發(fā)布時間：2017-05-06 05:02

  本文關鍵詞：針刺“百會”透“曲鬢”對腦出血急性期大鼠PI3K、p-AKT、Bax影響的研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的：觀察針刺“百會”透“曲鬢”對腦出血大鼠腦組織PI3K、p-AKT以及Bax表達的影響,探討其對腦組織細胞凋亡及神經(jīng)保護的作用機制。方法：選取健康雄性Wistar大鼠144只,隨機分為三組：模型組、針刺組(模型+針刺組)、假手術組,每組48只大鼠。每組再隨機分為6h、1d、3d、7d四個亞組,每個亞組12只大鼠,制備腦出血模型。假手術組大鼠接受類似模型組的各項手術操作,但不進行注血。針刺組大鼠在腦出血造模成功后,立即針刺“百會”透“曲鬢”進行治療。各組大鼠神經(jīng)功能缺損體征應用Berder son評分法以及Rosenberg評分法進行綜合評價；光鏡下采用HE染色法對各組大鼠腦組織形態(tài)學改變進行觀察；各組大鼠腦出血半暗帶區(qū)細胞凋亡情況應用TUNEL法進行檢測；運用免疫組織化學及蛋白免疫印記法分別檢測各組ICH模型大鼠不同時間點腦組織中PI3Kp-AKT以及Bax的表達情況。結果：1.針刺組大鼠較模型組大鼠神經(jīng)功能缺損體征有明顯恢復,在1d,3d,7d時針刺組大鼠評分明顯低于模型組,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)。2.HE染色顯示：針刺組出血灶明顯小于同時間點模型組,炎性細胞數(shù)量較模型組減少,水腫程度低于模型組,腦組織破壞情況遠輕于模型組大鼠,細胞形態(tài)排列較規(guī)整。3. TUNEL法檢測結果：針刺組各時段細胞凋亡數(shù)量均較模型組減少,術后3d、7d時,針刺組出血灶周半暗帶區(qū)的TUNEL陽性細胞數(shù)明顯低于模型組,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)；4.PI3K免疫組化結果：模型組術后6h時,出血灶周圍即出現(xiàn)較高的PI3K陽性細胞表達,至術后1d時達到最高值；針刺組術后各時間點PI3K的陽性細胞數(shù)高于模型組, 均有顯著性差異(P0.05)。5.p-AKT免疫組化結果：模型組術后6h時,在半暗帶區(qū)即有相當數(shù)量的p-AKT陽性細胞表達,術后1d時達到高峰；針刺組術后各時段p-AKT陽性細胞表達數(shù)量均高于模型組,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)6.Bax免疫組化結果：模型組術后6h時,Bax陽性細胞數(shù)即出現(xiàn)表達增多,術后3d時達到最高值；針刺組Bax每個時間點陽性細胞表達數(shù)量均低于模型組,各時間點差異均有統(tǒng)計學意義(P0.05)7.PI3K蛋白免疫印記結果：模型組術后6h時,PI3K蛋白表達量已明顯增加,術后1d時達到最高值；針刺組大鼠術后各個時間點腦組織PI3K蛋白的表達量均增多, 差異具有統(tǒng)計學意義(P0.05)8.p-AKT蛋白免疫印記結果：模型組p-AKT蛋白表達量在術后6h已有較明顯增多,于術后1d時達到高峰；針刺組大鼠各時段p-AKT蛋白表達量都高于模型組,差異均具有統(tǒng)計學意義(P0.05)9.Bax蛋白免疫印記結果：在術后6h時,模型組大鼠即有Bax蛋白明顯表達,術后3d時達到高峰；針刺組大鼠各時間點Bax蛋白表達含量均低于模型組,差異均具有統(tǒng)計學意義(P0.05)。結論：1.針刺“百會”透“曲鬢”可以對腦出血模型大鼠神經(jīng)功能缺損程度評分起到明顯的改善作用,減輕其神經(jīng)功能缺損癥狀；2. 針刺“百會”透“曲鬢”,可以明顯改善腦出血模型大鼠腦水腫程度,減輕炎性細胞浸潤,修復神經(jīng)細胞損傷,從而對其腦組織起到保護作用；3.針刺“百會”透“曲鬢”可以顯著降低腦出血模型大鼠半暗帶區(qū)腦組織凋亡細胞的數(shù)量,起到抗細胞凋亡的作用；4.針刺“百會”透“曲鬢”可能通過提高ICH模型大鼠腦出血半暗帶區(qū)PI3K的表達水平,發(fā)揮PI3K的抗細胞凋亡作用,從而使半暗帶區(qū)神經(jīng)細胞的調亡數(shù)量減少,對腦出血后繼發(fā)性損傷起到保護作用。5.針刺“百會”透“曲鬢”能夠增加ICH模型大鼠腦出血半暗帶區(qū)p-AKT的表達數(shù)量,增強其抗細胞凋亡作用,減少半暗帶區(qū)神經(jīng)細胞的調亡數(shù)量,從而起到保護腦出血灶周神經(jīng)元,減少繼發(fā)性損傷的作用。6.針刺“百會”透“曲鬢”能夠降低IC H模型大鼠腦出血半暗帶區(qū)Bax的表達數(shù)量,抑制其促細胞凋亡作用,從而起到保護腦出血灶周圍神經(jīng)細胞,減輕大鼠腦出血后繼發(fā)性損傷程度的作用。
【關鍵詞】：針刺“百會”透“曲鬢” 腦出血 細胞凋亡 PI3K p-AKT Bax
【學位授予單位】：黑龍江中醫(yī)藥大學
【學位級別】：博士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R245
【目錄】：

