目的:研究miR-199a-5p在高血壓患者外周血中的表達(dá)及其血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷的作用和機(jī)制。方法:招募87例原發(fā)性高血壓患者及31例正常健康人,作為研究對象。采用實(shí)時定量PCR檢測miR-199a-5p的表達(dá);體外培養(yǎng)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞（HUVEC）并分為NC組（scramble control miRNA）、hsa-miR-199a-5p mimics和Rescue組。將control miRNA、hsa-miR-199a-5p mimics及hsa-miR-199a-5p mimics+inhibitor分別轉(zhuǎn)染至HUVEC NC組和HUVEC Rescue組中,分別采用CCK-8、流式細(xì)胞術(shù)分子探索對hsa-miR-199a-5p對HUVECs的細(xì)胞增殖、細(xì)胞周期、細(xì)胞調(diào)亡及細(xì)胞遷移能力的影響;采用Western Blot印跡雜交檢測下調(diào)hsa-miR-199a-5p表達(dá)后,HUVECs中hsa-miR-199a-5p的靶基因AMPK蛋白及信號通路中ULK1蛋白的表達(dá)。結(jié)果:hsa-miR-199a-5p在原發(fā)性高血壓組患者血清中的表達(dá)水平明顯高于正常健康人對照組。CCK-8體外實(shí)... 

【文章來源】：青島大學(xué)山東省

【文章頁數(shù)】：89 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

EH患者及健康對照組外周血差異表達(dá)的miRNAs

miR-199a-5p在高血壓外周血中表達(dá)水平

青島大學(xué)博士學(xué)位論文24結(jié)果1CCK-8檢測miR-199a-5p對細(xì)胞增殖的影響我們的結(jié)果顯示，轉(zhuǎn)染miR-199a-5pmimics表達(dá)后，人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞的增殖速度明顯減慢（P＜0.05），而共轉(zhuǎn)染miR-199a-5pinhibitor后，HUVEC細(xì)胞的增殖速度加快，這一結(jié)果提示過表達(dá)miR-199a-5p能夠抑制人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞的增殖能力，而高血壓患者外周血中miR-199a-5p表達(dá)的上調(diào)，可能導(dǎo)致人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞增殖減慢，對血管內(nèi)皮損傷的修復(fù)減慢，見圖1#P＜0.05，與miR-199a-5pmimics組相比，Rescue組的HUVEC細(xì)胞增殖速度加快*P＜0.05，與miR-NC組相比，miR-199a-5pmimics組的HUVEC細(xì)胞增殖減慢圖1miR-199a-5p對人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞增殖能力的影響2miR-199a-5p對人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞凋亡的影響流式細(xì)胞技術(shù)檢測miR-199a-5p對人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞凋亡的影響，結(jié)果顯示，miR-199a-5p組的凋亡率明顯高于NC組；而Rescue組的凋亡率明顯低于miR-199a-5p組，提示miR-199a-5p能夠調(diào)控促進(jìn)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞的凋亡，見圖2及圖3.圖2miR-199a-5p對人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞凋亡的流式細(xì)胞監(jiān)測圖


本文編號：3482191