發(fā)布時(shí)間：2022-01-11 20:38

　　【目的】通過(guò)研究維甲酸誘導(dǎo)基因1（RIG1）與肝癌發(fā)生發(fā)展的關(guān)系,并分析miR-362-5p和RIG1之間的結(jié)合關(guān)系,研究miR-362-5p結(jié)合RIG1后,調(diào)控PI3K/AKT信號(hào)通路,調(diào)節(jié)微環(huán)境的細(xì)胞免疫反應(yīng),對(duì)肝癌細(xì)胞侵襲轉(zhuǎn)移的影響�！痉椒ā浚�1）免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)RIG1在肝癌組織和癌旁組織中的表達(dá),分析其與肝癌的臨床病理特征的關(guān)系;（2）通過(guò)生物信息學(xué)方法預(yù)測(cè)能與RIG1基因相互作用的miRNA分子—miR-362-5p;（3）在肝癌組織和癌旁組織中分別用q RT-PCR檢測(cè)miR-362-5p的表達(dá)以及western blot檢測(cè)RIG1的表達(dá),分析miR-362-5p和RIG1之間的關(guān)系;（4）在不同轉(zhuǎn)移潛能的肝癌細(xì)胞株中用q RT-PCR技術(shù)檢測(cè)miR-362-5p以及western blot方法檢測(cè)RIG1、PI3K/AKT相關(guān)蛋白的表達(dá),分析肝癌細(xì)胞株中miR-362-5p表達(dá)與RIG1、PI3K/AKT相關(guān)蛋白表達(dá)之間的關(guān)系;（5）采用雙熒光素酶方法證實(shí)RIG1是miR-362-5p下游調(diào)控的靶基因;（6）研究miR-362-5p結(jié)合RIG1后,對(duì)PI3K/AK... 

【文章來(lái)源】：暨南大學(xué)廣東省 211工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】：78 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

RIG1在肝癌與癌旁組織中的表達(dá)A,癌旁組織HE染色；B,肝癌HE染色；

暨南大學(xué)博士學(xué)位論文miR-362-5p通過(guò)RIG1調(diào)控PI3K/AKT通路影響肝癌細(xì)胞侵襲轉(zhuǎn)移的機(jī)制研究-20-圖2miR-362-5p與RIG1在肝癌及癌旁組織中的表達(dá)A,miR-362-5p相對(duì)表達(dá)水平；B,RIG1表達(dá)水平；C,RIG1相對(duì)灰度值。*P＜0.01，**P＜0.01肝癌與癌旁組織比較。

暨南大學(xué)博士學(xué)位論文miR-362-5p通過(guò)RIG1調(diào)控PI3K/AKT通路影響肝癌細(xì)胞侵襲轉(zhuǎn)移的機(jī)制研究-29-圖3肝癌細(xì)胞中miR-362-5p、RIG1、PI3K、Akt表達(dá)關(guān)系A(chǔ),miR-362-5p相對(duì)表達(dá)水平；B,RIG1、PI3K、Akt檢測(cè)結(jié)果；C,RIG1、PI3K、Akt相對(duì)灰度值。*P＜0.01；**P＜0.01,MHCC97-H與MHCC97-L比較。3.2證實(shí)RIG1是miR-362-5p下游的靶基因通過(guò)miRanda在線軟件（http://www.microrna.org/microrna/）預(yù)測(cè)miR-362-5p和RIG1（DDX58）的結(jié)合位點(diǎn)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)miR-362-5p與RIG1（DDX58）3"-UTR存在結(jié)合位點(diǎn)（圖4），說(shuō)明RIG1（DDX58）是miR-362-5p下游的調(diào)控靶基因。圖4miRanda在線軟件預(yù)測(cè)的miR-362-5p和RIG1（DDX58）結(jié)合位點(diǎn)為進(jìn)一步驗(yàn)證miR-362-5p與RIG1（DDX58）結(jié)合，通過(guò)雙熒光素酶報(bào)告基因系統(tǒng)檢測(cè)（實(shí)驗(yàn)委托廣州銳博生物科技有限公司完成），結(jié)果發(fā)現(xiàn)：miR-362-5pmimic能夠抑制RIG1野生型（RIG1-WT）表達(dá)，而對(duì)RIG1突變型（RIG1-Mut）表達(dá)無(wú)顯著抑制作用(圖5),說(shuō)明miR-362-5p能夠結(jié)合到野生型RIG1上相應(yīng)的3"-UTR位點(diǎn)，而無(wú)法結(jié)合到突變型RIG1上的3"-UTR位點(diǎn)。因此RIG1是miR-362-5p的下游靶基因，miR-362-5p可結(jié)合RIG1上的3"-UTR位點(diǎn)，并抑制其表達(dá)。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]肝癌根治術(shù)治療原發(fā)性肝癌患者的術(shù)后生存率及預(yù)后影響因素分析[J]. 譚妮,鄭海平,歐超.  現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學(xué). 2019(05)
[2]miR-362-5p在胃癌中的表達(dá)及對(duì)胃癌細(xì)胞增殖和遷移的影響[J]. 魏小麗,Ahmed Yaser,趙奇紅,王華,顧康生.  安徽醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào). 2018(12)
[3]長(zhǎng)鏈非編碼RNACASC2在腫瘤中的研究進(jìn)展[J]. 曹金玉,劉繁榮.  臨床與實(shí)驗(yàn)病理學(xué)雜志. 2018(07)
[4]基于癌癥基因信息數(shù)據(jù)庫(kù)分析載脂蛋白F在腫瘤中生物學(xué)意義[J]. 熊志勇,吳玨堃,梁豪.  中華實(shí)驗(yàn)外科雜志. 2018 (03)
[5]miR-362-5p靶向DKK1促進(jìn)舌鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞增殖和侵襲[J]. 周媛,唐海闊,胡飚.  中華口腔醫(yī)學(xué)研究雜志(電子版). 2017(02)
[6]自然殺傷細(xì)胞在原發(fā)性肝細(xì)胞肝癌中的浸潤(rùn)及其與預(yù)后的關(guān)系[J]. 朱玲燕,周嘉,劉彥章,潘衛(wèi)東.  癌癥. 2009(11)
[7]PI3K/AKT信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路在肝癌細(xì)胞生長(zhǎng)和黏附中的作用[J]. 富翠芹,王沁,尹蓉,武令啟.  世界華人消化雜志. 2008(14)



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