 CA4-NPs在p H=5.5 和p H=7.4 條件下的藥物釋放
        4.2.4 JQ1對(duì)A20細(xì)胞增殖的影響
        4.2.5 JQ1對(duì)A20細(xì)胞凋亡的影響
        4.2.6 JQ1對(duì)A20細(xì)胞周期的影響
        4.2.7 JQ1對(duì)A20細(xì)胞表面CD47、PD-L1表達(dá)水平的影響
        4.2.8 JQ1對(duì)A20細(xì)胞中C-MYC、CD47和PD-L1基因轉(zhuǎn)錄水平的影響
        4.2.9 JQ1在基因轉(zhuǎn)錄水平對(duì)鼠巨噬細(xì)胞極化的影響
        4.2.10 JQ1在表面標(biāo)志方面對(duì)鼠巨噬細(xì)胞極化的影響
        4.2.11 JQ1在分泌細(xì)胞因子方面對(duì)鼠巨噬細(xì)胞極化的影響
        4.2.12 A20鼠淋巴瘤模型的建立
        4.2.13 JQ1與CA4-NPs聯(lián)用的抑瘤效果
        4.2.14 JQ1與CA4-NPs聯(lián)用的相關(guān)毒性
        4.2.15 JQ1與CA4-NPs對(duì)腫瘤組織中Ki-67、Casepase-3、C-MYC、CD47、PD-L1和HIF-1α 表達(dá)水平的影響
    4.3 討論
    4.4 本章小結(jié)
第5章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
作者簡(jiǎn)介及在讀期間所取得的科研成果
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]高分子抗腫瘤納米藥物的挑戰(zhàn)與發(fā)展[J]. 孫瑞,邱娜莎,申有青.  高分子學(xué)報(bào). 2019(06)
[2]基于多向藥理學(xué)的BET Bromodomain抑制劑及降解劑研究進(jìn)展[J]. 陳紅麗,陳海芳,張智敏,陸濤,陳亞東.  國(guó)際藥學(xué)研究雜志. 2017(06)
[3]小分子抑制劑JQ1抑制小鼠乳腺癌生長(zhǎng)及轉(zhuǎn)移[J]. 吳鵬,郭建,王威,劉妍,赫慧文,陳翀,羅云萍.  基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與臨床. 2016(07)
[4]中國(guó)淋巴瘤亞型分布:國(guó)內(nèi)多中心性病例10002例分析[J]. 李小秋,李甘地,高子芬,周小鴿,朱雄增.  診斷學(xué)理論與實(shí)踐. 2012(02)

博士論文
[1]蛋白質(zhì)乙�；揎梾⑴c鼠傷寒沙門菌毒力的調(diào)控[D]. 桑昱.上海交通大學(xué) 2016

碩士論文
[1]α-mangostin衍生物對(duì)新生大鼠腦癱模型的作用及其機(jī)制初探[D]. 李彩鳳.浙江工業(yè)大學(xué) 2019



本文編號(hào)：3666748