發(fā)布時(shí)間：2021-11-23 08:58

　　研究背景和目的:肝細(xì)胞癌（Hepatocellular carcinoma,HCC）是一種死亡率高的原發(fā)性肝癌,在全球范圍內(nèi)高發(fā),尤其是亞洲,非洲和南部歐洲,在我國(guó),肝細(xì)胞癌的發(fā)病人數(shù)幾乎占到全球發(fā)病人數(shù)的一半。肝細(xì)胞癌發(fā)病隱匿,早期癥狀不明顯,等出現(xiàn)癥狀時(shí)多已到中晚期,或伴遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移。此時(shí)手術(shù)治療效果不理想,導(dǎo)致患者很快死亡。因此,闡明肝癌的轉(zhuǎn)移機(jī)制,對(duì)肝癌的早期發(fā)現(xiàn)及治療有十分重要的意義。本文對(duì)肝細(xì)胞癌的轉(zhuǎn)移機(jī)制進(jìn)行研究,旨在發(fā)現(xiàn)介導(dǎo)肝細(xì)胞癌轉(zhuǎn)移的關(guān)鍵分子,為肝細(xì)胞癌的治療提供新的靶點(diǎn)。HMGA2（high mobility group AT-hook2）是高遷移率蛋白（high mobility group,HMG）家族成員之一,此外,HMGA1（high mobility group AT-hook1）也是該家族的一員。HMGA1是一種結(jié)構(gòu)性轉(zhuǎn)錄因子,通過(guò)與其他轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合,協(xié)同調(diào)控下游靶基因的轉(zhuǎn)錄。研究發(fā)現(xiàn),HMGA1在多種腫瘤組織（肝癌、乳腺癌、胰腺癌、皮膚癌等）中表達(dá)水平顯著上調(diào),并且可以通過(guò)調(diào)節(jié)多種靶基因的轉(zhuǎn)錄,促進(jìn)腫瘤的增殖和轉(zhuǎn)移。HMGA2蛋白主要定位于細(xì)胞核中,雖然... 

【文章來(lái)源】：鄭州大學(xué)河南省 211工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】：109 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

圖１－１．肝癌模型組大鼠肝臟中ＨＭＧＡ２的表達(dá)明顯上調(diào)

ｒｅａｔｅｄ?ｒａｔｓ．??＊＊尸＜０．０１?ｃｏｍｐａｒｅｄ?ｗｉｔｈ?ｖｅｈｉｃｌｅ?ｇｒｏｕｐ，?＂＂￣Ｐ＜０．００１?ｃｏｍｐａｒｅｄ?ｗｉｔｈ?ｎａｉｖｅ?ｇｒｏｕｐ．?Ｏｎｅ?ｗａｙ??ＡＮＯＶＡ?ａｎａｌｙｓｉｓ，?ｎ＝１０／ｇｒｏｕｐ．??１．２．２?ＨＭＧＡ２不影響肝癌細(xì)胞的增殖??為了明確ＨＭＧＡ２在肝癌中的作用，我們首先檢測(cè)了?ＨｅｐＧ２、ＢＥＬ－７４０２、??ＭＨＣＣ－９７Ｈ、ＨＣＣ－ＬＭ３等四種肝癌細(xì)胞系中ＨＭＧＡ２?ｍＲＮＡ和蛋白的表達(dá)情況。??實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖１－２所示，ＨＭＧＡ２?ｍＲＮＡ和蛋白的表達(dá)在ＨｅｐＧ２、ＢＥＬ－７４０２中??較低，在ＭＨＣＣ－９７Ｈ、ＨＣＣ－ＬＭ３中的表達(dá)較高。??Ａ?Ｂ?ＨｅｐＧ２?ＭＨＣＣ－９７Ｈ?ＢＥＬ－７４０２?ＨＣＣ－ＬＭ３??Ｉ??ＨＭＧＡ２?ｍｍｍ?ｍｍｍｍ?ｍａｍ?１２?ｋＤ??３－ａｃｔｉｎ?ＭＨＩ?４３??ｇ?２．０－，?ｇ?２．０－，??Ｔ?丁??Ｐ１＇５＇?ｒ＾ｉ?ｌｒ?ｎ??ｘ?ｘ?１－０－?？、１．０－??Ｉｓ??ｒｏ?￡?０．５－?—＊?〇）?￥?０．５－??Ｈ?ｒ｜?ｒｎ?ｒｎ??荸?〇？〇丄Ｊ￣￣ｉ￣￣￣￣￣ｉ—■￣￣ｉ￣＊－?ａ?〇．〇』■？—■ｉ￣—■￣ｉ一一￣￣ｉ￣—■ｉ￣匕??Ｘ?ＨｅｐＧ２?ＭＨＣＣ－９７Ｈ?ＢＥＬ－７４０２?ＨＣＣ－ＬＭ３?ＨｅｐＧ２?ＭＨＣＣ－９７Ｈ?ＢＥＬ－７４０２?ＨＣＣ－ＬＭ３??圖１－２．?ＨＭＧＡ２在四種肝癌細(xì)胞中的表達(dá)情況。（Ａ）?ＲＴ－ＰＣＲ結(jié)果顯示ＨＭＧＡ２?ｍＲＮＡ在??肝癌細(xì)胞ＭＨＣＣ－９７Ｈ和ＨＣＣ－ＬＭ３中的表達(dá)明顯較ＨｅｐＧ２和ＢＥＬ－７４〇２

