呼吸系統(tǒng)疾病是重大慢性非傳染性疾病,具有發(fā)病率高、藥物依賴性大和反復(fù)發(fā)作等特點,迫切需要新技術(shù)和新方法,研發(fā)高效創(chuàng)新藥物,以實現(xiàn)該類疾病的有效防治。中藥作為呼吸系統(tǒng)疾病的主要防治手段,其活性成分篩選一直是中藥創(chuàng)新藥物研發(fā)的卡脖子瓶頸問題,已發(fā)展成為醫(yī)藥衛(wèi)生領(lǐng)域正在新興的難點和熱點問題之一。本論文以三子養(yǎng)親湯為例,針對其抗哮喘活性成分不明確和靶點不清晰等問題,重點開展活性成分固定化腎上腺素受體色譜篩選新方法的創(chuàng)建和應(yīng)用研究。該研究有望實現(xiàn)三子養(yǎng)親湯抗哮喘活性成分快速解析、解決藥物活性成分篩選周期長和準(zhǔn)確率低的瓶頸問題,能為其他中藥活性成分篩選提供方法借鑒,對高效中藥創(chuàng)新藥物研發(fā)具有積極作用。全文共分四章,作者的主要貢獻如下:1、建立了一步化β₂-AR色譜固定相制備新方法。以β₂-腎上腺素受體（β₂-Adrenoceptor,β₂-AR）為例,將O⁶-烷基鳥嘌呤DNA甲基轉(zhuǎn)移酶融合至受體非活性碳末端,大腸桿菌表達獲得融合受體,利用細(xì)胞裂解液中重組受體所含酶與芐基鳥嘌呤衍生物修飾微球... 

【文章來源】：西北大學(xué)陜西省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：125 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

β2-AR的3D結(jié)構(gòu)圖

Tanon Fine-Do X6 化學(xué)發(fā)光成像系統(tǒng)采集圖像。2.3.4 芐基鳥嘌呤衍生物的合成及結(jié)構(gòu)分析參照文獻制備方法[135,136]，以 2-氨基-6 氯嘌呤為合成反應(yīng)底物，如圖 2.1 所示合成路線制備獲得芐基鳥嘌呤衍生物。除特有情況注釋說明外，文中合成用所有試劑均為分析純。合成產(chǎn)物采用硅膠柱色譜進行分離純化，薄層層析法進行初步分析鑒定，所用硅膠（020131030，200-300 目，比表面積 300-400 m2/g）及硅膠薄層板（SGF 254，0.2±0.03mm, 10-40 μm）均來自煙臺江友硅膠開發(fā)公司。核磁共振波譜和質(zhì)譜測定結(jié)果分別通過美國瓦里安公司的 Bruker Avance 300 和美國安捷倫公司的 6520 型 Q-tof 質(zhì)譜進行測定。西北大學(xué)博士學(xué)位論文

液（約 80 mmol, 4.0 eq），期間有大量白色固體析出，攪拌 10 分鐘。靜置一段時間后，抽濾，濾餅用適量水洗滌，干燥濾餅，得灰白色固體。將此固體加入到約 100 mL 的甲基叔丁基醚溶液中，攪拌或者超聲均勻，抽濾，所得濾餅再放置于 50 mL 的甲基叔丁基醚中，攪拌或者超聲均勻，抽濾，用適量甲基叔丁基醚洗滌濾餅，濾餅干燥后即得灰白色固體產(chǎn)物，即化合物 1。化合物 2 的合成：將化合物 1（3.2 g, 10.0 mmol, 1.0 eq）加入到無水 DMF（100 mL）中，冷卻至 0 ℃，攪拌至溶解，分批加入 NaH（1.4 g, 60%/W, 36.0 mmol, 3.6 eq. ），氮氣保護下0 ℃攪拌反應(yīng)1小時。將對甲氧基苯甲基溴(PMB-Br，7.2 g, 36.0 mmol, 3.6 eq)的無水 DMF (20 mL)溶液慢慢滴加至上述溶液中，然后升至 25℃攪拌過夜。在攪拌下將反應(yīng)液加入至 500 mL 冰水中，混勻后加入 300 mL 的乙酸乙酯。分出有機相，用食鹽水洗滌（3 100 mL），無水 Na2SO4干燥，旋干，過柱（TLC：EA orDCM/MeOH=15/1）得白色固體產(chǎn)物 2。

【參考文獻】：
期刊論文
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博士論文
[1]“三子養(yǎng)親湯”通過抑制CysLTs介導(dǎo)的炎癥通路改善哮喘癥狀的機制研究[D]. 曹梔.成都中醫(yī)藥大學(xué) 2015



本文編號：3576049