• 縮略語表4-6
• 中文摘要6-9
• Abstract9-13
• 前言13-15
• 文獻綜述15-43
• 1. 中醫(yī)學對腦出血的研究15-34
• 1.1 中醫(yī)學對本病證病名的記載和描述15
• 1.2 中醫(yī)學對本病證的病因病機認識15-18
• 1.3 中醫(yī)學對本病證的治療研究進展18-30
• 1.4 針灸對本病證的治療研究進展30-34
• 2. 現(xiàn)代醫(yī)學對腦出血的研究34-38
• 2.1 腦出血的病因34
• 2.2 腦出血發(fā)病機制34-35
• 2.3 腦出血后血腫周圍組織損傷的機制35-37
• 2.4 腦出血后的細胞凋亡機制37-38
• 3. PI3K/AKT信號轉導通路關鍵因子的研究進展38-43
• 3.1 PI3K的研究進展38-40
• 3.2 p-AKT的研究進展40-41
• 3.3 Bax的研究進展41-43
• 實驗研究43-64
• 1. 實驗材料與實驗方法43-53
• 1.1 實驗材料43-44
• 1.2 實驗方法44-53
• 2. 實驗結果53-64
• 2.1 各組大鼠神經(jīng)功能缺損體征評分53-54
• 2.2 各組大鼠腦組織形態(tài)學的光鏡觀察結果54-55
• 2.3 各組大鼠腦組織不同時間點TUNEL法檢測細胞凋亡結果55-56
• 2.4 各組大鼠腦組織中PI3K免疫組織化學檢測結果56-57
• 2.5 各組大鼠腦組織中p-AKT免疫組織化學檢測結果57-58
• 2.6 各組大鼠腦組織中Bax免疫組織化學檢測結果58-59
• 2.7 各組大鼠腦組織PI3K蛋白免疫印跡檢測結果59-60
• 2.8 各組大鼠腦組織p-AKT蛋白免疫印跡檢測結果60-62
• 2.9 各組大鼠腦組織Bax蛋白免疫印跡檢測結果62-64
• 討論64-78
• 1. 腦出血的實驗動物模型及實驗動物的選擇64-65
• 2. 針刺“百會”透“曲鬢”的選穴依據(jù)65-69
• 3. 針刺“百會”透“曲鬢”對腦出血大鼠神經(jīng)功能缺損體征評分影響69-70
• 4. 針刺“百會”透“曲鬢”對腦出血大鼠腦組織病理形態(tài)學影響70-71
• 5. 針刺“百會”透“曲鬢”對腦出血大鼠半暗帶區(qū)細胞凋亡的影響71-72
• 6. 針刺“百會”透“曲鬢”對腦出血大鼠腦組織PI3K表達的影響72-74
• 7. 針刺“百會”透“曲鬢”對腦出血大鼠腦組織p-AKT表達的影響74-75
• 8. 針刺“百會”透“曲鬢”對腦出血大鼠腦組織Bax表達的影響75-78
• 結論78-79
• 致謝79-80
• 參考文獻80-93
• 附圖93-103
• 攻讀博士學位期間發(fā)表論文情況103-105
• 個人簡介105

【參考文獻】

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  本文關鍵詞：針刺“百會”透“曲鬢”對腦出血急性期大鼠PI3K、p-AKT、Bax影響的研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：347745