?ｃｅｌｌ?ｗａｓ?ｃｏｎｓｔｒｕｃｔｅｄ．＊＊＊尸＜０．００１?ｃｏｍｐａｒｅｄ?ｗｉｔｈ?ｖｅｃｔｏｒ?ｇｒｏｕｐ，??■尸＜０．００１?ｃｏｍｐａｒｅｄ?ｗｉｔｈ?ｎａＹｖｅ?ｇｒｏｕｐ，Ｏｎｅ?ｗａｙ?ＡＮＯＶＡ?ａｎａｌｙｓｉｓ，?ｎ＝５／ｇｒｏｕｐ．??為了確定ＨＭＧＡ２是否對(duì)肝癌細(xì)胞的增殖有影響，我們首先將相同數(shù)目的??ＨｅｐＧ２、ＨｅｐＧ２－Ｖｅｃｔｏｒ和ＨｅｐＧ２－ＨＭＧＡ２細(xì)胞接種在９６孔板中，連續(xù)培養(yǎng)１？７??天，然后采用ＭＴＴ法檢測(cè)上述細(xì)胞的增殖情況。實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖１－４所示，與空??白對(duì)照組和空載體組相比，ＨＭＧＡ２過(guò)表達(dá)的ＨｅｐＧ２細(xì)胞的生長(zhǎng)曲線并沒(méi)有顯??著變化。接下來(lái)，我們觀察敲減肝癌細(xì)胞中ＨＭＧＡ２的表達(dá)能否抑制肝癌細(xì)胞??的增殖。當(dāng)使用特異性的ｓｈＲＮＡ基因敲減ＭＨＣＣ－９７Ｈ細(xì)胞中內(nèi)源性ＨＭＧＡ２??的表達(dá)后，將相同數(shù)目的?ＭＨＣＣ－９７Ｈ、ＭＨＣＣ－９７Ｈ－Ｖｅｃｔｏｒ?和?ＭＨＣＣ－９７Ｈ－??ｓｈＨＭＧＡ２細(xì)胞接種于９６孔板中，連續(xù)培養(yǎng)１？７天，ＭＴＴ實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示與空白??對(duì)照組或轉(zhuǎn)染空載體的細(xì)胞相比，ＨＭＧＡ２敲減的ＭＨＣＣ－９７Ｈ細(xì)胞的生長(zhǎng)曲線??也沒(méi)有明顯變化。這些實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，ＨＭＧＡ２對(duì)腫瘤細(xì)胞的增殖沒(méi)有明顯的影??響。??Ａ?Ｂ??—?？Ｎａｉｖｅ?１．５－１?Ｎａｉｖｐ??ＨｅｐＧ２?＋?Ｖｅｃｔｏｒ?ＭＨＣＣ－９７Ｈ?＋?Ｎａｉｖｅ??＋?ｖｅｃｔｏｒ?＋?ＶＧＣｔｏｒ??０，?ＨＭＧＡ２?Ｘ?ｓｈＨＭＧＡ２?Ｊ??ｒ?ｒ?＾??１?°＇５＇?１０５??〇■〇?１?ｂ?ｉ?ｉ?ｉ?ｉ?ｉ?ｉ?ｉ?〇■〇?Ｉｋ?ｉ?ｉ?ｉ

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]EGFR與慢性肝病、原發(fā)性肝癌的相關(guān)性[J]. 韓少靜,郭永澤,李帆,張宏偉.  肝臟. 2018(12)
[2]HMGA2與消化道惡性腫瘤關(guān)系的研究進(jìn)展[J]. 石磊,劉福建,賈秋紅.  醫(yī)學(xué)綜述. 2018(09)
[3]shRNA沉默HMGA2對(duì)食管癌ECA109細(xì)胞增殖和凋亡的影響[J]. 郭小琦,梁英平,薛鋒,王鵬國(guó),陳偉.  癌癥進(jìn)展. 2017(11)
[4]表皮生長(zhǎng)因子受體與肝癌發(fā)病機(jī)制及靶向治療的研究進(jìn)展[J]. 王濤,王人顥.  中國(guó)腫瘤外科雜志. 2017(05)
[5]HMGA2在結(jié)腸癌組織中的表達(dá)及意義[J]. 朱哲,李楊,江期鑫,紀(jì)昉,高瑋.  同濟(jì)大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版). 2017(05)
[6]HMGA1和HMGA2在胰腺癌中的表達(dá)及臨床意義[J]. 王運(yùn)良,李翠.  河北醫(yī)藥. 2017(10)
[7]高遷移率族蛋白A2基因與腫瘤關(guān)系的研究進(jìn)展[J]. 傅孝媛,張獻(xiàn)全,周琪.  重慶醫(yī)學(xué). 2016(14)
[8]HMGA2蛋白在肝膽管細(xì)胞癌及肝細(xì)胞癌組織中的表達(dá)及意義[J]. 袁波,沈杰,凌建新,周玉坤,蔡珍福.  實(shí)用癌癥雜志. 2013(03)
[9]高遷移率族蛋白A2與腫瘤[J]. 楊國(guó)良,薄雋杰.  中國(guó)癌癥雜志. 2010(02)
[10]影響原發(fā)性肝細(xì)胞肝癌切除術(shù)預(yù)后的多因素分析[J]. 季錫清,李朝龍,楊進(jìn)城,楊鴻魁,劉興國(guó),王孟龍,林智琪.  中華普通外科雜志. 2004(02)

博士論文
[1]HMGA2對(duì)鼻咽癌惡性生物學(xué)行為的影響及機(jī)制研究[D]. 夏鈾鈾.南京醫(yī)科大學(xué) 2016

碩士論文
[1]HMGA2：一個(gè)潛在預(yù)測(cè)乳腺癌患者預(yù)后的標(biāo)記物及其分子機(jī)理研究[D]. 章時(shí)珍.浙江大學(xué) 2017



本文編號(hào)：3513551