第一部分WSB2在黑色素瘤組織中陽性表達與患者臨床病理特征、預后關系的研究[目的]前期研究工作中,通過mRNA芯片技術篩選得出WSB2是黑色素瘤中特異表達的癌基因。本研究通過生物信息學分析、免疫蛋白印跡及免疫組織化學的方法,研究WSB2在黑色素瘤組織中的陽性表達;整理及分析黑色素瘤患者的臨床及病理資料,探討WSB2陽性表達與患者臨床病理特征的關系;對黑色素瘤患者進行電話隨訪,研究WSB2陽性表達與患者預后的關系。旨在獲得WSB2在黑色素瘤組織中陽性表達,且其高表達與患者臨床病理特征及預后相關的可靠證據(jù),為WSB2成為黑色素瘤診斷及治療中的分子靶標提供科學依據(jù)。[方法]首先,利用生物信息學分析的方法,在NCBI數(shù)據(jù)庫中提取WSB2在人黑色素瘤中的研究結(jié)果進行分析,評估WSB2在黑色素瘤中的陽性表達;利用TCGA數(shù)據(jù)庫內(nèi)的數(shù)據(jù)研究WSB2 陽性表達與皮膚黑色素瘤患者生存的關系。接下來,收集昆明醫(yī)科大學第三附屬醫(yī)院（云南省腫瘤醫(yī)院）手術切除的黑色素瘤及色素痣新鮮組織,BCA法檢測蛋白濃度,用免疫蛋白印跡的方法檢測黑色素瘤及色素痣新鮮組織中WSB2蛋白表達的情況。收集整理2010年1月至201... 

【文章來源】：昆明醫(yī)科大學云南省

【文章頁數(shù)】：141 頁

【學位級別】：博士

【部分圖文】：

圖２．免疫組化檢測ＷＳＢ２在黑色素瘤組織及良性色素痣中的表達

織Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔｔｉｎｇ灰度值遠高于色素痣組織，統(tǒng)計方法采用配對ｔ檢驗，ｐ＜０．０５，??差異有統(tǒng)計學意義。??０?Ａ?ｐ??／々、／＃／＃??／?Ａ－?／?Ａ－?＾??孑導孑孑導導??ＷＳＢ２?＿■＞＿＿＿?丨＿?ｍｍｍｍ?＿?？?？??ＧＡＰＤＨ?ｍｍｍｍ?ｍｍａｍ?ｍｍｍ?ｍｍｍ??〇?１．０－１??＇ｉ??＾?０．８－?—ｆ￣??①０．６?■纖緣戀??麵??ｓ〇．４－?ｉｉ§ｉ??ｉ〇，－?■?ｍ??＂Ｓ?〇〇?ａ－？：ｐＳａ＇?一??圖３．免疫印跡檢測結(jié)果以及相應的灰度分析結(jié)果．ｐ＜０．０５．??２?ＷＳＢ２在黑色素瘤中表達與患者臨床病理特點的關系??為研宄ＷＳＢ２在黑色素瘤中表達與患者臨床病理特點的關系，利用免疫組織??化學方法檢測ＷＳＢ２在黑色素瘤組織中的表達情況，運用卡方檢驗的的統(tǒng)計方??法，分別研究黑色素瘤患者年齡、性別、病理類型及ＴＮＭ分期等與黑色素瘤組??織中ＷＳＢ２的差異表達。本實驗中所用組織標本材料均取自昆明醫(yī)科大學第三附??屬醫(yī)院（云南省腫瘤醫(yī)院）病理科保存的存檔蠟塊。其中選�。玻埃保澳辏痹轮粒玻埃保�??年１２月保存的４９例惡性黑色素瘤及４９例良性色素痣組織蠟塊，患者平均年齡??５５．２７歲，年齡范圍２１至８］歲。共有９８例患者納入。??結(jié)果顯示：ＷＳＢ２在黑色素瘤中（相對色素痣）呈高表達，統(tǒng)計方法采用卡??方檢驗，ｐ＝〇．〇〇４，差異有統(tǒng)計學意義。ＷＳＢ２表達與黑素瘤患者的臨床病理特征??密切相關（表６）。其中，按臨床病理特點進行分層分析，統(tǒng)計方法采用卡方檢驗：??翁按年齡分為６０歲以下組和（ｎ＝２７）?６０歲及以上組（ｎ＝２２），在６０歲及??４２?

ｔ?ｏｆ?ＷＳＢ２?ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ?ｌｅｖｅｌ?ｏｎ?ＳＫＣＭ?ｐａｔｉｅｎｔ?ｓｕｒｖｉｖａｌ??；＼??Ｉ?ｉ?ｖ??ｉ０?５０?—，??ｉ??。２６?＾?ｓ??ｐ?＝?０．０１４?—???丨?＾＾－１—Ｌ＿??Ｅｘｐｒｏｓｓｉｏｎ?Ｌｏｖｅｉ??—Ｈｇｈ?ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ?（ｎ＝１１６）??〇〇〇?Ｌｏｗ／Ｍｅｄｉｕｍ－ｅｘｐ／ｅｓｓｉｏｎ?（ｎ？３４３）??０?３０００?６０００?＇?９０００??Ｔｉｍｅ?ｉｎ?ｄａｙｓ??圖４．生物信息學分析黑色素瘤患者生存期與ＷＳＢ２表達的關系（ＴＣＧＡ數(shù)據(jù)庫??ｈｔｔｐ：／／ｕａｌｃａｎ．ｐａｔｈ．ｕａｂ．ｅｄｕ／ｃｇｉ－ｂｉｎ／ｕａｌｃａｎ－ｒｅｓ．ｐｌ），?ｐ—０．０１４．??對２０１０年１月至２０１５年１２月在昆明醫(yī)科大學第三附屬醫(yī)院（云南省腫瘤??醫(yī)院）住院治療的４９例惡性黑色素瘤的患者進行為期三年的電話隨訪。統(tǒng)計患??者的總生存期（ＯＳ），結(jié)合患者腫瘤組織中ＷＳＢ２表達情況進行分析（圖??結(jié)果顯示：根據(jù)ＷＳＢ２免疫組織化學得分，可以分成２組：＜４分為ＷＳＢ２??低表達組（ｎ＝１４），彡４分為ＷＳＢ２高表達組（ｎ＝２０），見結(jié)果１。ＷＳＢ２高表達??４５??


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