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鷹嘴豆異黃酮的分離純化及其對人乳腺癌細(xì)胞抑制作用的轉(zhuǎn)錄組學(xué)研究

發(fā)布時間:2021-11-23 16:53
  乳腺癌是女性中最常見的惡性腫瘤之一,尋找乳腺癌的新型天然化學(xué)預(yù)防劑和用于治療的新型天然化學(xué)增強(qiáng)劑是當(dāng)前預(yù)防和治療乳腺癌研究的熱點(diǎn)。國外流行病學(xué)研究表明,亞洲地區(qū)乳腺癌的發(fā)病率遠(yuǎn)低于其他地區(qū),主要原因是人們食用含有大量植物雌激素的豆類食品。異黃酮類化合物是廣泛存在于大豆、鷹嘴豆等豆科植物中的一類生物活性物質(zhì),具有廣泛的生理活性,其分子結(jié)構(gòu)與動物雌性激素比較相似,被稱作植物雌激素。異黃酮的化學(xué)結(jié)構(gòu)為雙酚,與人體分泌的雌激素在結(jié)構(gòu)上十分相似,能與雌激素受體結(jié)合、誘導(dǎo)產(chǎn)生弱雌激素樣作用,能有效抑制癌細(xì)胞的增殖和誘導(dǎo)細(xì)胞調(diào)亡,是一種很有潛力的癌癥化學(xué)預(yù)防劑。研究表明,豆類發(fā)芽后,異黃酮含量會明顯增多,尤其鷹嘴豆,其發(fā)芽前后異黃酮含量可增加100倍,因此,發(fā)芽可作為富集鷹嘴豆總異黃酮的方法。鷹嘴豆豆芽中含有更高含量的總異黃酮成分,但其它化學(xué)成分復(fù)雜,簡單的提取工藝達(dá)不到更高的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn),需純化去除粗提物中含有的大量蛋白、多糖、脂肪酸、鞣質(zhì)等雜質(zhì)。本研究以鷹嘴豆短期發(fā)芽后摘取的芽部位干燥物為原料,確定鷹嘴豆異黃酮的最佳提取工藝為:提取溫度70℃,提取時間1.5 h,液固比25∶1,乙醇體積分?jǐn)?shù)60%;... 

【文章來源】:吉林大學(xué)吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】:152 頁

【學(xué)位級別】:博士

【部分圖文】:

鷹嘴豆異黃酮的分離純化及其對人乳腺癌細(xì)胞抑制作用的轉(zhuǎn)錄組學(xué)研究


染料木黃酮刺激乳腺癌細(xì)胞增殖作用機(jī)制[172]

黃酮,靶標(biāo),細(xì)胞凋亡,染料


第2章文獻(xiàn)綜述25[199]。因此,如圖2.3所示,異黃酮特別是染料木黃酮會以靶向關(guān)鍵分子干擾控制細(xì)胞凋亡和細(xì)胞存活的幾種途徑。圖2.3與細(xì)胞凋亡和存活機(jī)制相關(guān)的染料木黃酮的主要分子靶標(biāo)[172]帶箭頭的實(shí)線表示激活(或上調(diào)),虛線表示抑制(或下調(diào))。縮寫:Akt,蛋白激酶-B;ASK1,細(xì)胞凋亡信號調(diào)節(jié)激酶1;Bad,Bcl-2相關(guān)的死亡啟動子;Bcl-2,B細(xì)胞淋巴瘤2;Bcl-xL,B細(xì)胞淋巴瘤超大;Casp-3,-4,-9,半胱天冬酶s-3,4和9;Cyto-c,細(xì)胞色素c;Erk1/2,細(xì)胞外信號調(diào)節(jié)激酶1/2;FADD,F(xiàn)as相關(guān)蛋白與死亡結(jié)構(gòu)域;IKKα和IKKβ,IκB激酶;JNK,Jun氨基末端激酶;mTOR,雷帕霉素的哺乳動物靶標(biāo);NEMO,NF-κB基本調(diào)節(jié)劑;NF-κB,核因子κB;p53,腫瘤蛋白p53;PI3K,磷酸肌醇3-激酶;PIP3,磷脂酰肌醇(3,4,5)-三磷酸;PTEN,磷酸酶和張力蛋白同系物;TRADD,TNF受體相關(guān)的死亡結(jié)構(gòu)域;TRAF2,TNF受體相關(guān)因子2。Fig.2.3Themainmoleculartargetsofgenisteinthatareinvolvedinapoptosisandcellsurvivalmechanisms[172].Arrow-headedlinesindicateactivation(orupregulation)andbar-headedlinesindicateinhibition(ordownregulation).Abbreviations:Akt,Proteinkinase-B;ASK1,Apoptosissignal-regulatingkinase1;Bad,Bcl-2-associateddeathpromoter;Bcl-2,B-celllymphoma2;Bcl-xL,B-celllymphoma-extralarge;Casp-3,-4,-9,Caspases3,4and9;Cyto-c,Cytochrome-c;Erk1/2,

工作流程圖,工作流程,文庫


第2章文獻(xiàn)綜述31圖2.4RNA-seq工作流程(a)RNA-seq文庫構(gòu)建示意圖。從細(xì)胞中提取總RNA,使用小等份試樣測量RNA的完整性。然后通過幾種方法之一將rRNA耗盡以富集RNA分子的亞群,如mRNA或小RNA。mRNA被片段化成均一的大小分布,并且可以通過RNA凝膠電泳或基于微流體的生物分析儀如Agilent2100生物分析儀(AgilentTechnologies,SantaClara,CA)來監(jiān)測片段大校然后將cDNA制成文庫。(b)繪圖程序?qū)⒆x取與參考基因組和映射接頭連接對齊;虮磉_(dá)可以定量為絕對讀數(shù)或標(biāo)準(zhǔn)化值,如RPKM。(c)如果RNA-seq數(shù)據(jù)集足夠深并且讀取足夠長以映射足夠的剪接點(diǎn),則映射讀取可以被組裝成轉(zhuǎn)錄物。(d)可以通過將轉(zhuǎn)錄組

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]大豆與大豆芽中異黃酮的含量、組成及分布比較研究[J]. 劉琴,牛文慧,張薇娜,胡秋輝.  食品工業(yè)科技. 2013(21)
[2]發(fā)芽促進(jìn)了鷹嘴豆芽中異黃酮芒柄花素和鷹嘴豆芽素A的合成[J]. 張玲,王重,夏作理.  營養(yǎng)學(xué)報(bào). 2010(06)
[3]鷹嘴豆生藥學(xué)的初步研究[J]. 田春元.  安徽農(nóng)業(yè)科學(xué). 2009(18)
[4]紫外分光光度法測定鷹嘴豆和豆芽中異黃酮含量的研究[J]. 程珍,阿依古力·阿不列孜,馬慶玲,高艷華,阿吉艾克拜爾·艾薩.  時珍國醫(yī)國藥. 2008(11)

博士論文
[1]基于構(gòu)建基因相互作用網(wǎng)絡(luò)的新方法挖掘肺腺癌激活的信號通路[D]. 陳娟.山東大學(xué) 2016

碩士論文
[1]三萜類醌甲基化合物雷公藤紅素的HPLC-UV和UPLC-Q-TOF分析方法及其大鼠體內(nèi)代謝的研究[D]. 薛云云.上海交通大學(xué) 2011
[2]大孔吸附樹脂在富集分離中藥有效部位工藝中的應(yīng)用[D]. 岳敏.首都師范大學(xué) 2004



本文編號:3514299

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